Introduccin a Cromatografa de Gases

KHYMS.S.A

Historia de la cromatografia
La cromatografa tuvo sus comienzos en 1850 con la separacin de anilinas por F.F. Runge. filtro de papel y un solvente separar colorantes. En 1906 Tswett present la utilizacin de columnas de gas empacadas con un adsorbente adecuado para separar pigmentos vegetales, a este procedimiento se le llam cromatografa de tintas. En esta tcnica tambin se empleo un lquido mvil para remover (eluir) los compuestos desadsorbidos en el material de empaque. En 1941, Martn y Singe sugirieron la posibilidad de utilizar un gas en la fase mvil del cromatgrafo, pero esto se qued slo en teora y nunca se puso en la prctica. En 1952, Martn y James empleaban una bureta automtica para detectar y determinar los cidos y bases. El primer cromatgrafo de gases satisfizo slo estos grupos funcionales, el verdadero potencial no se pudo alcanzar hasta la publicacin de Ray, del primer cromatograma hasta 1954, el detector utilizado fue conductividad trmica.

Fue hasta 1955 que los primeros instrumentos comerciales aparecieron en el mercado.

Definiciones
Keulemans ha definido la cromatografa como un mtodo fsico de separacin en el cual los componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales constituye la fase estacionaria, de gran rea superficial, y la otra es un fluido (fase mvil) que pasa a travs o a lo largo de la fase estacionaria.
La fase estacionaria puede ser un slido o un lquido dispuesto sobre un slido que acta como soporte, de gran rea superficial. La fase mvil es un fluido (puede ser gas, lquido o fluido supercrtico) que se usa como portador de la mezcla.

Definiciones
En la cromatografa la separacin depende de: La adsorcin es la retencin de una especie qumica en los sitios activos de la superficie de un slido, quedando delimitado el fenmeno a la superficie que separa las fases o superficie interfacial. Esta retencin superficial puede ser fsica o qumica. La adsorcin depende de la naturaleza de la substancia adsorbida, de la temperatura, de la naturaleza y estado de subdivisin del adsorbente, y de la concentracin.

Definiciones
La absorcin es la retencin de una especie qumica por parte de una masa y depende de la tendencia que tiene sta a formar mezcla o reaccionar qumicamente con la misma.

Tcnica que permite separar los componentes de una muestra debido a su diferente afinidad entre dos fases inmiscibles entre s, una estacionaria (liquida o slida) y otra mvil (gas o lquida)

Definiciones
La fase estacionaria puede ser un slido (CGS) y La fase estacionaria puede ser tambin un lquido de alto punto de ebullicin (CGL), el cual se extiende en una fina pelcula sobre un slido inerte que rellena una columna, llamado soporte slido o recubre la pared interna de una columna. La base de la separacin es la PARTICIN o DISTRIBUCIN de las partculas de la muestra dentro o fuera de esta pelcula lquida
Flujo de fase mvil

to A B
t1 A t2 B

Condiciones de la Muestra
Volatilidad Alta o media (300 C y presin atmosfrica) Estar en fase gas o liquida Trmicamente estable No debe reaccionar con los gases de arrastre o los materiales de los que esta construido el GC. Los componentes de la muestra no deben reaccionar entre si Polaridad media o baja.

Papel de la muestra
La muestra determina la configuracion del instrumento: Tipo del gas de arrastre Tipo del puerto de inyeccion Tipo de columna Tipo del detector

Tipo de la adquisicion de datos

Definiciones
Gases Gas de arrastre: Gas presurizado que se utiliza para transportar la muestra atravez del sistema. Gases para detectores: Se utilizan para ciertos detectores(i.e., FID). Introduccion de la muestra Se introduce la muesta al flujo del gas portador con una interrupcin mnima de la corriente de gas. Columna Permite la separacion de los analitos en la muestra. Detector Reconoce y responde a los componentes de la muestra los cuales eluyen de la columna.

Componentes de un sistema GC
1. Carrier Gas 2. Introduccin de la Muestra 3. Columna 4. Detector 5. Computador Sistema de Datos Integrador

La introduccin de la muestra, la columna y el Detector son la clave de un instrumento GC:

El Gas carrier y la computadora son externos al GC.

