Procesamiento Post-traduccional

1.Modificaciones de los extremos amino y carboxilo

2.Pptidos seal

3.Modificacin de aa individuales
4.Unin de cadenas laterales de carbohidratos 5.Isoprenilacin 6.Adicin de grupos prostticos 7.Procesamiento proteoltico 8.Formacin de puentes S-S

Plegamiento de protenas

100 Residuos 10 Configuraciones posibles por residuo 10100 Posibles configuraciones Conversin entre configuraciones 1313 s Tiempo estimado: 1085 s (1077 aos) Tiempo observado: 101 a 103 s

Bovine pancreatic trypsin inhibitor

G
60%

Bovine pancreatic trypsin inhibitor

7 7

7 7 7

Secrecin de protenas

Procesamiento proteoltico
Incremento de diversidad
Met aminopeptidasas

Como mecanismo de activacin

Zimgenos

Direccionamiento intracelular
Translocacin de protenas

Modificacin covalente
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Acetilaciones Glicosilaciones Hidroxilaciones Metilaciones Nucleotidilaciones Fosforilaciones ADP-ribosilaciones Etc.

Modificaciones co y posttraduccionales

http://www.accessexcellence.org/AB/GG/protein_synthesis.html

Modificaciones post-traduccionales

Cuatro grandes grupos

Plegamiento de la protena

Procesamiento proteoltico
Modificaciones qumicas Separacin de intenas

Procesamiento enzimtico

Formacin de puentes disulfuro

Modificaciones post-traduccionales

Cuatro grandes grupos

Plegamiento de la protena

Procesamiento proteoltico
Modificaciones qumicas Separacin de intenas

MPT
Fosforilacin Acetilacin Metilacin

Funcin
Sealizacin, activacin

Acilacin, modif. por cidos grasos

Glicosilacin Anclas GPI Puentes S-S Ubiquitinacin Sulfatacin

Estabilidad, interaccin DNA-prots Regulacin gnica Localizacin y sealizacin celular Protenas excretadas, reconocimiento y sealizacin celular Fijacin de enzimas y receptores a membrana Estabilidad de protenas Seal de destruccin Modulador de interacciones

Nombre Acetilacin Miristilacin Palmitoilacin Amidacin Enlaces disulfuro N-Glicosilacin O-Glicosilacin Sulfatacin Fosforilacin N-metilacin O-metilesterificacin Carboxilacin Hidroxilacin

Sitio Terminal NH2Terminal NH2Terminal NH2Terminal -COOH 2 Cys -SH N-X-S/T S/T -OH of Y -OH of Y/S/T -NH2 of K/R/H/Q -COOH of E/D -NH2 of E/D -NH2 of P/K/D

Modificacin Replaced by CH3CONHReplaced by CH3(CH2)12CONHReplaced by CH3(CH2)14CONHReplaced by -CONH2 Replaced by -S-S-

Replaced by -OSO3H Replaced by -OPO3H2 Replaced by -NHCH3 Replaced by -COOCH3 Replaced by -NHOCH3 Replaced by -NHOH

MPT
Fosforilacin Acetilacin Metilacin

Funcin
Sealizacin, activacin

Acilacin, modif. por cidos grasos

Glicosilacin Anclas GPI Puentes S-S Ubiquitinacin Sulfatacin

Estabilidad, interaccin DNA-prots Regulacin gnica Localizacin y sealizacin celular Protenas excretadas, reconocimiento y sealizacin celular Fijacin de enzimas y receptores a membrana Estabilidad de protenas Seal de destruccin Modulador de interacciones

Glicosilacin y sus enlaces caractersticos

C-manosil

Trp

Man GlcNAc-1-P

Fosfo-glicosil

Ser

Man-1-P
Fuc-1-P Xyl-1-P

Glipiacin

C-term

EthN-6-P-Man

Ancla GPI

Glicosilacin y sus enlaces caractersticos

Glc GlcNAc Gal

Ser

FucNAc
Xyl Gal Man

Hyp

Ara

GlcNAc

O-glicosil
Hyl
Gal

Thr

GlcNAc Glc Gal

Asn

GalNAc

Glc
Rha

N-glicosil
Arg

Man

Glc

Tyr
Gal Glc

Ser/Thr

GlcNAc Pse
Gal DiAcTridH

Fuc

La N-glicosilacin

Distribucin filogentica
Enlace N-glicosil Eucariotas + Arqueas + Eubacterias +

O-glicosil
C-manosilacin Fosfoglicosil

+
+ +

Glipiacin

Y la glicosilacin, es frecuente entre las protenas?

El 65% de las secuencias proteicas registradas en SWISS-PROT presentan consenso para N-

glicosilacin (NXS/T).

Cada una de estas secuencias proteicas tendra 3.1

sitios de glicosilacin.

Apweiler et al., 1999. Biochim Biophys Acta. 1473:4-8.

La N-glicosilacin

Helenius, A. y Aebi, M. 2001.Science. 291:2364-2369.

N-Glicosilacin, un procesamiento compartamentalizado

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11.

Membrane bound oligosaccharide-transferring enzyme a-glucosidase I a-glucosidase II ER a-1,2 mannosidase Golgi a-mannosidase N-acetylglucosaminyltransferase I Golgi a-mannosidase II N-acetylglocosaminyltransferase II Fucosyltransferase Galactosyltransferase Sialyltransferase

I. II.

N-acetylglucosaminyl phosphotransferase N-acetylglucosamine-1-phosphodiester a-Nacetylglucosaminidase

Degradacin de protenas

A) Degradacin inespecfica en lisosomas B) Degradacin especfica dependiente de ATP mediada por ubiquitina en proteosomas 26S

E1 ubiquitin activating enzyme E2 ubiquitin-conjugating enzyme E3 ubiquitin-protein ligase

Proteasome/ Ubiquitination

Ubiquitin-Proteasome Pathway

Vida media de algunas enzimas de higado de rata

Enzima

Vida media (h)

Ornitina descarboxilasa RNA polimerasa I Tirosina aminotransferasa Serina deshidratasa PEP carboxilasa Aldolasa GAPDH Citocromo b LDH Citocromo c

0.2 1.3 2.0 4.0 5.0 118 130 130 130 150

Vida Media De Protenas Citoplsmicas En Funcin De Sus Residuos N-terminales Reconocidos por E3

Residuo N-terminal
Met, Ser, Ala Thr, Val, Gly, Cis

Vida media
> 20 hrs

Estabilizadores

Desestabilizadores
Ile, Glu Tyr, Gln Phe, Leu, Asp Lys, Arg ~ 30 min ~ 10 min ~ 2 min

Altamente desestabilizadores

Dos vistas del proteasoma de levadura

Structure of clathrin. a single molecular complex

Isolated coated vesicles

Vescula recubierta de una reja de clatrina y adaptinas, la unidad bsica de la jaula es un trisquelion