ESPECTROSCOPA

La espectroscopia es el estudio del espectro de la luz que emiten los cuerpos, sustancias y elementos.

De este estudio se puede conocer la composicin, temperatura, densidad, velocidad de desplazamiento y otros factores que les son propios y componen a estos cuerpos, sustancias o elementos

 Cuanto ms larga la longitud de onda de la luz visible tanto ms rojo el color. Asimismo las longitudes de onda corta estn en la zona violeta del espectro.

Hay varios tipos de espectros, los ms comunes son los espectros continuos, espectros de emisin y los espectros de absorcin. Si es colocado frente al espectroscopio se podr ver, un elemento: En situaciones en las que se le somete altas temperaturas y presiones y no se presentan lneas obscuras se trata de un espectro continuo. En situaciones normales y se observan unas lneas de colores frente a un fondo negro, se trata de un espectro de emisin.

Y por ltimo si sucede la primer situacin y entre el elemento afectado y el espectroscopio se coloca un elemento a menor temperatura que el primero, se obtiene el espectro de absorcin

Comparacin de las mediciones de las longitudes de onda con la luz visible.

 El color de un cuerpo depende de la luz que recibe, refleja o transmite. Por ejemplo, el color rojo se d cuando absorbe en casi su totalidad, todas las radiaciones menos las rojas, las cuales refleja o deja pasar dependiendo su estructura (slida o transparente).

La energa UV es mayor que, cualquier color del espectro visible. Sin embargo los rayos X son ms energticos que la luz UV, como se puede apreciar por su longitud de onda.

Con base a lo anterior se puede entender que existe una relacin inversa entre la longitud de onda y la energa del fotn correspondiente.

LAS LEYES DE LAMBERT-BEER

o

los fundamentos de la interrelacin de la luz que se absorbe y la que se transmite

 Ley de Lambert: cuando un rayo de luz monocromtica (I0) pasa a travs de un medio absorbente, su intensidad disminuye exponencialmente (I) a medida que la longitud del medio absorbente aumenta
I = I0e-ab

I0

I0

I0

1 cm.

Ancho de la celda

2 cm.

3 cm.

 Ley de Beer: Cuando un rayo de luz monocromtica pasa a travs de un medio absorbente, su intensidad disminuye exponencialmente a medida que la concentracin del medio absorbente aumenta

I = I0e-ac
I0 I I0
I

I0

Lo que significa que combinando ambas leyes se crea la Ley de Beer-Lambert donde la fraccin de luz incidente que es absorbida por una solucin es proporcional a la concentracin de soluto y al espesor de la sustancia atravesada por la luz. La relacin entre la luz incidente (I0) y la reflejada (I) dar una idea de la cantidad de radiacin que ha sido absorbida por la muestra.

Ley de lambert Beer:

I = I0
Si despejamos:

-abc e
-abc e

I/I0 =

Al cociente de las intensidades se denomina Transmitancia

T = I/I0 = e-abc
Sacando logaritmos:
Loge I/I0 = abc Convirtiendo a log10: Log10 I/I0 = 2.303 abc Log10 I/I0 = abc

Absorbancia = Log10 I/I0 = abc

La Transmitancia (T) es la relacin entre la intensidad de luz transmitida por una muestra problema (I) con la intensidad de luz incidente sobre la muestra (Io):

T = I / I0
Se expresa como % T

La absorbancia es directamente proporcional a la longitud del recorrido b a travs de la solucin y la concentracin c del color absorbente. Estas relaciones se dan como:

A = abc

A menudo b es dada en trminos de cm. y c en gramos por litro, entonces la absortividad tiene unidades de lg1cm1.

Qu relacin guardan la transmitancia y la absorbancia?

De acuerdo a las caractersticas de la sustancia analizada, la luz que no se absorbe atraviesa la solucin
LUZ A B S O R B I D A

Luz transmitida

I0

T = I/I0

Absorbancia

De lo anterior se desprende que la Absorbancia (A) o luz que es absorbida por la muestra es igual al logaritmo en base diez del recproco de la transmitancia (T) o bien al log10 de la transmitancia, en el que el disolvente puro o (blanco) es el material de referencia; esto es:

A = log10 1/T = log101- log10 T = 0 log10 T = log10 T

Por lo tanto la absorbancia es reciproca de la transmitancia

Absorbancia contra concentracin (comportamiento lineal) Absorbancia

Concentracin
% Transmitancia contra concentracin (pendiente con signo negativo y comportamiento exponencial)

% Transmitancia

Concentracin

La representacin grfica correspondiente a absorbancia transmitancia en un gradiente de concentraciones es la siguiente:

Concen tracin

Obtencin de TRANSMITANCIA utilizando valores de

Absorbancia

Con base en la relacin:

T = 10-abc

y considerando que T se menciona en porcentaje (%)

%T = 10-abc x 100.
Aplicando logaritmos a la expresin anterior log10 %T = -abc log Invirtiendo trminos log %T = log10 100 -abc log log10 %T = 2 abc Como abc = Absorbancia = A log10 %T = 2 A.
10 10

10 + log10 100 10 = 2 abc * 1

log10 %T = 2 A.
Ejemplo:
Una absorbancia de 0.6 a que equivale en % T?