Gas Pressure Regulator

6850 Gas Chromatograph System - Lab Bench

Automatic Liquid Sampler

Computer Chemstation Integrator

Gas Chromatograph Carrier Gas Carrier Gas Filters

Fuente de fase mvil

Sistema de introduccin de muestras

Columna

Sistema de deteccin

Control de temperatura

Sistemas de manejo de datos

Registrador

teclado

Pantalla

Comportamiento cromatogrfico de los compuestos

La muestra se introduce en la fase mvil y es transportada a lo largo de la columna que contiene una fase estacionaria distribuida. Las especies de la muestra experimentan interacciones repetidas (repartos) entre la fase mvil y la fase estacionaria. Cuando ambas fases se han escogido de forma adecuada, los componentes de la muestra se separan gradualmente en bandas en la fase mvil. Los componentes abandonan la columna en orden creciente de interaccin con la fase estacionaria. La amplia gama de seleccin de materiales para la fase mvil y la estacionaria permite separar molculas que difieren muy poco en sus propiedades fsicas y qumicas

Comportamiento cromatogrfico de los compuestos

Comportamiento cromatogrfico de los compuestos

VR Volumen de retencin:

Volmen de fase mvil necesario para transportar la banda de un componente desde el punto de inyeccin, a travs de la columna, hasta el detector (en el mximo de pico del componente)
TR tiempo de retencin

Tiempo necesario para que el componente, una vez inyectado pase a travs de la columna y alcance el detector (en el mximo de pico del componente)
k razn de reparto

Es una medida del tiempo que el componente est en la fase estacionaria en relacin con el tiempo que est en la fase mvil

Cromatograma

Tiempo de retencion:
parmetro utilizado para identificar un componente de la muestra.

Area del pico:

parmetro utilizado para medir la cantidad del componente de la muestra.

LA FASE MVIL
La fase mvil viene en cilindros de gases a una presin aproximada de 2500 psi (150-160 atm.) El propsito del gas de arrastre, es transportar la muestra a travs de la columna hasta el detector

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Caractersticas del gas de arrastre:

Inerte qumicamente. Alta pureza: mayor del (99.9999%) (Impurezas: aire y agua) Grado: 5.0 Seco Adecuado para el detector usado. Se debe colocar un filtro de carbn activado y una trampa para humedad antes de la entrada del gas al instrumento

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Recommended GC Carrier/Makeup Gas Plumbing

Gas Purity 99.9995% Minimum Purity NO LEAKS!!!

1/8 Copper Tubing P/N 5180-4196

Moisture Trap P/N 5060-9084

Indicating O2 Trap P/N 3150-0528

GC Carrier Gas Connections Pressurized Gas Cylinder and Pressure Regulator

Gases y Detector
TCD FID ECD He o H2 He o N2 N2 o Ar - Metano

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GASES DE ARRASTRE MS COMUNES

Gas Pm Conductividad trmica l x 10 a 100C (g. Cal / s.cm.C) Viscosidad h x 106 a 100C (mP)

Argn CO2 Helio Hidrgeno Nitrgeno Oxgeno

39.95 44.01 4.00 2.016 28.01 32.00

5.087 5.06 39.85 49.94 7.18 7.427

270.2 197.2 234.1 104.6 212.0 248.5

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Impurezas comunes en los gases (ppm)

GAS Ar O2 5 H2 5 N2 200 CO2 *

He
H2 N2

5
10 5

5
* 5

100
1500 *

*
100 *
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Reguladores de presion
El flujo en el cilindro se controla mediante un regulador de presin de dos niveles, vlvula de dos vas. 2500 psi 80 psi Presin al cromatgrafo: 20 80 psi El gas portador debe ser regulado para proporcionar una presin constante, as como un flujo de masa constante. El diferencial de presin entre los controladores se recomienda como 5 psi.

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Valvulas reguladoras de gases

La vlvula reguladora es un sitio muy comn en los laboratorios de anlisis. El indicador de la izquierda indica la presin del gas que queda en el cilindro. El indicador de la derecha indica la presin del gas que sale del cilindro y fluye en la tubera de suministro. La mayora de los sistemas usan conexiones de 1/8 , sin embargo, un adaptador est disponible para su uso con en las tuberias y accesorios.

Purificadores de gas GC
La pureza del gas portador es muy importante. Cantidades traza de oxgeno y el agua puede ser perjudicial y acortar tiempos de vida de las columnas, especialmente para las columnas capilares. Las columnas mas polares (es decir, como las ceras de polietileno glicol), ms susceptible ser a la degradacin. El oxgeno tambin afectar al rendimiento del ECD (Detector de captura de electrones).

Diferentes trampas para gases

Recomendaciones
Tubos de acero inoxidable se recomienda para el hidrgeno. Los tubos de plstico es permeable al O2 y otros contaminantes. Los filtros deben ser cambiados en el intervalo recomendado por el fabricante (es decir, cada 10 cambios de cilindros) o en el cambio de color para evitar que avance la contaminacin. Todos los accesorios externos deben ser examinados de forma rutinaria en busca de fugas (por lo menos cada 6 meses, dependiendo de la configuracin).

