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Dra. Rosse Mary Yaez Villanueva P.hD Fac. Medicina UMSS 2013
CONTENIDOS
1- EXPLICAR las caractersticas estructurales ms sobresalientes del material gentico. 2- ANALIZAR el contenido de los procesos mediante los cuales se conserva, transmite y expresa la informacin gentica.
3- DESCRIBIR las caractersticas estructurales generales de la organizacin del material gentico en los organismos eucariontes y su relacin con el ciclo celular. PB 4- DESCRIBIR las caractersticas estructurales generales organizacin del material gentico bacteriano y viral. PM de la
ACIDOS NUCLEICOS
MACROMOLECULAS QUE PARTICIPAN EN EL PROCESO DE TRANSFERENCIA DE LA INFORMACIN GENTICA Y EN LA EXPRESIN DE DICHA INFORMACIN, PLASMADA EN LA SNTESIS DE UN CONJUNTO DE PROTENAS CONCRETAS.
CIDOS NUCLEICOS
Son
molculas heteropolimricas que transmiten la informacin gentica de cada clula, tejido y organismo, responsables de la herencia.
Son substancias cidas, estn constituidos por C, O, H, N y P. trata de polmeros de nucletidos con un elevado peso molecular, unidos entre s por enlaces fosfodister.
Se
N N
P O
-
O CH2 H H OH
O H
OH Base
Pentosa Fosfato
Nuclesido Nucletido
Formados por nucletidos realizan funciones vitales en los seres vivos: almacenar, transmitir y expresar la informacin gentica.
AZCARES
BASES NITROGENADAS
CIDO FOSFRICO
Enlace N-glicosdico
AZCAR
ARN
ADN
Nt de Adenina Nt de Guanina
Ribonucletidos
Desoxirribonucletidos
Nt de Citosina Nt de Adenina
Nt de Guanina
Nt de Timina
BASES MODIFICADAS
ESTRUCTURA
DE LOS DESOXIRIBONUCLETIDOS
4 5 6 1 3 2
3- Vara ampliamente de un organismo a otro (2575% de G+C) Mayor variacin entre bacterias. 4- Mientras ms cercanos filogenticamente dos organismos, mayor similitud.
Eje pentosa fosfato hacia el exterior Bases nitrogenadas hacia el interior Apareamiento intercatenario por puentes de hidrgeno entre bases complementarias (G = C) (A = T) (fundamento molecular Chargaff) Pares de bases casi perpendiculares al eje, interacciones hidrofbicas Pares de bases con ~ igual ancho
G C A
C G T
A
T
T
A
5'3' et
2. - Las 2 hebras son complementarias segun las raglas W-C (Chargaff) y por puentes de H2 entre Pu y Py (GCy(A=T); las bases stan internas en esta estructura.
3.- La doble helice (forma B = hydratada) gira a la derecha de abajo hacia. Esto incluye un surco mayor y menor (zonas donde las bases son reconocidas a pesar de estar internalizadas). 4.- En la forma B, el plano de las bases es perpendicular al eje : 10,5 pb por vuelta, occupando 34 (3,4 nm) o sea 3,4 por bp.
DESNATURALIZACIN Y RE- NATURALIZACIN DEL ADN oLa desnaturalizacin es la separacin de las dos hebras del ADN, en este proceso se rompen los puentes de hidrgeno que unen las cadenas produciendo la separacin de las mismas a un rango de temperatura. oEl punto medio se llama temperatura de fusin o tm. o Si se rompen los enlaces fosfodister covalentes que forman la secuencia de la cadena en la desnaturalizacin el ADN presenta aumento de la absorbancia ptica=hipercromicidad oAgentes desnaturalizantes: oTemperatura oVariaciones en el pH oUrea oFormamida oFormaldehdo oDodecil sulfato de sodio (SDS)
DESNATURALIZACIN Y RE- NATURALIZACIN DEL ADN oLa temperatura de fusin o tm. Es influida por la composicin de las bases y la formacin de enlaces de hidrogeno entre ellas.
oEl ADN rico en pares G-C que tiene tres enlaces de hidrogeno se fusiona a una temperatura mas alta que la que en el que abunda en pares A-T, que tiene dos enlaces de hidrogeno oEste es un proceso reversible, pues al bajar la temperatura se puede producir una renaturalizacin (hibricacin).
