PRODUO DE ACARES FERMENTESCVEIS POR LIGNOCELULSICOS

Kleydiane Braga Mauren Cristine

CONSIDERAES INICIAIS

CONSIDERAES INICIAIS

Fonte: http://www.cnpem.br/blog/2013/04/03/biocombustivel-de-2%C2%AA-geracao-esta-na-rampa-de-decolagem

CONSIDERAES INICIAIS

Fonte: http://www.medral.com.br/geotecnolog ias/modules.php?name=Conteudo&pid =368

Fonte: http://artesanato.culturamix.com/mate riais/natal-com-palha-de-milho

Fonte: http://materiotecafeevale.wordpress.com/20
10/05/27/palha-de-arroz

Fonte: http://www.biocana.com.br/index.php/noticia/visualizar/biocombustivel-de-2-geracao-esta-na-rampa-de-decolagem

COMPOSIO DOS RESDUOS LIGNOCELULSICOS

Composio mdia da fibra do bagao Celulose 26,6% - 54,3%

Hemicelulose
Lignina

14,3% - 24,4%
22,7% - 29,7%

Fonte: Silva, 2010

Fonte: Silva, 2010

CELULOSE

Fonte: Silva, 2010

HEMICELULOSE

LIGNINA

Substncia aromtica insolvel, quando sofre hidrlise oxida e condensa.

Lignina hidroxfenil guaicila-siringila: gramneas e em madeira de compresso nas conferas Lignina guaiacila: conferas, licopdios, samambaias e cavalinhas; Lignina guaiacila-siringila: angiospermas dicotiledneas e poucas gimnospermas;
Fonte: Filho, 2011

PR-TRATAMENTO

Fonte: Santos, 2010

TECNOLOGIAS DE PR-TRATAMENTO

CUIDADOS GERAIS
PR TRATAMENTO DRSTICO Degradao da celulose Formao de INIBIDORES de fermentao Inibidores: Furfural desidratao da xilose Hidroxi metil furfural desidratao da glicose

Como inibem: Danificam a parede celular de microrganismos Prolongam a fase lag

PR TRATAMENTO BRANDO Acessibilidade da enzima baixa

PR-TRATAMENTO FSICO
Exploso de vapor Termoidrlise

VAPOR + DESLIGNIFICAO

Fonte: Ramos, 2000

PR-TRATAMENTO QUMICO
Tratamento cido Agente Temperatura Faixa de durao Desvantagem cido sufrico (4%, w/v) 140-200 Min para h Produo de substncias txicas produtos de degradao Tratamento alcalino Cal 85-150 h Formao de sais irrecuperveis Tratamento oxidativo Ar ou oxignio >120 h Apropriado apenas para biomassa com baixo teor de lignina

PR-TRATAMENTO QUMICO

CIDO DILUDO CIDO DILUDO + DESLIGNIFICAO

PR-TRATAMENTO QUMICO
Tratamento alcalino Produtos qumicos alcalinos: xido de clcio Amonaco Hidrxido de sdio

Temperatura Presso Zhao et al. (2008)

PR-TRATAMENTO QUMICO
Tratamento oxidativo Quatro variantes: Oxidao mida (gua, presso e temperatura) Tratamento oxidativo alcalino(gases, presso e temperatura) Oxidao alcalina molhada (pouco eficiente) Ozonlise ( oznio, temperatura ambiente)

PR-TRATAMENTO FSICO-TRMICO
Trs tecnologias:

Exploso a vapor Duas etapas / custo-eficiente gua quente lquido - presso e temperaturas elevadas AFEX lquido amonaco concentrado / temperatura elevada e presso /

PR-TRATAMENTO POR SOLVENTE

Processo Organosolv Solventes orgnicos etanol Fracionamento do cido fosfrico RTIL

Fonte: http://domescobar.blogspot.com.br/2008/12/etanolde-segunda-gerao-essencial.html

PR-TRATAMENTO POR SOLVENTE

Lquidos inicos a temperatura ambiente 1-Etil-3-metilimidazol acetato Efeito Dissoluo de celulose Extrao de lignina a partir de farinha de madeira Dissoluo de uma variedade de hidratos de carbono tais como acares, amido e celulose Dissoluo de celulose

1-Etil-3-metilimidazol cloreto

1-Alil-3-metilimidazol cloreto

Dissoluo de celulose Dissoluo de madeira e resinosas Extrao de lignina a partir de farinha de madeira
Dissoluo da celulose Pr-tratamento de celulose para melhorar hidrlise enzimtica Dissoluo de madeira e resinosas Extrao de lignina a partir de farinha de madeira Dissoluo da celulose Dissoluo da lignina

