CLASIFICACIN DE LOS PARSITOS

Ciliados (cilios) Protozoarios Mastigoforos (flagelos) Zooparsitos (unicelulares) Sarcodinos (pseudpodos) (parsitos Esporozoarios (inmviles)
animales)

Platelmintos Cestodos (Seg) Metazoarios

(pluricelulares)

Helmintos (aplanados)

Trematodos

Nematelmintos Artrpodos Fitoparsitos

(parsitos vegetales)

Hongos Bacterias (REINO PROCAROITA)

PARASITOLOGA
Disciplina que se encarga de estudiar el parasitismo producido por protozoarios, helmintos y artrpodos.
PARASITISMO

Se da entre un organismo llamado parsito y otro denominado husped.

PARSITO: Organismo que pertenece al Reino

animal.

 Parasito obligado Parasito facultativo Husped definitivo Husped intermediario

TIPOS DE PARSITOS
Estenoxenos: pocas de le sirven de reservorios; Entamoeba histolytica que utiliza hombre, perros y primates. Eurixenos: muchos; Toxoplasma gondii le sirven los conejos, gondis(pequeos roedores), cerdos, gatos, vacas,etc.

ASOCIACIONES ENTRE LOS SERES VIVOS

INQUILINISMO: inquilino utiliza como morada las estructuras o cavidades del otro (husped) al que no le ofrece ninguna ventaja, ej: cangrejo ermitao y concha de caracol. COMENSALISMO: Husped no recibe perjuicio ni beneficio; mientras que el otro asociado (comensal) se procura casa y sustento; ej: Entamoeba coli y el hombre. MUTUALISMO: Ambos reciben beneficio sin que tenga dependencia necesaria para su existencia; ej: anmonas de mar y glifidodones (pez payaso). SIMBIOSIS: existe dependencia necesaria para la supervivencia; ej: hipermastiginos (protozoos flagelados) y termitas. PARASITISMO DEPREDISMO HIPERPARASITISMO: Un parasito infecta a otro; bacterias patgenas.

TRANSMISIN Por fecalismo y alimentos contaminados

AGENTE Amibiasis o Entamoebiosis (Entamoeba histolytica)

LOCALIZACIN En todos los tejidos del hombre

Balantidium coli Giardia lamblia Chilomastix mesnili Trichomonas hominis Enteromonas himinis Retortamonas intestinales
Por boca Trichomonas tenax Dientamoeba fragilis Iodamoeba butschlii Endolimax nana Entamoeba coli Entamoeba hartmanni Entamoeba polecki Entamoeba gingivalis

Intestino Intestino Intestino grueso Colon y ciego Intestino grueso Intestino grueso
Encas de la boca Intestino grueso Intestino grueso Intestino grueso Tubo digestivo Tubo digetivo Tubo digestivo Alveolos dentarios, sarro y dientes careados

Contacto bucal

Entamoeba histolytica

Balantidium coli

TRANSMISIN Por contacto directo

AGENTE Trichomona vaginalis

LOCALIZACIN Secreciones vaginales

TRANSMISIN Por artrpodos, transparentara, transfusiones

AGENTE Tripanosoma cruzi

LOCALIZACIN Sangre; heces en la chinche

Leishmania donovani, L. mexicana, L. tropical, L. brasiliensis Por transfusin, transparentara Por transfusin, transparentara Plasmodium vivax, P. malariae, P. falciparum, P. ovale Toxoplasma gondii Pneumocystis carinii

Piel, mucosas y vsceras

Hgado, sangre

Todos los tejidos (intracelular) Pulmones

Trichomona vaginalis

Plasmodium vivax

Toxoplasma gondii

TRANSMISIN Ingesta de carne de cerdo infectada

AGENTE

LOCALIZACIN

Taenia solium (tenia de Intestino delgado cerdo), taenia saginata (tenia de la vaca), Equinococcus granulosus (tenia hidatdica), equinococcua multilocularis (tenia hidatdica alveolar) Hymenolepis nana (tenia enana), hymenolepis diminuta (tenia de la rata) Enterobius vermicularis Intestino delgado

Ingesta de alimentos contaminados

Intestino delgado Intestino delgado y grueso Tracto digestivo Hgado

Por suelo Triada Ingesta de animales contaminados

scaris lumbricoides Trichuris trichura Fasciola hepatica

Taenia solium

Taenia saginata

Qu son las Soluciones Conservadoras?

Preserva Mantiene condiciones optimas No alterar cualidades:
- pH - Parsitos

MUESTRA

Solucin lugol
Mezclar:
5ml formaldehido 50 ml de agua destilada 40 ml timerosal 1 ml de glicerina Frasco color ambar

SOLUCION / FIJADOR MIF

Merthiolato-Yodo-Formol
Componentes: Formalina 37% Solucin lugol Timerosal

Mezclar: 15ml formaldehido + 1ml lugol + 7,5 ml timerosal. Poner 1 o 2 gotas de MIF en porta y agregar heces (2mg), poner cubre y observar a microscopio.