Temperatura
de fusin
G-C
GC CONTENIDO EN BACTERIAS
CIDO DESOXIRRIBONUCLEICO
Polmero lineal de 4 desoxinucleotidos (desoxirribosa, bases nitrogenadas A, G, C y T (nunca U) y grupos fosfato). Propiedades Fsico-Qumicas:
c) Peso molecular muy alto. ( > % G+C > estabilidad). d) Soluble en agua, solucin muy viscosa. A > T < viscosidad (separacin de las cadenas).
oHISTONAS
Protenas bsicas ricas en lisina y arginna y en cargas +.
oTIPOS Existen 5 tipos: H1, H2A, H2B, H3, H4
H2A, H2B, H3, H4 2 c/u se asocian para formar un octmero donde se enrolla 2 veces el ADN.
H1 Entre los nucleosomas y el ADN de conexin, forma el eje central .
Los nuceosomas se forman por la unin de 4 tipos de histonas centrales (H2A, H2B, H3, H4) ricas en lisina y arginina
EL
transcripcin de genes - METILACIN = activacin y represin de la transcripcin - FOSFORILACIN = H1 condensacin del cromosoma - ADP RIBOSILACIN = reparacin ADN - MONOUBIQUITILACIN= activacin, represin y siliencio de genes - SUMOILACIN= modificacin bioqumica producida por una peq protena llamada SUMO (small ubiquitin related modifier). Produce represin de la transcripcin
50 000 X
150 000 X
HISTONAS-LIKE BACTERIANAS
Le genoma de Saccharomyces posee de 1,4 .107 pares de bases. El genoma humano posee de 3 .109 pares de bases.
CodificacinADN (%)
100 70 25 33 3
Hombre
Flores
3,5
140
9
0,02
GRAN PARTE DEL GENOMA ES REDUNDANTE Y GRAN PARTE NO SE TRANSCRIBE El genoma haploide de cada celula humana contiene 3x10exp9 pares de bases de ADN subdivididos en 23 cromosomas,
25.000 de genes y 100.000 protenas codificadas por aproximadamente 1% del genoma humano es exonico (secuencias codificantes)
La mayor parte del ADN no codifica El exeso sirve para regular la expresin durante el desarrollo, diferenciacin y adaptacin al ambiente
INTRONES
GRAN PARTE DEL GENOMA ES REDUNDANTE Y GRAN PARTE NO SE TRANSCRIBE En el ADN humano cerca del 30% consiste en SECUENCIAS REPETITIVAS pueden ser: secuencias repetitivas a intervalos largos (LINE) o secuencias repetitivas a intervalos cortos ( SINE) SECUENCIAS REPETITIVAS MICROSATELITES consisten en 2 a 6 pb repetidas hasta 50 veces
SECUENCIAS REPETITIVAS INESTABLES p(CGC) = Sindrome de X frgil, CTG distrofia miotnica, CAG atrofia muscular espino bulbar, etc
CIERTAS ENFERMEDADES SON DEBIDAS A MUTACIONES EN EL mtADN ENTRE ELLAS MIOPATIAS, TRANSTORNOS NEUROLOGICOS Y ALGUNOS CASOS DE DIABETES
CIERTAS ENFERMEDADES SON DEBIDAS A MUTACIONES EN EL mtADN ENTRE ELLAS MIOPATIAS, TRANSTORNOS NEUROLOGICOS Y ALGUNOS CASOS DE DIABETES
LA TRANSFORMACIN
S
GEN
CROMOSOMAS EUCARIONTES
Greek: chromos, color + soma, cuerpo ADN lineal Localizacin nuclear unido a protenas Forma que adopta el ADN en la mitosis con alto grado de empaquetamiento
Nmero y forma caracterstico de cada especie (humano 46 cromosomas/clula somtica, diploides) (importante en la evolucin de organismos ms complejos)
BACTERIAS
Unicelulares Procariotas (ausencia de membrana nuclear) Material gentico 1 cromosoma plsmidos
CROMOSOMA BACTERIANO
ADN doble hebra, circular, superenrollado Tamao variable Mycoplasma hominis (760 kb) Escherichia Coli (4 600 kb) (1 kb = 1000 pares de bases)
PLSMIDOS BACTERIANOS
ADN doble hebra, circular Tamao 1-200 kb Replicacin autnoma
GENOMAS VRICOS
Virus ADN Virus RNA ssDNA dsDNA Virus RNA-DNA
ssRNA
dsDNA
(retrovirus)
(hepadnavirus)
ssRNA
dsRNA
Traduccin
Retrotranscripcin
EL ADN ES LA BASE DE LA VIDA 1. Almacena, transmite y expresa toda la informacin gentica que especifica las caractersticas de clulas y organismos.