1-Butil-3-metilimidazol cloreto

1-Butil-3-metilimidazol brometo

1-Butil-3-metilimidazol acetato
1-Butil-3-metilimidazol tetrafluoroboreto

Extrao de lignina a partir de farinha de madeira

Dissoluo de celulose Extrao de lignina a partir de farinha de madeira Dissoluo de celulose Extrao de lignina a partir de farinha de madeira Extrao de lignina a partir de farinha de madeira Dissoluo da lignina Dissoluo da celulose

1-Butil-3-metilimidazol hexafluorofosfato

1-Butil-3-metilimidazol metilsulfato 1-Octil-3-metilimidazol cloreto [OMIM]Cl

ATAQUE CIDO NA REGIO AMORFA DISPONIBILIZANDO OS CRISTAIS DE CELULOSE

MICROFIBRILAS DE CELULOSE W HISKERS

CELULOSE I
REGIO AMORFA

CELULOSE II
REGIO CRISTALINA

Chen et al.,2007: Cristalinidade afeta significantemente as primeiras etapas da hidrlise, mas tem um efeito menor na quantidade de acar gerada. A propriedade cristalina e ausncia da estrutura microfibrilar orientada da hemicelulose torna mais susceptvel hidrolise alcalina e enzimtica.

Chen et al., 2007: Alta deslignificao = alta digestibilidade independentemente da cristalinidade e dos grupos acetil. Deslignificao e desacetilao removem barreiras paralelas para a hidrlise enzimtica. A remoo da lignina aumenta a efetividade da enzima eliminando stios de adsoro que no so produtivos e aumentando o acesso para celulose e hemicelulose

ETAPAS DO PROCESSO

PR TRATAMENTO BIOLGICO

Trichoderma reesei (1 ,4 B- glucanase e endo-1 ,4 B- glucanase e xilanases) Aspergillus sp. ( B-glicosidade) Echinodontium taxodii* Irpex lacteus Ceriporiopsis subvermispora Pleurotus ostreatus Termoestveis: Acremonium thermophilum (c el/se Chaetomium thermophilum (cel/se) Thermoascus aurantiacus ( x i l / s e ) Nonomuraea flexuosa (xil/se ) Kluyveromyces sp .(c el/se) Flabospora sp .(cel/se)

EXEMPLOS DE PR TRATAMENTO BIOLGICO

E . taxodii Aumenta os ndices de hidrlise enzimtica 4,7 vezes maior na madeira e de 6,3 vezes na madeira macia

21 dias de pr-tratamento com Poria subvermispora e Irpex lacteus na palha de trigo resultou em 69% e 66% de celulose disponvel resultando converso de glicose a etanol de 90% - no houve inibidores.

EXEMPLOS DE PR TRATAMENTO BIOLGICO

A P ROVEI TAMENTO DA CA SCA DE C OC O VE RDE ( C OC OS LUC I F E RA L.) PA RA P RODU O DE C E LULA SES. SI M ON E LOP E S DO R G O DE OLI VE I RA . UF C .FORTALEZA , 2 010 .

CZ01 Zigomiceto CD03 Deuteromiceto

Cresceu em substrato semi-slido lignificado e com elevada atividade enzimtica celulsica (xilanase, carboximetil celulase e celobiase) quando comparada a outros fungos, inclusive T. reesei Rut C30 (patente).

E X E M P LO S D E P R T R ATA M E N T O B I O L G I C O D E S L I G N I F I C A O B I O L G I C A D O B AG A O D E C A N A PA R A P R O D U O D E B I O E TA N O L . R A FA E L C A S T O L D I E T A L . U N I V E R S I DA D E E S TA D UA L D E M A R I N G , 2 01 2 .

Pleurotus ostreatus

Fungos da Podrido Branca testados: Ganoderma lucidum (GL), Phanerochaete chr ysosporium (PC), Pleurotus pulmonarius (PP), Pleurotus ostreatus (PO), e Trametes sp. (TR) 30 dias erlenmyers 250 ml umidade 70-80% com bagao de cana. Sacarificao:5U/ml de celulase de Trichoderma reesei ATCC 26921(Sigma, C8546) em tampo citrato de sdio 50 mM (pH 5,0), com 5% de fibra, por 48 horas a 37 C, com agitao de 150 rpm.