Se utiliza ?
Preserva :
Trofozoitos Quistes huevos y larvas de helmintos. Mtodo ms recomendado

SOLUCION / FIJADOR PAF

Fenol-Alcohol-Formol

SHAUDINN. 4.5G DE BICLORURO DE MERCURIO ALCOHOL ETILICO AL 95% ACIDO ACETICO

SOLUCION / FIJADOR PVA

Alcohol de Polivinilo
Cristales de cloruro de mercurio (HgCl2) Alcohol etlico al 95% cido actico glacial Glicerina

Parsitos intestinales: trofozoitos ! Fija proporcin: 3 partes de PVA y 1 parte de heces

Conservacin de muestras

Materia fecal
Realizar la deposicin en un recipiente de boca ancha adquirido en farmacias. Transferir una porcin de materia fecal, del tamao de una cucharadita de caf, al frasco con lquido conservante provisto por nuestro laboratorio, segn se explica a continuacin: - Si la materia fecal es diarreica, juntar una muestra por da, durante tres

das

seguidos. - En caso de diarrea prolongada o sospecha de amebiasis, juntar seis tomas de diferentes das en el trmino de catorce das. - Si la materia fecal es slida o en caso de estreimiento, juntar una muestra da por medio. Se deben realizar un total de tres tomas, y el perodo de recoleccin no debe exceder los siete das. - Si en las deposiciones se observan gusanos o elementos sospechosos, colocarlos en otro recipiente con agua corriente. - Completar la ficha epidemiolgica que se adjunta

Recomendaciones Es importante respetar el tamao indicado de las muestras, dado que la cantidad total no debe sobrepasar la mitad del recipiente, porque de lo contrario se invalida el estudio. Evitar comer manteca, frutas de hollejo, verduras de hoja y legumbres durante los tres das previos a la recoleccin y hasta finalizar la misma. Evitar la contaminacin con orina y/o agua del inodoro No tomar purgantes oleosos, antiparasitarios o compuestos con bismuto, bario o carbn 72 horas antes de comenzar la recoleccin de materia fecal y hasta terminar la misma. Mantener la muestra a temperatura ambiente hasta su entrega al laboratorio.

Orina
Muestra: miccin media.

Volumen: 0,5 ml.

Recipiente: envase estril de boca ancha. Consideraciones: primera miccin de la maana.

Envase estril de boca ancha

Recomendaciones Si es posible, no recoger la muestra antes de que haya transcurrido una hora desde la ltima miccin. Recoger nicamente los primeros 10-30 cc de orina. La muestra debe llegar al laboratorio en las 24 horas siguientes a su toma, si se mantiene a temperatura ambiente y antes de 5 das si se mantiene refrigerada. Sobre cada muestra tomada, se pueden realizar anlisis para la deteccin de otros microorganismos adems de Trichomonas vaginalis: Muestra vaginal, uretral y orina: Neisseria gonorrhoeae Chlamydia trachomatis Mycoplasmas

Sangre
Examen microscpico de sangre fresca: 2 ml de sangre total con anticoagulante. Gota gruesa: Sangre sin anticoagulante 3 a 4 gotas por preparacin. Tomada por puncin venosa o digital.
PERODO PTIMO PARA LA TOMA DE MUESTRA:

Debe considerarse el perodo de la enfermedad del paciente. En aquellos pacientes que se sospeche estn en perodo agudo, debern realizarse los exmenes directos lo antes posible y para la serologa se deber esperar a lo menos 15 das. Para recin nacidos ambas muestras deben recolectarse simultneamente.

CONSERVACIN Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS Suero o Plasma: Conservada a 4 C por un mximo de 5 das Congelada a 20 C Transporte: En tubo plstico con tapa hermtica con la medidas necesarias de bioseguridad y para mantener la temperatura. Sangre total para Mtodos directos: Conservada a 4 C por un mximo de 3 das Transporte: En tubo plstico con tapa hermtica con la medidas necesarias de bioseguridad y para mantener la temperatura.

Clasificacin de Coproparasitoscpicos
POR EL TIPO DE PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA POR SU EXPRESIN NUMRICA MTODOS ESPECIALES

1. 2.

3. 4. 5. 6.

Directo: Macroscpico o microscpico Concentracin por: a. Flotacin b. Sedimentacin c. Termotropismo Dilucin Cultivo Aclaramiento Tincin

1.

2.