Log10 % T = 2 0.6 = 1.4

Log10 % T = 1.4

%T = 1 /

Log1010

1.4

Aplicando antilog. a 1.4 = 15 % de transmitancia

Obtencin de absorbancia a partir de un valor de % de transmitancia RECORDANDO:

A = log10 1/T
Ejemplo de clculo %T = 30 T = 0.30 Sustituyendo (1/T) 1/0.30 = 3.33 Log10 3.33 = 0.523 de absorbancia

Se le llama espectrofotometra a la medicin de la cantidad de energa radiante que absorbe un conjunto de elementos o un elemento en su estado puro, en funcin de la longitud de onda de la radiacin lumnica y a las mediciones a una determinada longitud de onda.

Cmo se puede medir la radiacin que emiten o absorben los cuerpos?.

Un aparato capaz de obtener el espectro de una radiacin, es decir, de separar la radiacin en sus componentes, se llama un espectroscopio.
Si el aparato es capaz de fotografiarla se llama un espectrgrafo, y Si es capaz de medirla diremos que se trata de un espectrmetro. Cuando es capaz de medir tambin la intensidad de la radiacin, se llama espectrofotmetro.

Colorimetra y Espectrofotometra como procedimientos analticos

Las tcnicas colorimtricas se fundamentan con la medicin de la absorcin de radiacin visible por sustancias coloreadas. Sin

determinar

embargo,

necesario llevar a cabo un tratamiento de color empleando substancias que que reaccionen de forma proporcional con el compuesto de inters

cuando una muestra a no posee coloracin, es

Las diferentes sustancias se analizan mediante reacciones coloreadas. Cuanto mayor es la concentracin de la sustancia a analizar mayor es el color de la reaccin.

La diferencia entre colorimetra y espectrofotometra consiste en el tipo de instrumental empleado: El colormetro es un aparato en los que la longitud de onda se selecciona por medio de filtros pticos que son insertados en este.

En el espectrofotmetro la longitud de onda es seleccionada mediante dispositivos monocromadores los cuales estn integrados a la mquina.

Algunos de los procedimientos colorimtricos o espectrofotomtricos con los que se cuenta para precisar la concentracin de una sustancia en solucin son los siguientes:

Referencia de color
Colormetro Klett Espectrofotmetro

Un espectrofotmetro es un instrumento que descompone un haz de luz (haz de radiacin electromagntico), separndolo en bandas de longitudes de onda especficas, formando un espectro atravesado por numerosas lneas oscuras y claras, semejante a un cdigo de barras del objeto, con el propsito de identificar, calificar y cuantificar su energa

Distribucin de la luz en el espectrofotmetro

Espectrofotmetro Mecanismo Interno

Es usual que al seguir una receta para la determinacin de la concentracin de un compuesto en particular se indica una longitud de onda (l) especfica a la que hay que leer con el colormetro o espectrofotmetro.
Porque leer a diferentes l (longitudes de onda) compuestos parecidos pero diferentes?

La explicacin radica en el hecho de que cada producto qumico se caracteriza por zonas del espectro visible o no visible en el cual absorbe con mayor o menor intensidad conformando en su conjunto el espectro de absorcin de tal sustancia.

Cada compuesto (de complejo a simple) presenta un espectro de absorcin caracterstico

Absorbancia

l Las longitudes de onda con mayor absorcin (picos) correspondern de forma general a aquellas con las que se leer la muestra para determinar su concentracin
Absorbancia

La relacin entre la absorbancia por una sustancia a una l determinada y su concentracin es directamente proporcional es decir: a mayor concentracin mayor proporcin de luz absorbida.
Absorbancia

Conc.

As, el espectro de absorcin de la clorofila es:

celda de 5uL

La muestra se coloca en una cubeta* de forma prismtica

Se asume que el tubo, celda o cubeta en la cual se vierte la solucin a leer no debe desviar la trayectoria de la luz como requisito para el cumplimiento de la ley de Beer

Como el cuarzo aparte de ser muy transparente presenta un comportamiento constante ante la variacin de la longitud de onda es comn que las celdas del espectrofotmetro o colormetro sean de este material .

Curva Patrn
El razonamiento para el determinacin de una desconocida es: proceso de concentracin

A partir de concentraciones conocidas de las cuales tambin se sabe su absorbancia (curva patrn), es posible interpolar (intercalar) la concentracin del problema sabiendo su absorbancia (lnea roja en figura siguiente)

CURVA PATRN
0.6

0.5

A B
S 0 R B A N C I A

Absorbancia del problema

0.4

0.3

0.2

Interpolacin
0.1

0 0 2 4 6 8 10 12

Concentracin mg/lt

Con base en que la Absorbancia guarda una relacin lineal con la concentracin, se comprende la existencia de una relacin de proporcionalidad entre la Absorbancia y la concentracin:

A1 / A2 = C1 / C2

Donde: A1 = Absorbancia del problema. A2 = Absorbancia de un estndar de concentracin conocida. C1 = Concentracin del problema. C2 = Concentracin del estndar. Si despejamos C1 = Conc del problema
A1 (problema) * Conc estndar Conc. (problema) = A2 (estndar)