CONSIDERAES
TEMPO DE PROCESSO DEMORADO: VRIAS HORAS A DIAS CONSUMO DE HIDRATOS DE CARBONO DISPONVEIS PROCESSO DIRECIONADO PARA POLPAO EM FBRICA DE PAPEL CUSTO DA MATRIA PRIMA INFLUENCIA NA ESCOLHA DO MTODO PARMETROS: UTILIZAO DE PRODUTOS QUMICOS, GUA, TEMPERATURA (>TC < VISCOSIDADE), pH, TEMPO DE RETENO, PRESSO, MISTURA E DOWSTREAM PRODUO DE PR-TRATADOS SECOS TEM MENOR CUSTO DE TRANSPORTE

HIDRLISE ENZIMTICA
Celobiohidrolases CEL7A e CEL6A Endo B-1 ,4-glucanase CEL7B B-glucosidase BGL1 Endo B-1 ,4-xilanase XYN3 B-xilosidase BXL1 . SURFACTANTE T WEEN 20: 0,05% (g/g de biomassa) independente do tipo de pr tratamento Mudam a estrutura do substrato Aumenta a estabilidade enzimtica Reduz a instabilidade da enzima pelo efeito da adsoro.

SINERGISMO

HFS -Hidrlise e Fermentao Separadas

Inibio da atividade da endoglucanase pela celobiose, devido inibio da L-glucosidase pelo acmulo de glicose no meio Condio tima para sacarificao 50C Condio tima para fermentao 35C

SFS - SACARIFICAO E FERMENTAO

SIMULTNEAS
Diminui a concentrao de glicose, possibilitando a atividade ininterrupta da L-glucosidase e por conseguinte, das outras celulases; Converso imediata da glicose diminui a inibio das enzimas, consequentemente o processo requer menor quantidade de celulases, alm de possuir menor risco de contaminao devido baixa concentrao de aucares disponvel e a presena do etanol, processo com menos etapas e uma maior produtividade. Desvantagem: condies timas de temperatura diferentes; Para contornar essa limitao tecnolgica, existe a pesquisa de celulases eficientes a temperaturas mais baixas, microrganismos com capacidade de fermentao em temperaturas mais elevadas, ou ento uma convergncia em temperatura intermediria, com combinao diferente de fermentadores e celulases.

SFS
Fermentao celulsica: hexoses Fermentao paralela hemicelulsica em reator independente para hemiceluloses: pentoses ou co-fermentao (SSCF,Simultaneous Saccharification and CoFermentation) com uso combinado de microrganismos, como, por exemplo: Fungo Paelomyces varioti

CONSIDERAES

Aumento de custo

Taxa de hidrlise inicial da biomassa pr-tratada diretamente proporcional ao tamanho dos poros acessveis a uma molcula de 5,1 nm (= o dimetro de uma mdia de 50 kda celulase).

Carga mnima de enzima para a hidrlise eficaz depois de cerca de 50% de diminuio da taxa de hidrlise: 18-63 mg/ g celulose. Recuperao enzimtica: agentes tensioativos, alcalino, ureia, ou regimes de variao do pH.

LYND ET AL., 2005: IDEALIZAO DA APLICAO DA BIOMASSA

HIDRLISE CIDA
CONCENTRADO: Corroso do equipamento e a demanda de alta energia necessria para a recuperao do cido; Sua neutralizao produz gesso. DILUDO: Alta temperatura provocando corroso Perdas de hemicelulose por degradao produzindo fur fural, hidroximetilfurfural e outros produtos de degradao. No reduz o rendimento do acar, mas introduz tambm substncias inibidoras no hidrolisado. Rendimento de glicose so, consequentemente, apenas entre 50% e 60% do valor terico

BINDER E RAINES (2010)

Mtodo alternativo: Hidrlise cida Diluda em Fases

Adiciona-se gua aos poucos a um cido clordrico como catalisador inico. Rendimento de cerca de 90% de glicose a partir de celulose

70-80% de rendimento de acares a partir de palha de milho no tratada

CONCLUSO
Vrias matrias primas esto disponveis para adaptao de processos para obteno de acares fermentecveis a partir de lignocelulose que pode representar 50% a mais na produo de lcool.

As porcentagens de disponibilidade de celulose aps pr tratamentos fsicos e qumicos ainda so superiores s alcanadas por ao de microrganismos. H estudos sobre cada etapa de transformao das fontes lignocelulsicas em lcool e possibilidades para consrcio de processos em escala industrial visando a otimizao na produo do lcool e derivados de lignoceluloses.