Importncia da coleta

Sala da coleta e recepo

Carto de visita Tcnicos paramentados, atenciosos, boas prticas na coleta Boxes individuais Local para assepsia e higienizao das mos Cadeira ou poltrona de coleta Maca para emergncias Espao adequado para transito do paciente e acompanhante

Conceitos de contaminao

TODO MATERIAL CONTAMINADO AT QUE SE PROVE O CONTRRIO!

Proteo

Pessoal avental, luvas, roupa branca, culos de proteo (separao de material), sapato fechado Paciente desmaios, SOCORRO!!!! Manter a calma fundamental! Coletiva descontaminao (hipoclorito puro), agulhas, material descartvel
Notificar acidente de trabalho amparo legal do trabalhador

Local de coleta
Piso e Parede lavveis Boa iluminao Boa ventilao
texto texto texto texto complementar\rdc-302.pdf complementar\50_02rdc.pdf complementar\RDC_306_ANVISA.pdf complementar\NBR+14785+Laboratorio+Clinico+Requisitos+de+Seguranca.pdf

Normas de Biossegurana
Resoluo da Diretoria Colegiada da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria do Brasil (RDC/ANVISA) n. 306/2004:
Armazenamento externo dos resduos slidos de sade deve ser construdo em um ambiente exclusivo e segregado, possuindo, no mnimo, um ambiente separado para armazenamento de recipientes contendo resduos do Grupo A (resduo com risco biolgico) juntamente com os do Grupo E (material perfurocortante), alm de um ambiente para o Grupo D (resduos comuns). O abrigo deve ser identificado e de acesso restrito aos funcionrios responsveis pelo gerenciamento de resduos, para que tenham fcil acesso aos recipientes de transporte e aos veculos coletores. Piso lavvel, impermevel e de fcil higienizao Ventilao, iluminao, pontos de gua, proteo contra insetos e roedores

Qualidade da coleta
Lado humano
Paciente doente, nervoso ou oportunista

Informaes importantes devem ser colocadas na ficha do paciente (medicamentos) Ser agradvel e eficiente na coleta

Ficha do paciente
Nome completo Medicao (interferncia da droga ou metablito) Orientao prvia Outros dados que o paciente informar

Fatores que alteram os resultados

Doena Fatores pr-analticos: variaes individuais, amostra biolgica (70% dos erros)
fase pr-analtica - indicao do exame, redao da solicitao, transmisso de eventuais instrues de preparo do paciente, avaliao do atendimento s condies prvias, procedimentos de coleta, acondicionamento, preservao e transporte da amostra biolgica at o momento em que o exame seja, efetivamente, realizado

Fatores analticos: metodologia, reagentes

Teste Laboratorial Preparo do Paciente e sua Amostra (fase pr-analtica)

Anlise da Amostra (fase analtica)

Respondendo ao Resultado Laboratorial (fase psanaltica)

Cronobiolgica
Corresponde s alteraes cclicas na concentrao de um determinado parmetro em funo do tempo. O ciclo de variao pode ser dirio, mensal, sazonal, anual etc. Variao circadiana: Concentraes do ferro e do cortisol no soro
As coletas realizadas tarde fornecem resultados at 50% mais baixos do que os obtidos nas amostras coletadas pela manh.

Hormnios - alteraes hormonais tpicas do ciclo menstrual tambm podem ser acompanhadas de variaes em outras substncias.
Concentrao de aldosterona cerca de 100% mais elevada na fase provulatria do que na fase folicular.

Variaes nas concentraes de algumas substncias em razo de alteraes do meio ambiente.

Em dias quentes, por exemplo, a concentrao srica das protenas , significativamente, mais elevada em amostras colhidas tarde quando comparadas s obtidas pela manh, em razo da hemoconcentrao

Gnero
Diferenas hormonais especficas e caractersticas de cada sexo Parmetros sanguneos e urinrios se apresentam em concentraes significativamente distintas entre homens e mulheres em decorrncia das diferenas metablicas e da massa muscular

Idade
Maturidade funcional dos rgos e sistemas Contedo hdrico e massa corporal

Atividade fsica

Efeitos transitrios e a longo prazo sobre os testes laboratoriais

Aumento de glicose no sangue maior demanda de glicose para os tecidos Piruvato e lactato aumentado devido a maior atividade metablica do msculo esqueltico Fluxo renal diminui leve aumento da concentrao de creatinina no soro Exerccio leve suave reduo na concentrao de colesterol e triglicerdeos no soro

