ESPECIFICACIONES DEL PROCESO ESPECIFICACIONES DEL PRODUCTO

Principios de funcionamiento y control, con descripcin detallada de cada uno de los pasos del proceso y de los dispositivos d control del mismo Parmetros de esterilizacin Metdica del control biolgico con indicacin de situacin, nmero y tipo de indicadores biolgicos estandarizados y adecuados a la carga bacteriana

Tipo
Propiedades Fsicas y Qumicas Tipo de envase

PARAMETROS Temperatura Tiempo Presin % Oxido de Etileno Humedad Relativa Potencia Radiante Densidad del producto Tipo de filtro y Condiciones de esterilizacin del filtro Test de Integridad Carga

MTODOS DE ESTERILIZACIN Calor Calor Oxido de Radiaciones Filtracin Humedo Seco Etileno Ionizantes Esterilizante + + + + + + + + + + + + +

+ + + + + + +

Manmetro para Presin de cmara Vlvula para Salida de Vapor Salida de Vapor

Puerta

Chaqueta de Cmara

Termmetro Y Vlvula Vlvula para Suministro de Vapor

Salida de Aire por el Venteo

I. CICLO DE ESTERILIZACION Y SU DISEO A. Autoclave B. Producto C. Carga Biolgica. III. CONTROL DEL PROCESO A. Parmetros Crticos B. Ciclos Atpicos C. Trabajos Crticos D. Calibraciones E. Revalidaciones

II. VALIDACION: Garanta de Calidad A. B. C. D. E. F. G. Estudios de Pre-validacin Estudios de Validacin Protocolos de Validacin Ensayos de Cualificacin Control Rutinario de la Esterilidad Estabilidad Qumica Validacin Biolgica y Control de Procesos de Esterilizacin

Velocidad de Muerte para Celulas Vegetativas (E. coli)

1 0 -1
log (N/No)

-dN/dt = Kn Ln (N/No) = -kt

-2 -3
-4

N = No * e(-kt)
D
0 2 4 6 8 10

-5 -6

TIME (minutes)

Tasa de Muerte: (k) Tiempo de Reduccin Decimal (D): Tiempo necesario para reducir una poblacin microbiana en un orden de magnitud

Velocidad de Muerte de Esporas Bacterianas (B. sterothermophilus) 1 0 -1 Log (N/No) -2 -3 -4 -5 0 5 10 20 15 TIEMPO (minutos) 25

NR: m.o. Resistentes NS: m.o. Sensibles ND: m.o. Muertos NR

KR

NS

KS

ND

dNR/dt = -KR * NR dNS/dt = KR*NR - KS*NS

N/No = [KR/(KR-KS)][e(KS*t) - (KR/KS)*e(-KR*t)]

Log D vs. TEMPERATURA(F) para esporas de C. botulinum

1,2 1

Log (D)

0,8 0,6
0,4 0,2 0

235

240 245 250 Temperatura (F)

255

Valor Z: El incremento de temperatura necesario para disminuir el tiempo de reduccin decimal en un orden de magnitud

 Factor de Inactivacin (IF): a un valor D durante un tiempo t IF = 10 t/D Letalidad Total (F): F = D (log No - log N)

A. AUTOCLAVE 1. Documentacin Plano de Cmara Sistemas de distribucin vapor de agua y aire 2. Controles y Registradores 3. Calibracin 4. Tipos de Ciclos.

C. CARGA BIOLOGICA Determinacin de la Carga: Nmero de m.o. viables por unidad No de esporas por unidad Clculo de D para las esporas

D.Seguridad de la Esterilidad (10-6)

Fo = D(121) * (Log No - Log N)

B. PRODUCTO 1. Integridad de envase y sistema de cierre 2. Evaluacin microbiolgica

Log N = Log No - (Fo/Do)

INSTRUMENTACIN CALIBRADA
CARACTERSTICAS DEL PRODUCTO QUE PUEDEN CAMBIAR EN EL PROCESO: Integridad del cierre, Evaluacin biolgica del cierre. DISEOS DE CARGA ESTUDIOS DE PENETRACIN Y DISTRIBUCIN DEL CALOR

ESTABLECER EL VALOR DE FO Valor de D Nivel de seguridad (10-6) PARMETROS FSICOS DEL PROCESO Temperatura de cierre de las purgas Sobrepresin del aire Tiempo de calentamiento Temperatura y tiempo de exposicin Tiempo de enfriamiento. EVALUACIN BIOLGICA O FSICA FO

 Bioindicador:
Esporas de Bacillus stearothermophilus

Mtodo por reduccin de contaje Mtodo de muerte total Anlisis de la fraccin negativa
Todas las unidades replicadas son positivas en crecimiento Todas las unidades son negativas Algunas unidades son positivas y otras negativas

Esporas de Bacillus stearothermophilus suspendidas en caldo nutritivo con purpura de bromocresol

