Cintica enzimtica

David Hernndez Esteban Hurfano

Enzima

Las enzimas son los agentes catalticos biolgicos que controlan todas las reacciones bioqumicas. La mayora de los venenos son inhibidores enzimticos.

2H2O2 2H2O + O2

Es una reaccin que ocurre muy lentamente en soluciones acuosas, pero se velocidad se incremente con una gran variedad de catalizadores.

La catalasa es una hemoproteina con hemina en su centro activo.

-d[H2O2]/dt = k[H2O2][catalizador] Tabla 8.1

Aunque la reaccin tiene un G298= -103,10 kJ/mol la lentitud se debe a su enorme anergia de activacin de 71 kj/mol. Figura 8.1

Un comportamiento tpico para enzimas con un nico sustrato es que la reaccin es de primer orden en bajas concentraciones del sustrato y se convierte en una de orden cero a altas concentraciones del sustrato. Las enzimas no alteran el equilibrio de la reaccin, hacen que la reaccin alcance su equilibrio mas rpidamente.

Cintica de Michaelis-Menden

Ya que las enzimas son catalizadores muy efectivos, generalmente se encuentran en concentraciones extremadamente bajas (10-310-6), lo que dificulta las mediciones directas.

Las primeras observaciones resultaron en las siguientes generalizaciones:

La velocidad de la conversin del sustrato incrementa linealmente con el incremento de la concentracin de la enzima.

1.

A bajas concentraciones:

V0 = k[S]
A altas concentraciones:

V0= Vmax
kcat = Vmax/[E]0

E+S
ES E + P

ES

V0 = (d[p]/dt) = k2[ES]
d[ES]/dt = k1[E][S] k-1[ES] k2[ES] = 0

[ES] = k1[E][S]/k-1 + k2
V0 = Vmax[S]/Km = k[S] Kcat = Vmax/[E]0 = k2 V0 = Vmax

La constante de Michealis es igual a la concentracion que produce la mitad de la velocidad maxima para la enzima. Un pequeo valor de Km significa que la enzima se une al sustrato firmemente y que pequeas cantidades son suficientes para alcanzar la mauor eficiencia catalitica.

KmLn[S]/[S]0 + [S] [S]0 = -Vmaxt

Complejos con dos intermediarios.

Debido a que la mayoria de las reacciones enzimaticas son facilmente reversibles, es normal que se formen los complejos enzimaproducto. Fumarato malato 20%, 80% Ecuaciones. Reacciones. 8.16,8.17,8.18 y 8.24

Competencia.
Constante de especifidad = Kcat/Km. V0 = kcat[E][S]/km Ecuacion 8.25 La razon de las velocidades de reaccion para dos sustratos diferentes es igual a la razon de sus constantes de especifidad. Para todas las enzimas siempre hay sustratos compietiendo en un ambiente biologico. La enzima mas especifica es la DNA

Inhibicion competitiva.
Una molecula que se parece al sustrato puede ocupar el centro catalitico de la enzima pero la molecula puede ser completamente inerte.

Al ocupar el sitio actua como un inhibidor que compite con los sustratos normales para que reaccionen.
Puede ser revertido diluyendo el inhibidor o aadiendo cantidades grandes del sustrato.

Ecuacion 8,26 y 8,27

Figuras 8,5 y eciaciones 8,28

Un ejemplo de estas inhibicion competitiva es la reaccion catalizada por la succinato deshidrogenasa. Es una inhibicion por producto que sirve para apagar la enzima cuando ya hay suficiente producto para las producto para las necesidads biologicas de las celulas.

Es la forma mas inmediata de control metabolico.

Inhibicion no competitiva.
Hay muchos tipos de inhibicion que no se pueden revertir con grandes concentraciones del sustrato.

Solo reduce el valor de Vmax

El agente alquilante iodoacetamida que reacciones con grupos sulfuro expuestos de los Cys. Afecta entre otras a la TPI y la inactiva de forma que ya no puede interactuar con el sustrato.

Figura 8.6 y reaccion de inhibidor

Inhibicion acompetitiva.
Afecta Vmax y Km. Cuando la enzima tiene mas de un sustrato la accion del inhibidor se debe evaluar con respecto a cada sustrato.