ADN
ARN Protenas
MECANISMO DE LA REPLICACIN
de E. Coli
de dNTP radioactivos de un cebador de una cadena de ADN molde
Utilisacin
Utilisacin
Utilisacin
ACTIVIDAD POLYMERASA 53
TRANSCRIPCIN
ADN
ARN
TRANSCRIPCIN
El ADN es utilizado como molde para la sntesis del ARN DNA 5 3 GT CA TT CGG
3 C AG TAAGCC 5
TRANSCRIPCIN
La ARN polimerasa en la direcccin3-5 los nucletidos sobre la hebra molde, crea una molcula de ARN semejante a la hebra de codificante en la direccin 5 - 3
DNA
5 3 3 GT CA TT CGG
G UCAUUCG G
C AG TAAGCC
3 5 5
RNA
EL
codigo gentico
SNTESIS DE PROTENAS
SNTESIS DE PROTENAS
Este es un mundo de ARN, no es un mundo de ADN. En la vida actual, el ADN acta completamente a travs de ARN, mientras que el ARN puede actuar por s mismo. Los virus estn en este caso.
Christian de Duve
Virus
influensa, virus ARN Causante de la gripe Sntomas generales como dolor de garganta, debilidad, dolores musculares (mialgias), dolor estomacal, articulares (artralgias) y de cabeza (cefalea),
Por
lo tanto, es posible detectar microorganismos mediante la deteccin del ADN o ARN o protenas .
Polmero de ribonucletidos unidos por enlaces fosfodister en sentido 5 3, igual que el ADN. Presenta una composicin similar a la del DNA: Nucletidos: A, U, G y C.
Aparecen en todos los organismos, desde virus a eucariotas y en la mayora es monocatenario.
CIDO RIBONUCLEICO ARN Su funcin es extraer la informacin del ADN y dirigir la sntesis de protenas.
Macromolcula sintetizada por las RNA POLIMERASAS POR TRANSCRIPCIN de una secuencia de nucletidos de DNA que sirve como molde lo que hace que ambos sean complementarios.. A diferencia del DNA el RNA engloba a una familia muy heterognea.
ARN
El CIDO RIBONUCLEICO tiene como funcin principal el de servir como intermediario de la informacin que lleva el ADN en forma de genes y la protena final codificada por esos genes
Constituido por una sola cadena larga de nucletidos.
El azcar presente en el ARN es la ribosa,
ENLACE FOSFODISTER
o ESTRUCTURA SECUNDARIA Y TERCIARIA
o DEPENDERN DEL TIPO DE RNA
100
ESTRUCTURA Y TIPOS DE ARN Tienen la misma composicin qumica, se diferencian en la estructura y la funcin
ARNt:
ARNm:
Se sintetiza y se destruye en minutos. Se halla asociado a Histonas para evitar el ataque de las Nucleasas. FUNCION: en la Sntesis Proteica, transportar la informacin GENETICA del ADN para la elaboracin de una protena.
