UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE TECNOLOGA MDICA

ASIGNATURA: HISTOQUIMICA BASICA TEMA: REACTIVOS E INSUMOS EN LABORATORIO DE ANATOMA PATOLGICA DOCENTE: LIC. TM. RICARDO ALVARO SANTOS SALCEDO ALUMNOS: ALVAREZ LUQUE ABELARDO ARNADO CCERES YAKELINE

 LIC. TM. Ricardo lvaro Santos Salcedo y compaeros esperamos que este trabajo cuyo tema es Reactivos e Insumos en Laboratorio de Anatoma Patolgica, sea de vuestro agrado ya que lo realizamos con mucho esmero y que ademas cumpla con los objetivos para los que fue elaborado.
Atentamente: Los alumnos

 E l trabajo de reactivo e insumos en laboratorio de anatoma patolgica nos describe primeramente las definiciones de reactivo, insumos y nos da a conocer los mas usados en esta rea, yaqu hay diversos reactivos e insumos que no acabaramos de describir por ese motivo describimos las mas importantes o usadas, tales como agua destilada, fijadores (formol) , deshidratantes (alcohol), de inclusin (parafina), aclarantes (xilol), los de montaje (blsamo de Canad) y los colorantes usuales o mas aplicados y los especiales que nos ayudan a determinar ciertas estructuras. Adems brinda informacin sobre su aplicacin en el rea y reactivos e insumos utilizados en cada proceso.

 Reactivo Insumo Preparacin Histolgica de los tejidos Agua destilada Fijadores Formol Otros fijadores Alcoholes Otros deshidratantes Parafina Xilol Blsamo de Canad

Colorantes: Zielh Neelsen Gram cido Peryodico Hematoxilina-eosina Giemsa Tricromico de Masson Papanicolaou

 Un reactivo o reactante es, en qumica, toda sustancia que interacta con otra en una reaccin qumica que da lugar a otras sustancias de propiedades, caractersticas y conformacin distinta, denominadas productos de reaccin o simplemente productos.
Sustancia empleada en una reaccin

Diccionario ilustrado de Trminos Mdicos.. Alvaro Galiano. 2010

 Hace alusin a los elementos necesarios para llevar a cabo una determinada accin; es decir, los diversos componentes, ya sean reales o abstractos, que se renen en un grupo y que se emplean con fines especficos.

Es aquel que se emplea en distintos tipos de laboratorios y que se compone de diversos instrumentos que cumplen con funciones determinadas.

Fundamentos Generales de la Preparacin Histolgica de los tejidos

Reduccin de la pieza

Fijacin de la muestra

Introduccin en cassette de deshidratacin

Deshidratacin en alcoholes sucesivos

Penetracin de la parafina 56-58C

Barras de Leuckart

Es aquella que como todo tipo de agua esta compuesta por dos tomos de hidrgeno y uno de oxgeno, cuya molcula se representa qumicamente por la frmula H2O y que mediante el proceso de destilacin se le han eliminado las impurezas e iones.

Sinnimos: Formol, Formaldehido, Formalina, Aldehdo Frmico o metanal. xido de Metileno, oximetileno, Oxametano.

Es un gas incoloro de olor picante y sofocante que se comercializa en solucin acuosa. Se presenta en forma de un lquido incoloro, transparente de olor caracterstico fuertemente irritante.

APLICACIONES

FIJACIN

Previene los procesos de autolisis. Previene la contaminacin del tejido por bacterias o por hongos. Los tejidos fijados no cambian significativamente de forma y/o volumen. Permiten una correcta y clara tincin.
Insolubilizando los componentes estructurales de la clula

 Los alcoholes son compuestos que presentan en la cadena carbonada uno o ms grupos hidroxi u oxidrilo (-OH)

Fijan y deshidratan al mismo tiempo Posee una gran velocidad de penetracin Es un notable agente bactericida y por tanto un buen conservante

El mtodo clsico de deshidratacin es la sustitucin del agua por el alcohol pero puede realizarse utilizando cualquier reactivo capaz de absorber el agua de los tejidos.

No debe alterar la estructura tisular.

Debe poder mezclarse con el reactivo intermediario o agente aclarante.

 Alcohol metlico: A veces se usa como sustituto del anterior pero normalmente no. Y es muy inflamable y txico. Acetona: Es un agente deshidratante muy voltil y con una accin rpida. Si el tratamiento de los tejidos es rpido aumenta extraordinariamente su fragilidad. Alcohol butlico o Butanato: Es un deshidratante lento miscible con la parafina por tanto permite prescindir de los agentes aclarantes. Dioxan: Miscible con parafina, muy txico en espacios pequeos. Alcohol isoproplico: No puede utilizarse en la inclusin en celoidina.

El nombre deriva del latn parum (= apenas) + affinis aqu utilizado con el significado de "falta de afinidad", o "falta de reactividad". Es el nombre comn de un grupo de hidrocarburos alcanos de frmula general CnH2n+2.

La parafina lquida pueda penetrar completamente en el tejido ha de sustituirse el agua por un solvente orgnico.

Es un lquido incoloro, de aroma dulce, que se inflama fcilmente. Ocurre en forma natural en el petrleo y en alquitrn y se forma durante incendios forestales.