Transitrias queda imediata e aumento dos cidos graxos livres, aumento da alanina e lactato Longo prazo aumento da creatina quinase (CK), aldolase (musculatura esqueltica), aspartato aminotransferase (TGO) e desidrogenase lctica, hormnios sexuais

Jejum prolongado

+ 72 hs diminui glicose plasmtica, aumenta triglicerdeos plasmticos e cidos graxos

Ingesto recente de alimentos/dieta

Maiores aumentos = glicose, ferro, lipdeos totais e fosfatase alcalina (fgado, intestino) Alimentao rica em protena noite = aumenta uria, fsforo e urato no soro em 12 hs Estimula a medula adrenal, causando um aumento de excreo das catecolaminas e de seus metablitos provocando um leve aumento da glicose no plasma estimula a glicogenlise (produo de glicose a partir do glicognio) no fgado Efeito no metabolismo lipdico aumento de cidos graxos no plasma Aumenta excreo de hemcias e clulas tubulares renais

Cafena

lcool
Aumento dos nveis plasmticos de glicose, lactato e triglicerdeos Alcolatras crnicos aumento colesterol HDL plasmtico, gama-glutamil transferase e volume corpuscular mdio (VCM)
VCM = devido hemlise acentuada das hemcias, deficincia de folato e a uma toxicidade direta do lcool sobre a medula

Fumo

Efeito depende da quantidade de cigarros e fumaa inalada

Nicotina estimula a medula adrenal - aumenta a concentra o de epinefrina no plasma inibe a ao da insulina aumenta glicose

Aumento da carboxihemoglobina sangunea, catecolaminas (estmulo da medula adrenal), cortisol Declnio de eosinfilos, aumento de neutrfilos e moncitos Aumento da hemoglobina Aumento no n de glbulos brancos

Drogas

Efeitos fisiolgicos da droga in vivo ou de seus metablitos Efeitos in vitro interferncias com os exames bioqumicos Muitas tm ao na funo heptica Medicamentos:
Via intramuscular = podem provocar irritao muscular promovendo um aumento das enzimas creatina cinase, aldolase e lactato desidrogenase no soro Opiceos = espasmo do esfncter de Oddi causando liberao de enzimas hepticas e do pncreas no soro (aumento de aspartato aminotransferase) Diurticos = leve reduo de potssio no plasma

Postura

Volume de sangue do adulto em posio ereta = 600 a 700 mL menor do que o de um adulto em posio deitada Paciente acamado
Importante a notificao Alterao da albumina e enzimas ligadas albumina (diminuio) Aumento da excreo de nitrognio, clcio, fosfato, sdio, potssio e sulfato na urina

Aumento significativo de potssio em 30 min de posio ereta = liberao de potssio intracelular do msculo

Sangue:

Artria, veia e capilar

Sangue venoso amostra de escolha Em crianas puno da pele sangue capilar Puno arterial - gasometria Veia mediana cubital dobra do cotovelo larga e superficial Pessoas submetidas a tratamento quimioterpico escolher local alternativo preservar as boas veias para o tratamento Brao contendo cnula ou fstula arteriovenosa cuidado orientao mdica Infuso de lquido IV parar 3 minutos o fluxo antes da coleta Flebotomista = utilizar equipamentos de segurana Mdico, enfermeira ou flebotomista treinado Artria radial no punho, a braquial no cotovelo e a femural na virilha Neonato artria umbilical Crianas lbulo da orelha ou calcanhar coleta em tubo capilar

Puno venosa:

Puno arterial:

Orientaes Gerais:
Sangue
Jejum 8 hs Colesterol, triglicerdios na vspera: evitar massas, alimentos gordurosos, bebida alcolica cido rico evitar carne vermelha Clcio dieta pobre em clcio (leite e derivados) Hemograma pode ser realizado sem jejum

Procedimento

Identificao Assepsia isopropanol 70% Garroteamento

Evitar contrair o punho aumento nas concentraes de potssio, fosfato e lactato Coleta
Separao sangue soro/plasma: deve ocorrer em 2 hs
Dependendo do exame volume adequado, anticoagulante

10 a 15 cm acima do local da puno Obstruir o retorno do sangue venoso ao corao e distender as veias mais de 1 minuto pode causar poiquilocitose e alteraes na concentrao de protenas, enzimas, ferro, colesterol, bilirrubina

texto complementar\Guia_de_Coleta_de_Sangue.pdf

Seringa X Vcuo
Vantagens do vcuo:
Fceis de usar Menor risco de contaminao da parede externa do tubo com sangue

Quando usar seringa?

