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Las plantas
A partir de nutrimentos inorgnicos tomados del suelo macronutrientes: N, P, K, Ca, Mg, S; micronutrientes: Fe, Mn, Zn, Cu, Mo, B, etc. sintetizan y acumulan diversas substancias Metabolitos Primarios Metabolitos Secundarios
Metabolitos primarios
Indispensables para la vida y producen los metabolitos secundarios Productos del metabolismo general (respiracin, asimilacin, transporte)
Metabolitos secundarios
Biosintetizados a partir del metabolismo primario Productos del metabolismo especfico como atrayentes o repelentes, protectora o defensa de animales. Distribucin taxonmica restringida (caracterstico de un gnero o de una especie particular)
Elementos bsicos del metabolismo primario y en relacin con el metabolismo secundario de plantas.
Metabolitos primarios
Carbohidratos
Glcidos, azcares, sacridos Formados por C, H, O Fuente de energa Celulosa: soporte estructural Tiempo de vida corto en la clula Fermentan por accin microbiana
Aldosa
Cetosa
Monosacridos
Slidos
blancos cristalinos con sabor dulce Solubles en agua (puentes de hidrgeno) Enlace OH polar Presentan actividad ptica Osas: Triosas, tetrosas, pentosas
CH2OH O H H H OH H HO OH H OH CH2OH O OH HO H OH H H H H OH
HOH2C H HO
O HO
H CH2OH
OH
Glucosa
HOH2C H H OH O H H OH OH
Galactosa
HOH2C H H OH H O H H OH
Fructosa
Ribosa
Desoxirribosa
Oligosacridos
2
CH2OH O H H H OH H HO H OH
HOH2C
O H OH HO
H
+
H2O
CH2OH H
Glucosa
Fructosa
Sacarosa
Polisacridos
Ms
Hetersidos: agliconas
Tipos de polisacridos
Holsidos
Homopolisacridos
Heteropolisacridos
Glucanos
Extraccin de Carbohidratos
Monosacridos y disacridos:
Solubles en agua y etanol Insolubles en solventes orgnicos, excepto piridina Cristalizan por evaporacin Forman suspensiones coloidales o geles Solubilizacin con agua y adicin de cidos minerales o sales:
Amilopectina y glucgeno se dispersan parcialmente en agua caliente Pcticos: se solubilizan en agua caliente si no forman complejos Gomas y muclagos son solubles en agua Celulosa y hemicelulosa son insolubles en agua; soluble en solucin amoniacal de Cu(OH)2 formando complejo y en HCl concentrado La mayora se hidrolizan en presencia de cidos diluidos
Polisacridos
LPIDOS
Lpidos
Saponificables
Tipos de lpidos
Insaponificables
Fosfolpidos
Esteroides Terpenos
+ HO
+ 3H2O
Glicerol
OH
Slido a Tamb, cadenas saturadas, provienen de animales Aceite: Lquido a Tamb, cadenas con enlaces dobles, provienen de semillas Cera: Slido a Tamb, altamente saturad, steres de cido grasos con alcoholes de alto PM
Fosfolpidos
1
O N O O O P O O
+
Extraccin de lpidos
Extraccin mecnica Solventes orgnicos no polares:
hexano, CCl4, benceno, ter etlico Son prcticamente insolubles en agua Una hidrlisis cida permite separar a los lpidos de los carbohidratos y las protenas
PROTENAS
Elementos estructurales de los organismos
Se forman por unidades de aminocidos de la siguiente forma:
Protenas
Funcin Enzimtica
Funcin Estructural
Funcin Defensiva
CHON
Funcin Reguladora Funcin Contractil
Funcin Transportadora
Estructura cuaternaria
Estructura secundaria
Estructura terciaria
Protenas
Glucosinatos Otros azufrados Betalanas
Ajo, cebolla
alcaloides
H3C
Lecitinas
O
Enzimas
O O O O P CH3 N
+
Amilasa
-
H3C
CH3
CH3
Protenas
Preparacin
ubicar en dnde se encuentra? trituracin con arena o almina trituracin n mezclador de alta velocidad homogeneizador a pistn prensa francesa sonicacin congelacin con nitrgeno lquido y macerado destruccin enzimtica con ebullicin alcohlica
Protenas
Extraccin
FSICOS
Por agitacin-centrifugacin.
QUMICOS Solubilidad con electrolitos. Resinas de intercambio inico. Reaccin Kjeldahl: determinacin del N orgnico por digestin en H2SO4, se neutraliza, se destila, se recoge con H3BO3y se titulan con HCl. Mtodo Lowry: en medio alcalino, reduccin del reactivo de Folin-Ciocalteau por el complejo de la unin peptdico-Cu2+ precipitacin de fenoles.
Mtodo Bradford:
mtodo espectrofotomtrico a 595nm, a travs de grupos ionizados y un colorante azul (coomasie BG-250). Mtodos turbidimtricos: precipitacin con cido tricloroactico, cido sulfosaliclico reactivos de clarificacin (hexacianoferrato(II) de potasio trihidratado, sulfato de zinc heptahidratado, acetato de zinc)
Ej separacin protenas
En hojas
Protenas citoplsmicas:
insolubles: unidas a la clorofila dependen de la especie vegetal y se separan por agitacin-centrifugacin solubilidad en electrolitos (hipotnica) y surfactantes (SDS)
Sulfato de amonio 40-60 % cido tricloroactico o sulfosaliclico 10%
Protenas foliares: metionina y otros amino cidos azufrados separacin por electroforesis
CIDOS NUCLICOS
BASES NITROGENADAS
por
O H3C NH NH
enlaces
O HO P
+
N NH
N N
F P BN
Pirimidinas
OH
Purinas
Timina
NH2 N NH O
Citosina
O
Almacenan, recopilan y transmiten informacin NH gentica por la polimerizacin en cadena de los NH O nucletidos.
Uracilo
Guanina
ADN
guarda la informacin gentica en todos los organismos celulares; es necesario para que se exprese la informacin contenida en el ADN
ARN
cidos Nucleicos
Purinas
Adenina
Pirimidinas
Timina
Citosina Guanina
Uracilo
cidos Nucleicos
cidos Nucleicos
EXTRACCIN
Lisis celular (romper membranas) moler tejido con nitrgeno lquido.
Precipitar el ADN con etanol frio o isopropanol y recuperarlo por centrifugacin (hasta obtener sobrenandante transparente).
Recuperar el sedimento con agua bidestilada. Correr una electroforesis (en gel de agarosa) de DNA, para asegurar que los cidos nucleicos libres de otras molculas.
Metabolitos secundarios