Espectrofotometria na regio UV-VIS

RADIAO ELETROMAGNTICA Comprimento de onda () Perodo (p) = tempo necessrio para completar um ciclo Freqncia (f) = ciclos/s ou Hertz f= c/ c = velocidade da luz no vcuo 3.1010 cm/s

unidades nm = 10-9 m A= 10 -10 m

Energia (E)
E = h.f => E = h.c/ h= constante de Planck

Espectro visvel da luz de uma lmpada difratada por um prisma: (a) esquema e (b) fotografia.

Exemplo de difrao de luz produzida na natureza.

Interao da radiao com a matria

O que faz com que alguns raios interajam e outros passem atravs das coisas?

Dois requerimentos devem ser observados para que uma determinada radiao possa ser absorvida por uma molcula: 1A radiao incidente deve ser de frequncia equivalente aquela rotacional ou vibracional, eletrnica ou nuclear da molcula, 2A molcula deve ter um dipolo permanente ou um dipolo induzido, ou seja, deve haver algum trabalho que a energia absorvida possa fazer.

Aplicaes da espectroscopia

Rotao

Leis de absoro
Io

I1

Io = 100

I1 = 50

Io = 100

I1 = 50

I2 = 25

Transmitnica = It/ Io

T% = It/Io x 100

Pierre Bouguer (1729) e de Johann Heindrich Lambert (1760) duas leis fundamentais: - A intensidade de luz (monocromtica) transmitida por um corpo homogneo proporcional intensidade de luz incidente. Isto :

- A intensidade de luz (monocromtica) transmitida decresce exponencialmente com o aumento da espessura da camada do corpo homogneo It/Io = 10 cba T = 10-cba log T = log 10 -cba onde c= concentrao; ba= constante

log T = -cba log 10

log T = -cba log 1/T = cba -log T = cba log Io/It = cba log Io/It = Absorbncia

Lei de Lambert- Beer

A = absorbncia ou absorvncia

A = b c qdo a concentrao expressa em moles/L

ou

A = a b c qdo a concentrao expressa em outra

unidade a/ = absortividade/absortividade molar
b= caminho pticoc c= concentrao

Representao grfica da Lei de Beer, para solues de KMnO4 em l = 545 nm e um caminho ptico de 1 cm.
a) Em %Transmitncia %T versus c a) b) Em Absorbncia A versus c

Absortiviade (a) ou absortividade molar

Caracterstica de uma substncia para um determinado comprimento de onda e um determinado solvente

max

Cu +2 800 20

Cu (NH3)4 +2 600 80

Cu-DEDC 436 10.000

A = abc

Absortividade capacidade da molcula em absorver energia

Fenmenos envolvidos quando um feixe (monocromtico) de radiao incide sobre uma cubeta contendo uma soluo que absorve no comprimento de onda incidente.

Io = Ir + Ie + Ia + It

Io = Ia + It

Io = Intensidade do feixe incidente, Ir = Intensidade do feixe refletido, resultado das diferenas do ndice de refrao entre o absorvedor e o ambiente, Ie = Intensidade do feixe espalhado, resultado de um meio no homogneo (suspenso) e/ou de flutuaes trmicas, Ia = Intensidade do feixe absorvido pelo meio It = Intensidade do feixe transmitido.

Espectro de absoro do permanganato de potssio

A amostra (1) tem 66mg/L de concentrao. As demais (2),(3),(4) e (5) foram diludas para (0.8), (0.6), (0.4) e (0.2) da concentrao da primeira amostra, respectivamente.

Se vrias substncias absorverem a a radiao,h um efeito aditivo:

Abs = a1b1C1 + a2b2C2 + . . . Corante vermelho Corante azul

Mx. de absoro a 525 nm A= 0,233 a=

Mx. de absoro a 625 nm A = 0.318 -> a = 0,106/ppm.cm

A 510 nm= 0,183 a = 0,061/ppm.cm

Mistura corante azul + vermelho

Mistura:
A 510 nm= 0,317 A625nm = 0,477

Figura 1 - a. conjunto dos comprimentos de onda correspondentes ao espectro de emisso de uma lmpada de tungstnio-halognio (luz branca); b. regio espectral transmitida por uma soluo de azul de bromotimol e o respectivo espectro de absoro; c. regio espectral transmitida por uma soluo de soluo amarela de fluorescena e o respectivo espectro de absoro.

a- Espectro de uma lmpada de luz branca

b- Espectro de uma soluo aquosa de azul de bromotimol 105 mol L-1 (laranja)

c - Espectro de uma soluo etanlica de fluorescena 10-5 mol L-1 (amarela)

Erro fotomtrico

INSTRUMENTAO

Esquema Bsico de um Instrumento para Medir a Absoro Sistema de Feixe Simples

Sistema de Feixe Duplo

Fontes de radiao UV-VIS Lmpada de Tungstnio e Tungstnio-Halognio: O filamento da lmpada de tungstnio vaporiza-se e esses vapores fixam-se na face interna do bulbo da lmpada. Lmpada de Deutrio: Normalmente usa-se a lmpada de deutrio para comprimentos de onda entre 180 a 370nm.

Monocromadores Filtros, Filtros de interferncia, Prismas , Grades de difrao

Grade de difrao

Espectro visvel da luz de uma lmpada difratada por uma grade de difrao : (a) esquema e (b) fotografia.

Detectores

Fotografias de arranjos de diodo com 1024 elementos (detectores de diodo): a. vista de topo; b. vista de perfil.

Esquema (a) e fotografia (b) do tubo fotomultiplicador HAMAMATSU - R928

Esquema ptico de um espectrofotmetro com detector de arranjo de diodos

V-se neste esquema duas fontes de radiao, as lmpadas de deutrio e de tungstnio, cujas emisses so focalizadas atravs de uma lente sobre a amostra. Portanto, todo o espectro de emisso da lmpada incide sobre a mesma, sendo que a radiao incidente ser, em parte, absorvida. Esta radiao que atravessou a amostra (transmitida ou emergente) ir incidir sobre uma lente que focaliza o feixe sobre uma fenda, e desta sobre uma grade de difrao. Esta grade ir difratar a radiao, separando os seus diferentes comprimentos de onda, sendo que cada um deles ir incidir sobre um diodo do arranjo. Este diodo, ao ser irradiado, produz uma corrente eltrica cuja magnitude depende da intensidade da emisso (novamente aqui se aplica o efeito fotoeltrico). Atravs de um circuito de calibrao adequado, esta corrente ser transformada em absorbncia nos diferentes comprimentos de onda, resultando no que se convenciona chamar de espectro de absoro.

Exemplo de espectro obtido com detector de arranjo de diodos

Crditos:

Chemkeys : http://www.chemkeys.com/bra/index.htm

Micronal Termos e Significados em anlises espectrofotomtricas UVVisvel http://www.micronal.com.br/artigostecnicos/glossario.pdf

Gary L. Bertrand http://web.umr.edu/~gbert/color/AAcolor.html