Crianas Veias difceis
Idosos Obesos

Cor Cinza Amarela Verde Vermelho Azul Lils Preto

Uso Plasma ou sangue total com inibio da glicose Interior estril do tubo Plasma ou sangue total Soro Plasma ou sangue total Plasma ou sangue total Plasma ou sangue total

Aditivo Oxalato (Na ou K), fluoreto (Na) --------------Heparina (Na, Li, NH4) --------------Citrato (Na) - Coagulao EDTA - Hemograma Citrato (Na)

Sangue:
Elementos de trabalho sangue total, plasma e soro Obteno do soro Obteno do plasma Diferena entre soro e plasma em termos de composio
Valores no plasma maiores que no soro (%): Ca, Cl, LDH, protenas totais Valores no plasma menores que no soro (%): cido rico, albumina, TGO, CK, fosfatase alcalina, fsforo, glicose, uria

As vantagens da utilizao de plasma em relao ao soro incluem

Reduo do tempo de espera para a coagulao, obteno de maior volume de plasma do que de soro e ausncia de interferncia advinda do processo de coagulao. Os resultados so mais representativos do estudo in vivo, quando comparados aos do soro. H menor risco de interferncia por hemlise, visto que a hemoglobina livre, em geral, est em mais baixa concentrao no plasma do que no soro. As plaquetas permanecem intactas, no proporcionando pseudo-hipercalemia, como pode ocorrer no soro.

Desvantagens:
Alterao da eletroforese das protenas (fibrinognio se revela como um pico na regio de gamaglobulinas, podendo mascarar ou simular um componente monoclonal; Potencial interferncia mtodo-dependente pelo fato de os anticoagulantes serem agentes complexantes e inibidores enzimticos; Possibilidade de ocorrer ction-interferncia quando sais de heparina so usados, afetando, por exemplo, alguns dos mtodos de dosagem de ltio e amnia.

Sequncia de coleta para tubos plsticos de coleta de sangue

1. Frascos para hemocultura. 2. Tubos com citrato (tampa azul-claro). 3. Tubos para soro com ativador de cogulo, com ou sem gel separador (tampa vermelha ou amarela).

4. Tubos com heparina com ou sem gel separador de plasma (tampa verde).
5. Tubos com EDTA (tampa roxa). 6. Tubos com fluoreto (tampa cinza).

Sequncia de coleta para tubos de vidro de coleta de sangue

1. Frascos para hemocultura. 2. Tubos para soro vidro-siliconizados (tampa vermelha). 3. Tubos com citrato (tampa azul-claro). 4. Tubos para soro com ativador de cogulo com gel separador (tampa amarela). 5. Tubos com heparina com ou sem gel separador de plasma (tampa verde). 6. Tubos com EDTA (tampa roxa). 7. Tubos com fluoreto (tampa cinza).

Amostras inaceitveis
Fatores de hemlise
Tubo ou seringa molhados Garroteamento excessivo Proporo de anticoagulante (excesso) Dispensar no tubo com agulha Dimetro da agulha Tempo de coleta Transporte Banho Maria Estufa acima de 37 C Centrifugao excessiva (tempo, velocidade) 2500 rpm , 10 minutos Doenas anemia hemoltica, doena auto-imune

 Lipemia e ictercia
Problemas no jejum Problemas hepticos Alterao no resultado

texto complementar\recomendaes da sbpc para coleta de sangue venoso.pdf

Estabilidade da amostra
As amostras, para serem representativas, devem ter sua composio e integridade mantidas durante as fases pranalticas de coleta, manuseio, transporte e eventual armazenagem. Definida pela capacidade dos seus elementos se manterem nos valores iniciais, dentro de limites de variao aceitveis, por um determinado perodo de tempo. Temperatura de armazenamento Ambiente de 18 a 25C; refrigeradas, de 4 a 8C, e congeladas, abaixo de 20C negativos

Transporte
Caixa de isopor com gelo reciclvel, calado por flocos de isopor ou papel jornal (evitar contato direto com o gelo = hemlise Congelar usar gelo seco

Transporte de amostras entre laboratrios:

Leis n. 6.019, de 3 de janeiro de 1974, e n. 7.102, de 20 de julho de 1983, alm dos critrios estabelecidos na Portaria n. 472, de 9 de maro de 2009 Resoluo GMC 50/08 Regulamento Tcnico para Transporte de Substncias Infecciosas e Amostras Biolgicas entre Estados Partes do MERCOSUL. Transporte de Substncias Infecciosas, em sua 13 reviso, publicada em 2004.