Temperatura
C 115 121 126 134

Tiempo de Sostenimiento (min) 30 15 10 3

Presin de Vapor
(Kpa) 69 103 138 207 (psi) 10 15 20 30

Factor de Inactivacin * Reducciones Decimales 5.2 10 21 40

* Calculado para una suspensin de esporas que tienen un valor D121 de 15 minutos y un valor Z de 10C

Tamao del Recipiente Botella de Fermentacin 9 litros) Erlenmeyer (2 litros) Erlenmeyer (125 mililitros) Tubo de Ensayo (18 * 150 mm)

Volumen de Lquido (ml)

6750

Tiempo de Esterilizacin En Autoclave (Minutos)

70

1500
95 10

30
15 15

 El aire caliente es uno de los mtodos de esterilizacin por calor seco ms utilizados. La esterilizacin se logra por conduccin trmica.
La muerte de los microorganismos se da por un proceso lento de destruccin de proteinas.

 Verificacin de las caractersticas termodinmicas de la unidad Distribucin del calor en la cmara de esterilizacin Estudio de penetracin del calor Repetitividad mecnica

ESCAPE CON FILTRO EPA VENTILADOR DE PRESION CON FILTRO EPA MOTOR PRE FILTRO REUDA CIRCULATORIA RESISTENCIA

 Materiales poco resistentes al calor seco

Mtodo de probabilidad de Supervivencia (10-6)

Materiales resistentes al calor

Mtodo de sobre-destruccin (Overkill Aproach) (10-12)

Esterilizar y Despirogenizar
Mtodo de destruccin de endotoxinas bacterianas

 Probabilidad de Supervivencia (10-6)

Valor de Letalidad FH: tiempo equivalente en minutos a 170C, con un valor Z de 20C FH = D170 (Log N0 Log N)

Sobre-destruccin (10-12)
FH que garantice una reduccin decimal de 10-12 del bioindicador (esporas de B. subtilis var niger)

Tiras de Bacillus subtilus var. niger (globigii)

 Inactivacin de Endotoxinas
Temperaturas 300C en procesos continuos y tiempos cortos Temperaturas de 200C o ms en procesos discontinuos Valores de D de segundos y reducciones de 10100 Reduccin de 1/1000 de 1000 o ms unidades de endotoxina.

Temperatura
(C) 150 160 170 Anon (1962) 45 18

Tiempo (min)
PC (1979) 60 60 DH (1980) 60 60 40 BP (1988) 120 60

180

7.5

11

20

30

I. CAUDAL II. CAPACIDAD DE FILTRACION III. ESTERILIZACION DEL SISTEMA DE FILTRACION IV. CAPACIDAD ESTERILIZANTE Ensayo Biolgico Ensayo Fsico. VI. PARTICULAS VII.ESTABILIDAD VIII. TOXICIDAD DEL FILTRO

IX. COMPATIBILIDAD
X. PIROGENICIDAD

V. EXTRACTABLES O SUSTANCIAS OXIDABLES Es txico el extractable? Afecta el producto Pasa test de sustancias oxidables

TEST DE RETENCION BACTERIANA Pseudomonas diminuta 1*107 clulas/ cm2 Valor de Reduccin Logartmica: LVR = Log (No/N) 7 PUNTO DE BURBUJA Los poros de comportan como tubos capilares, por lo tanto se requieren diferentes presiones para desalojar el lquido retenido segn sea el dimetro del poro. P = (K4 cos) / d
P: presin correspondiente al punto de burbuja : Tensin superficial del lquido. : Angulo de contacto lquido-liquido d: Dimetro de poro. K: Factor de correccin

Presin Absoluta (" Hg))

30

Exposicin OE (5) Vaco Inicial (1)

20

Evacuacin OE (6)

Entrada de OE (4)
10

Exposicin a Humedad (3)

Entrada de Vapor (2)

0 0 2 4

Aire Biofiltrado (7)

6 8

Tiempo (Horas)

Presin (PSI)

10
Vaco Inicial (1)

Exposicin OE (5)

0
Entrada de OE (4)

Evacuacin OE (6)

-10 10

Vacio (" Hg)

Exposicin a Humedad (3)

20 Entrada de -20 Vapor (2)

Aire Biofiltrado (7)

30 -30

Tiempo (Horas)

 DISEO DEL PRODUCTO

DISEO DEL ENVASE

PERFIL DEL CONTORNO: evitar cantos vivos o protuberancias que daen el envase unitario ACCESIBILIDAD DEL AGENTE ESTERILIZADOR: Evitar los espacios muertos COMPONENTES DEL PRODUCTO : Si hay elementos plsticos, estos no deben reaccionar con el gas y a su vez facilitar la desorcin PAPEL: Celulosa pura no regenerada, sin blanqueadores pticos. Permeable a aire, gas y vapor FILM: Bi-capa de poliamida, polietileno, polipropileno y PVC, todos permeables. SELLADO: Papel-Film, FilmFilm.