CUALITATIVOS: a. En fresco b. Cucharilla rectal c. Centrifugacin Flotacin (Faust) d. Flotacin (Willis) e. Sedimentacin (Ritchie) CUANTITATIVOS: a. Concentracin (Ferreira) b. Dilucin (Stoll)

1. 2. 3. 4.

5.
6. 7.

Tamizado Graham Baermann Harada-Mori Coloracin Khon Biopsia tejidos Microscopia electrnica

POR APLICACIN DE COLORANTES

1. 2.

POR EL MOMENTO DE SU REALIZACIN

1. 2.

Preparaciones hmedas Preparaciones fijas: a. Temporales b. Permanentes

Inmediato o en fresco Mediato: de muestra preservada o no preservada

 CUALITATIVOS FLOTACIN

CUANTITATIVOS
Stoll Ferreira

Faust Sacarosa Willis

Kato-kats

SEDIMENTACIN

ESPECIALES
Tamizado Graham Cpsula duodenal Baerman

Ritchie Sedimentacin simple en copas Charles-Barthelemy

METODOS DE CONCENTRACION
Mtodos fsicos

Dilucin minuciosa heces en lquido o solucin de densidad:

Inferior a la de los parsitos (Tcnicas de sedimentacin)

Superior (Tcnicas de flotacin)

Ventajas:

Realizacin muy simple Precisan poco material

Inconvenientes:

Procesos largos Exigen mucha manipulacin No aplicables a series grandes de muestras

En ciertos casos se puede acelerar x centrifugacin suave

Mtodo de concentracin por flotacin de Willis

para la investigacin de GEO-helmintos. Consiste en

preparar el material fecal con Solucin saturada de Nacl Los Huevos de helmintos de peso especfico menor que la solucin saturada de Nacl tienden a subir y adherirse a una lmina colocada en contacto con la superficie del lquido.

 Tomar 1 gr aproximadamente de materia fecal. . Colocar la muestra en un recipiente pequeo de boca ancha para recolectar las heces y mezclar con la solucin saturada de ClNa con la ayuda de un palillo. Trate de llenar completamente el recipiente con la solucin, mezcle. 4. Cbralo con un porta objeto limpio, de manera que el lquido haga contacto con la lmina 5. Esperar 5-10 minutos.

 En ese lapso, los huevos de helmintos, cuyo peso especfico es menor que el de la solucin, flotarn y quedarn adheridos a la cara del porta objeto en contacto con la mezcla. 7. Retirar el porta objeto e invertirlo rpidamente para evitar prdida de material. 8. Examinar al microscopio inmediatamente. 9. Reporte sus resultados en la ficha. Disctalos con sus compaeros, ventajas y desventajas del mtodo

 Este mtodo es de alta

sensibilidad en el diagnstico de huevos livianos de helmintos: A. duodenale, N. americanus, A. lumbricoides, H. nana. No indicado en la bsqueda de huevos pesados ni de larvas.

Mtodo de concentracin-Flotacin de Faust.

Este mtodo se utiliza solucin de Zn, cuya densidad

especfica es de 1.180 que conforma un medio de densidad ms alta que la de los huevos: Necator 1.055, Tricocfalo 1.150, Ascaris frtil 1.110 y facilita que los huevos livianos de estos helmintos, con menor peso especfico que la solucin, se concentren y floten.

 Tcnica: 1) Mezclar bien una porcin de materia fecal para preparar una superficie en 10 partes de agua destilada. 2) Filtrar la suspensin a travs de una gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de centrfuga, ayudndose con un embudo pequeo. 3) Centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1 min. 4) Decantar el lquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida anterior, centrifugar nuevamente . Resuspender el sedimento. 5) Repetir el procedimiento 2 veces hasta que el lquido sobrenadante este listo.

6) Decantar nuevamente el lquido sobrenadante reemplazndolo por igual cantidad de solucin de sulfato de Zn al 33%. Mezclar bien la solucin con el sedimento. Centrifugar durante 1 minuto a 1500 rpm. 7) Tomar 3-4 gotas de las partculas que flotan en la superficie del lquido. Colocarlos en un porta-objeto y mezclarla con 1-2 gotas de lugol, colocar cubre-objeto. 8) Examinar al microscopio y reporte sus resultados.

Mtodo indicado para el diagnstico de huevos livianos de helmintos (Necator, tricocfalos, ascaris, H. nana).

Metodo de Ritchie
+ Se utiliza para observar huevos, quistes y larvas de helmintos si importan la densidad que tengan.