Orientaes gerais:
Urina
1 da manh Higiene antes da coleta (Urina tipo I) Se cultura higiene pela manh, assepsia no laboratrio antes da coleta 24 hs desprezar a 1 da manh, ver horrio da prxima coleta, iniciar a coleta por 24 hs Dosagem de clcio dieta especial 3 dias antes

Urina
Tipo de amostra depende do teste Em geral primeira da manh estando o paciente em jejum = mais concentrada: boa para protena, gonadotrofina corinica 10 ml iniciais = bom para bactrias diagnstico de uretrite Jato mdio = distrbios da bexiga

1- Oxalatos de Na, K, NH4 e Li

Oxalato de potssio mais usado
Se complexa com o Ca inibe transformao da protombina em trombina (precipitao do Ca) 1 a 2 mg/mL de sangue ([ ] maiores podem provocar hemlise, diluio do plasma oxalato retira gua d ahemcia diluindo o plasma e liberando eletrlitos) Indicado = Cloro total, uria, creatinina, colesterol No indicado = cloro globular, cloro plasmtico, pH, CO2, bicarbonato, cido rico (reativo fosfotungstico reativo se liga a K turvando a preparao) Inibe enzimas = fosfatase cida e alcalina, lactatodesidrogenase (LD), amilase cido rico - reativo fosfotungstico Fraes do ferro

Oxalato de ltio

Oxalato de sdio

2- Floreto de sdio
Se complexa com o clcio Bom para glicose (inibidor da gliclise), uria e a maioria dos componentes do sangue No indicado = Na, K, Cl 2 mg/mL de sangue Considerado um anticoagulante fraco geralmente usado em associao com oxalato de potssio

3- Citrato de sdio Quelante do clcio 3,4 a 3,8 mg/mL de sangue Uso = provas da coagulao (efeito reversvel quando Ca exgeno adicionado), VHS No indicado = fosfatase alcalina, amilase, fosfato (reativo molibidato citrato compete com molibidato para a ligao com o fosfato)

4- Heparina

Anticoagulante enzimtico ou biolgico (produzido pelo fgado) Disponvel nas formas de sais de Li, Na, K, NH4 02 mg/mL de sangue Impede a transformao da protombina em trombina e potencia a ao da antitrombina III (inibe fatores da coagulao) Mantm a integridade das plaquetas Inibe liberao de tromboplastina Indicada: Cl globular, plasmtico e Ca livre No-indicada: fosfatase cida, amilase, fosfato

EDTA
Sequestrante de clcio 1 a 2 mg/mL Uso = glicose, uria e creatinina, hemograma (preserva a integridade dos elementos celulares) No indicado = Fe, fosfatase alcalina, amilase, creatininoquinase

Podem ser:

Qumicos: EDTA, mercaptoetanol Alterao drstica pH: cido ou base Temperatura: mais usado
Sangue total 6 C = 18 hs Soro 5 C = 3 dias Congelamento:
10-15 dias freezer da geladeira -80 C indefinidamente -20 C -6 semanas

Uso:

Evitar evaporao = O2, CO2 (evaporao promove alcalinizao do meio), H2O (est presente no soro) Evitar fosfatlise aumento do fsforo inorgnico Evitar a gliclise Evitar reao de protelise Alterao da permeabilidade celular aumento de K, P, Mg srico Diluio do plasma Contaminao bacteriana

Preservativos qumicos
Fluoreto de sdio (NaF)
Preserva a glicose, inibindo a glilise Bom para glicose, colesterol Ruim para reia (inibe urease quando mtodo enzimtico usado

URINA:

24 hs comprimido contendo mistura de: fosfato cido de potssio, benzoato de sdio, cido benzico, metenamina, bicarbonato de sdio, xido vermelho de mercrio cido sulfmico cido brico Hidrxido de sdio
Reduzem o pH da urina liberando formaldedo (pH<3) Precipitao de uratos ruim para dosagem de cido rico