Inyeccin de la Muestra

Sistemas de Inyeccin.
Permite la entrada de la muestra en el cromatgrafo de gases de una manera repetible y reproducible, la muestra debe ser representativa, y se debe inyectar sin que ocurra cambios qumicos

 No hay sistema universal de introduccin de muestras. Las muestras se introducen al equipo de CG por medio de vlvulas o jeringas que la colocan en un puerto de inyeccin o inyector. Muestras: Gases Lquidos slidos (material vaporizable o soluble). Muestras no vaporalizables, requieren algn tipo de introduccin por pirlisis.

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CARACTERSTICAS DE UN INYECTOR
Calentamiento Volumen pequeo Barrido total del rea

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Funciones de un inyector:

Recibir la muestra
Vaporizarla inmediatamente Introducir la muestra vaporizada a la cabeza de la columna como una banda estrecha.

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INYECCIN DE MUESTRAS GASEOSAS

Las muestras gaseosas pueden introducirse por: Jeringas (volumen: 0.001-50 mL). Vlvulas (volumen o loop fijo: 1mL-100mL).

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INYECCIN DE MUESTRAS LQUIDAS

Debido a la expansin de los lquidos cuando se vaporizan, se trabaja con tamaos de muestra mucho ms pequeas que en gases. Jeringas (0.1 25mL).

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Liner

Cmara de vaporizacin
El vaporizador es un tubo de 2-4 pulg. de longitud y 0.020-0.030 mm de d.i. (liner) Ventajas: Facilidad de cambiar el tubo para manejar diferentes dimetros de columnas. Elimina todo contacto de la muestra con el metal del puerto de inyeccin o columna. Facilidad de adaptar el inyector a un sistema on-column cuando se usan columnas de vidrio.

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Split injection (Inyeccin con divisin de flujo)

muestras: 0.001 0.5 L
flujo (venteo) relacin de divisin flujo (columna)
La relacin de flujo vara: 10 a 1000:1.

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Splitless injection (Inyeccin sin divisin de flujo)

Anlisis de trazas Programacin de temperatura es esencial debido a la reconcentracin del vaporizado en la cabeza de la columna.

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HORNO Y COLUMNAS
El propsito primario del horno es proporcionar a la columna una temperatura constante. En la columna, es donde ocurre el proceso de separacin. La columna es el corazn del proceso cromatogrfico.

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El horno:
1. Intervalo de temperatura de operacin grande (-50 a 400C y 5 o 10 a 400C). 2. La temperatura en el horno y en toda la columna debe ser uniforme. La diferencia de temperatura entre la ms alta y la ms baja debe ser mnima

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3. Libre de influencias de cambios de temperatura ambiental o de voltaje de lnea elctrica. 4. La temperatura no debe ser afectada por el calentamiento de inyector o detector. 5. De fcil acceso para instalar columnas y accesorios. 6. Permitir realizar separacin a temperaturas programadas.

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TEMPERATURA
El tiempo de retencin se duplica por cada 30C, que disminuye la temperatura de la columna. Corrida Isotrmica Temperatura Programada.

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Operacin isotrmica
1. En muestras desconocidas, los componentes de alto punto de ebullicin no son detectados. 2. Los primeros picos son finos, muy cercanos y pobremente resueltos, mientras los ltimos sern bajos, anchos y excesivamente resueltos.
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Temperatura Programada
1. En muestras desconocidas se puede obtener informacin de los puntos de ebullicin e informacin cualitativa y cuantitativa. Adems: 2. Es rpida, 3. Se minimiza la transformacin de material inestable. 4. Es requerida para algunas aplicaciones con columnas capilares (on-column in) 5. Es un excelente medio para limpiar la columna.

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TEMPERATURA ISOTRMICA Y TEMPERATURA PROGRAMADA

Aspecto Intervalo de ebullicin de la muestra Inyeccin de la muestra Fase estacionaria Pureza del gas portador Hornos separados para columna y detector Control de caudal Isotrmica Limitado hasta 100C Debe ser rpida Amplia seleccin No crtica Conveniente Suficiente presin constante Temp. programada 80 400C No necesita ser rpida Seleccin restringida Esencial la alta pureza Esencial Se requiere regulador diferencial de caudal
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Columnas CG

SPLIT/SPLITLESS CAPILLARY INLET Capillary Column Cuts and Cross-section

Polyamide coating Fused Silica Glass Stationary Phase

Detectores

NIVEL MNIMO DE DETECCIN

Es la cantidad mnima detectable de una sustancia que genera una seal (S) dos veces mayor que su nivel de ruido (N). S/N = 2

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