AREA DE ESTERILIZACION
ZONA DE PREACONDICIONAMIENTO: Recinto a 50C y HR 5060% donde se mantiene el producto de 12 a 24 horas. ZONA DE ESTERILIZACION: Con OE puro se requiere bunker de proteccin, instalaciones antideflagrantes, etc. ZONA DE CUARENTENA : Permitir la aireacin adecuada del producto. OE residual mximo 2 ppm en el producto. ZONA DE PRODUCTO ESTERILIZADO: Fresca, seca y protegida del polvo

 TEMPERATURA: Debe ser alta, la velocidad de reaccin se duplica al aumentar la T en 10C. HUMEDAD RELATIVA: Mnimo del 30%en el producto, es decir, 50 - 60% en la cmara. El exceso de HR conduce a: Condensacin de agua Se alargan los sucesivos vacos para extraer el gas Los empaques pueden perder su resistencia mecnica Se puede producir etilenglicol CONCENTRACION DE GAS Y TIEMPO DE EXPOSICION: Son parmetros con una alta interdependencia, mayor concentracin menor tiempo y viceversa. CARGA BACTERIANA La menor posible para que no alcance el umbral pirognico

Toda la radiacin capaz de producir cascadas de ionizacin en la materia.

Mtodo de esterilizacin en fro. Durante el proceso el aumento de la temperatura es muy pequea. Esterilization Assurance Level (SAL) es muy alta. En el producto no deja residuos. El funcionamiento es muy fcil de controlar con un solo parmetro (Dosis aplicada)

 SALUD Dispositivos Mdicos Medicamentos, envases, principios activos y excipientes Productos del cuidado de la salud Cosmticos y sus materias primas
ALIMENTOS Conservacin de los alimentos para aumentar la vida til Eliminacin de patgenos. (Prevencin de enfermedades transmitidas por alimentos) Evitar la germinacin

Cobalto 60 (60Co) de 0,3 a 3,0 Mci Cesio 137 (137Cs) Haces de electrones 8 a 10 MeV Mquinas de Rayos X 5 MeV 60Co Fotones (1.17 1.33 MeV) Tiempo de vida media de 5.2714 Aos

RADIACION

ORGANISMOS/MEDIO
CAMBIOS QUIMICOS

CAMBIOS BIOLOGICOS

MUERTE

Cambios en ADN Alteracin en la membrana celular Alteracin mitocondria Desorden metablico

Muerte

Sobrevida (reparacin ADN)

 Tipo de organismo Estado fisiolgico del organismo Composicin del medio

Dosis
Condiciones de irradiacin (temperatura, tasa de dosis)

Condiciones ambientales previo, durante y posterior a la irradiacin

kGy 100 10 1 0.1 0.01 0.001

LD50

Virus, Bacterios Radio-Resistentes Esporas Bacterianas Bacterios Vegetativos, Hongos, Levaduras Parsitos Insectos Mamferos

 VIRUS ESPORAS BACTERIANAS

LEVADURAS Y BACTERIOS VEGETATIVOS

HONGOS

 En el procesamiento por radiaciones ionizantes, la magnitud de principal inters es la energa transferida al material irradiado.
Dicha energa dosis absorbida - es la responsable de producir en el material irradiado el objetivo buscado

N = NO * 10-kD

RECEPCION ALMACENAMIENTO

PREPARACION Y CARGA IRRADIACION DESCARGA

DOCUMENTACION

VERIFICACION DE LA DOSIS
ALMACENAMIENTO ENTREGA

 El producto a ser sometido al proceso de esterilizacin debe estar fabricado bajo las Buenas Prcticas de Fabricacin de, para asegurar una produccin uniforme y controlada del mismo. Tener acceso a los servicios de un laboratorio de microbiologa competente

Tener acceso a instalaciones o equipos que entreguen dosis desde 1 kGy, pudiendo ser:
Fuentes de radiacin de 60Co 137Cs Irradiadores de haces de electrones o rayos -X. Se debe tener en cuenta que los niveles energa y tasa de dosis de estos equipos sean similares a aquellos usados en el proceso de esterilizacin del producto.

 Determinacin de la carga microbiana en el producto previa a la esterilizacin Verificacin experimental de la respuesta de la microflora del producto a la radiacin, si es que la Distribucin Standard de Resistencias mediante ensayos de esterilidad de 100 muestras irradiadas para un CSE de 10-2 . Lotes produccin frecuentes (>1/3 meses): Determinacin de dosis sobre 3 lotes consecutivos Lotes produccin infrecuentes (<1/3 meses) nicos: Determinacin de dosis sobre 1 lote

 Para el clculo de la dosis de esterilizacin, se estima el valor D10 de la poblacin natural del producto Irradiacin de muestras (20 unidades) con 9 dosis crecientes

Ensayos de esterilidad
Grafica dosis-respuesta Determinacin de la dosis de esterilizacin Para la definicin de la dosis de esterilizacin de un producto se debe determinar la dosis de 3 lotes fabricados consecutivamente.