Evitar formao de espuma, turvao ou precipitao interferncia no mtodo

Precipitao por desidratao
Protenas no sangue solubilizadas na H2O Solubilizao = formao de pontes de hidrognio protena H2O (H da gua e OH da protena) Protenas - Aminocidos so molculas anfotricas (grupos cidos e bsicos) No p.I 50% das prot com carga (+) e 50% com carga () Fora do p.I (Ponto Isoeltrico) os aminocidos constituntes das protenas podem apresentar radicais polares

Atrao isoeltrica protena-protena = precipitao Competio prot-prot mais forte do que prot-gua ocorre desidratao e no solubilizao

 Mtodo de adio de solventes miscveis (etanol, metanol e acetona)

Solventes formam pontes de hidrognio com a gua competem com a protena pela molcula de gua Solvente se ligam com H20 favorece ligao protena-protena = precipitao

 Mtodo de precipitao dependente da formao de sais insolveis

Ligao cido+protena forma catinica pH < pI
Em pH cido protena com carga (+) ligao cidoprotena = ppta

Ligao ons metlicos+protena forma aninica pH > pI

Meio alcalino protena com carga (-) ligao com metais pesados = ppta

Precipitao salina ou fracionada NaCl, NH4Cl Na+ se liga com aa negativamente carregados Cl- se liga com aa positivamente carregados Remoo da gua entre as molculas = pptao por desidratao

Exsudato: lquido inflamatrio extravascular com concentrao protica elevada e grande quantidade de restos celulares tm pelo menos uma das seguintes caractersticas: 1. proporo de protena do lquido pleural para o soro > 0,5 (a protena no lquido pleural > 3,0g/dL); 2. proporo entre LDH do lquido pleural para o soro > 0,6; e 3. LDH do lquido pleural > 2/3 do limite superior do valor srico normal. Natureza inflamatria

Transudato: lquido com teor protico baixo composto em sua maior parte de albumina no preenchem nenhum dos critrios anteriores e apresentam < 1.000 leuccitos/mL, glicose > 60mg/dL e propores entre a glicose do lquido pleural e do soro > 1,0 Natureza no-inflamatria

Lquido cefalorraquidiano

Mdico Puno lombar, cervical ou cisterna ou ventrculo do crebro Diagnstico de acidente vascular cerebral, meningite, doena desmielinizante Remoo de at 20 ml de lquido Quando dosagem de glicose - colher tambm uma amostra de sangue

Formado principalmente pelos plexos corides (cordes vasculares que formam a pia-mter (membrana que formam as meninges), ao se introduzirem nos ventrculos laterais do crebro) Nos adultos, produzido a uma taxa de 20 mL/h, o que corresponde a aproximadamente 500 mL/24 h. Entre as suas diferentes funes, a principal proteger mecanicamente o tecido cerebral. Alm disso, atua como um lubrificante, evitando atrito com o crnio, realiza a coleta de resduos, faz circularem nutrientes e varia sua produo de acordo com a presso intracraniana.

Lquido sinovial
Mdico Artrocentese lquido retirado das articulaes = diagnstico de artrite

Amniocentese
Mdico Distrbios congnitos, infeco intra-uterina, maturidade fetal

Lquido pleural, pericrdico e asctico

Mdicos peritos com experincia Determinao de exsudato e transudato Paracentese

Saliva
Substncias dos grupos sanguneos que determinam o estado secretor ou o gentipo Le Medida de medicamentos concentrao farmacologicamente ativa

A cavidade pleural revestida pelos mesotlios das pleuras visceral e parietal. Normalmente, contm uma pequena quantidade de lquido, dito pleural, o que permite o movimento de uma membrana contra a outra. O lquido pleural um filtrado plasmtico produzido continuamente pela pleura parietal

Em condies normais, encontramse cerca de 10 a 50 mL de lquido no espao pericrdico. um filtrado plasmtico produzido por um processo transudativo.

normalmente claro, transparente e viscoso. Sua quantidade mdia em condies normais de 1,0 mL. Em sua composio encontramos: um ultrafiltrado plasmtico, com ausncia dos elementos da coagulao e o cido hialurnico, produzido pelas clulas sinoviais, responsvel pela viscosidade caracterstica do lquido sinovial