ARNr:
Se encuentra en los ribosomas FUNCION: ordena los aminocidos que formarn parte de una protena.
HAY 4 TIPOS DE ARN, DONDE CADA UNO DE ELLOS ES CODIFICADO POR SU PROPIO TIPO DE GENE
ARNm ARN r ARNt ARNsp ARN nucleares pequeos (U1, U2, U4, U5, U6, miARN
RNA heterogneonuclear (hnRNA). RNA citoplasmtico pequeo(scRNA): 7SL
Los tres primeros participan en la sntesis de protenas Los otros pequeos en el empalme ARNm y regulacin del gen
* Cadena sencilla.
* Secuencia complementaria del ADN. * Su funcin es copiar la informacin del ADN (Transcripcin) y llevarla hasta los ribosomas para la sntesis de protenas (Traduccin) donde sirve como molde.
ARN DE TRANSFERENCIA
o RNAt
o (PM MENOR)
nucletidos
74 hasta 95
107
ARN DE TRANSFERENCIA
* Su funcin es TRANSPORTAR LOS AMINOCIDOS en forma activada hasta el ribosoma, para que se unan y formen las protenas (traduccin).
* Su molcula recuerda a una hoja de trbol, algunas zonas presentan estructura de doble hlice y en donde no existe apareamiento de bases se forman bucles.
Existe al menos un tipo de tRNA para cada uno de los 20 aminocidos.
ARN DE TRANSFERENCIA
* Caractersticas de la molcula: - En el extremo 5 hay un triplete de bases en el que siempre existe G y un P libre. Brazo aceptor en el extremo 3 tiene CCA sin aparear y constituye el extremo aceptor del aa. - Brazo A, con un triplete llamado anticodn especfico del aa que transporta y complementario del codn del ARNm. - Brazo T, donde se fija al ribosoma.
- Brazo D, donde se une a la enzima que cataliza su unin con el aa.
sus coeficientes de sedimentacin, asociados de forma especfica a la subunidad grande y a la subunidad pequea de los ribosomas, tanto en procariotas como en eucariotas .
16S (30S subunidad ribosmica pequea). 23S ( 50S subunidad ribosmica grande). 5S (50S subunidad ribosmica grande). 18S (40S subunidad ribosmica pequea). 28S(60S subunidad ribosmicagrande). 5S (60S subunidadribosmicagrande).
70S Procariotas
80S Eucariotas
Desoxiribonucleasas=ADN
Ribonucleasas=ARN
Algunas nucleasas degradan tanto ADN como ARN
fosfofiester internos
Endonucleasas de restriccin reconocen secuencias especficas (EcoRI, HindII, etc) Exonucleasas hidrolizan un solo nucletido en la parte terminal de una molcula
1- El material gentico est compuesto por desoxinucletidos unidos por enlaces 3-5 fosfodister, cuya secuencia u ordenamiento constituye la estructura primaria del ADN.
2- La estructura secundaria del ADN consiste en una doble hlice con giro a la derecha, antiparalela, unidas por puentes de hidrgeno entre bases complementarias y uniones hidrofbicas.
1- El material gentico est compuesto por desoxinucletidos unidos por enlaces 3-5 fosfodister, cuya secuencia u ordenamiento constituye la estructura primaria del ADN.
2- La estructura secundaria del ADN consiste en una doble hlice con giro a la derecha, antiparalela, unidas por puentes de hidrgeno entre bases complementarias y uniones hidrofbicas.
3- La informacin gentica se conserva y transmite a travs del proceso de Replicacin, mientras la Transcripcin y la Traduccin participan en la expresin de la misma.
4- El genoma bacteriano se organiza en forma de una molcula duplex circular de mayor peso molecular y otras ms pequeas denominadas plsmidos.
5- Los retrovirus contienen ARN como material gentico mientras que los adenovirus contienen ADN. 6- Los bacterifagos son virus que infectan bacterias y han sido muy estudiados.