Aclaramiento: proceso por el cual se consigue la sustitucin del agente deshidratante por una sustancia miscible con el medio de inclusin.

 Ventajas: 1. Agente aclarante ms rpido 2. No disuelve la celoidina 3. Endurece poco los tejidos. 4. Se elimina fcilmente del medio de inclusin 5. Es fcil de apreciar el punto ptimo de dosificacin.

Inconvenientes: 1. Txico 2. Solo aclara desde alcohol absoluto. 3. Tiende a volver blanquecino el tejido. 4. Endurece si acta mucho tiempo.

Toluol o Tolueno: Ventajas: 1. Rpido pero menos que el Xilol 2. Endurece menos que el Xilol y no blanquea los tejidos. 3. Puede conservar una muestra ms de 12 horas sin una alteracin evidente Inconvenientes: 1. Es txico 2. Solo se aclara desde alcohol absoluto. *Inters prctico: Cuando no hay Xilol se usa Toluol. El tiempo de aclaracin varia entre una y dos horas. Benceno: Ventajas: 1. Es relativamente rpido. 2. Endurece muy rpido y no blanquea. 3. Causa retraccin mnima. 4. Se elimina fcilmente. Inconvenientes: 1. Muy Txico 2. Altamente inflamable. *Inters prctico: Puede utilizarse como producto de sustitucin. El tiempo de aclaracin es de entre 1 y 3 horas.

 Es una secrecin vegetal compuesta por resina, alcoholes y steres, cidos aromticos. El uso ms frecuente es como medio de montaje para preparados histolgicos o citolgicos.

Es usado, porque su ndice de refraccin es idntico al del vidrio, conserva la calidad y coloracin de las preparaciones microscpicas y dura muchos aos.

Un colorante es un cuerpo coloreado que puede comunicar su color a otro cuerpo.

Segn su origen

Segn sus propiedades qumicas

-Naturales -Sintticos o Artificiales

-cidos -Bsicos -Neutros -Indiferentes

Segn su afinidad tisular:

Colorantes Bsicos: Poseen una carga global positiva (catinicos), reaccionan con los componentes aninicos de las clulas. Ej. Hematoxilina
Colorantes cidos: Poseen una carga global negativa (aninicos), reaccionan con los componentes catinicos de las clulas. Ej. Eosina Colorantes neutros: Su carga global es neutra. Propiedad de colorear junta o separadamente diversas estructuras. Ej. Giemsa Colorantes Indiferentes: No poseen carcter cido, bsico o salino definido. Colorean mediante impregnacin.

 Directas: El colorante puede actuar directamente. Indirectas: En este tipo de coloracin, el colorante no puede actuar directamente, el objeto que hade colorearse debe ser tratado de antemano por otra sustancia que lo prepare para admitir el colorante, esta se llama mordiente.

 Es una tcnica de tincin diferencial , para la identificacin de microorganismos patgenos, por ejemplo M. tuberculosis

La caracterstica de cido-resistencia de estos microorganismo

CRISTAL VIOLETA

LUGOL

ALCOHOL ACETONA

SAFRANINA

TINCIN DE GRAM
Bacteria Grampositiva Bacteria Gramnegativa

Acido perydico

Reactivo de Schiff

Identificacin de macromolculas con hidratos.

Agua sulfurosa

Permite la tincin de componentes celulares que contienen hidratos de carbono de un color prpura.

La hematoxilina que es un colorante bsico, colorea los componentes cidos de la clula (ncleo) de color morado

la eosina que es un colorante cido se une a estructuras bsicas de la clula (citoplasma) otorgndole una tonalidad rosada

Es un mtodo habitual para el examen de frotis sanguneos, cortes histolgicos y otro tipo de muestras biolgicas.

AZUL DE METILENO

EOSINA

Emplea tres colorantes:

Hematoxilina de Weigert: Escarlata de Biebrich Azul de anilina de Mayory

 Es el mtodo de tincin ms utilizado para el material citolgico.

Alcohol al 50% Alcohol al 70% Alcohol al 80% Alcohol al 96% Xilol Isopropanol Hcl al 5% Orange G Hematoxilina de Harris Agua destilada

 Para la realizacin de los distintos procedimientos que se realizan en el rea de laboratorio de Anatoma Patolgica es necesario el uso de diversos reactivos e insumos que son necesarios e indispensables para la obtencin de diversos resultados. En cada anlisis se hace uso de una amplia gama de materiales que nos facilitan la identificacin de clulas, bacterias o en general objetos microscpicos tiles para el apoyo al diagnostico.

 http://webs.uvigo.es/mmegias/6-tecnicas/2-fijacion.php http://es.scribd.com/doc/39054818/Tincion-de-ZiehlNeelsen http://www.ecured.cu/index.php/Agua_destilada http://www.slideshare.net/scss/ettincion http://www.slideshare.net/KATHARobles/parafina10214542 http://www.esacademic.com/dic.nsf/es_mediclopedia/174 47/reactivo http://www.ihrdiagnostica.com/tecnicas/pdf/ColoracionPA PANICOLAOUv3.pdf