(Entamoeba hystolitica Ascaris lumbricoides Trichuris trichuria Necatur americanus Giardia lamblia Strongyloides stercolaris Hymenolepis nana)
+ elimina los detritos orgnicos (ter), elimina material lipdico y coloidal (sedimento claro) + se utiliza formaldehdo para mantener la integridad de las formas parasitarias (fijador)

Metodo de Ritchie
Procedimiento:

5 ml de SSI en un tubo de ensaye + (abate lenguas) 2g de materia fecal + homogeneizar. Pasar la suspensin a travs de una gasa colocada en un embudo a otro tubo Centrifugar a 2000 rpm por 1 min Decantar en sobrenadante y suspender en SSI. Centrifugar, decantar y resuspender = sobrenadante claro.

 2.5 ml de sol. De formaldehdo al 10%, mezclar u reposar 10 min.

1.25 ml de ter, tapar, agitar durante 30 s.

Mtodo de Ritchie

Centrifugar 2 min a 1500 rpm.

Cuatro capas:

ter (superficie) restos fecales formaldehdo sedimento (contenido de elementos parasitarios)

= Pipeta pasteur tomar sedimento, extraer una gota y

colocar en un porta objetos. + lgol parasotologico, colocar cubre objetos , homogenizar. Observar a 10 y 40X

Mtodo de Carles Barthelem Se utiliza para identificar quistes, huevecillos o larvas.

=
Carles I

formol 10 ml Cloruro de sodio al 0.85% 90 ml Carles II Ac. Citrico cristalizodo 12 g Agua destilada 100 ml Formol 2 ml

Mtodo de concentracin por sedimentacin con MIF

1955 No se utiliza formol por que es una muestra previamente preservada. Permite hacer una concentracin de huevos, quistes y larvas y trofozoitos (pueden ser destruidos con el ter a pesar de que hallan sido preservados y fijados con MIF merthiolate, yodo y formol

=
Procedimiento: Mezclar la suspensin fecal y pasarla a traves de una gasa humedecida en MIF a un tubo conico y se coloca en la centrifuga. + 3 ml de ter, tapar y agitar vigorosamente durante 1 min. Centrifugra a 1500rpm un min. Cuatro capas Eter Restos fecales solucion Mif Sedimeto con las formas parasitaris Decantar

=
Pipeta pasteur tomar muestra de la parte sup. del

sediment porta u cubre objetos.

MTODO DE STOLL
Agregar heces hasta 60ml
56 ml de NaOH 0.1 N

10 perlas de vidrio

Mezclar

Observar 40X

Tomar 0.075ml

Clculo
1.- La disolucin fecal original es de 1:15 (4ml/60ml). Como se contaron los huevos en un volumen total de 0.15 ml, el nmero total de stos en 1ml de heces se encuentran al multiplicar la cuenta total por 100 (1/5 x 0.15 x 100=1).

2.-Multiplicar x 100 g de materia fecal 3.- Nmero de parsitos hembras presentes, se divide el nmero diario de huevecillos que hay en las heces entre el nmero promedio de hembra de la especie Necator: 7000 huevos/da hembra de la especie Ascaris: 200000 huevos /da hembra de la especie Trichuris: 7500 huevo/da Resultados ms exactos. Multiplicar el nmero que se obtiene en el paso uno por el factor apropiado. Heces formadas= 1, blandas formadas=1.5, blandas diarreicas=3, fluidas diarreicas=4, muy lquidas=5.

MTODO DE FERREIRA

4 g de heces

16ml de formaldehdo
Homogeniz ar

2000r.p.m. 1 min

2-3ml de ZnSO4

2 veces (agua)

+ gasa

Campana de Ferreira

2000 r.p.m. 1min

Observar a 40X

Huevo de Ascari

Huevo Himenolepys nana

Huevo de Necator

Huevo de Trichuris

Huevo de Tenia

MTODO DE KATO
Examen CPS de frotis grueso Cuantitativo Utiliza un rectngulo de celofn Dx de Helmintos y concentracin de

huevecillos/gramo de heces

1.

Procedimiento Con un aplicador de madera, se toman 50 mg de

materia fecal y se depositan en un porta objetos.

2. Se cubre con el rectngulo de celofn, que

previamente se dejo 24 hrs en solucin de verde de malaquita y glicerina

3. La preparacin se coloca sobre papel absorbente y se presiona hasta que cubra 25 mm2 4. Se deja reposar 1 hora a temperatura ambiente o a 37C por media hora
5. Se observa al microscopio Contando todos los huevos y larvas

Resultados
50mg de muestra---------1 huevo 1000mg ---------------------X huevos X= 1000 x 1 x 20 = huevos/g de heces 5

TAMIZADO

Anlisis cualitativo mtodo mecnico

OBJETIVO: Recuperacin de parsitos o segmentos de

estos en materia fecal

UTILIDAD: Taenia solium y Taenia saginata.

TAMIZADO MTODO

TAMIZADO

C/solucin salina Tincin o aclaramiento

GRAHAM
Clsico mtodo de raspado repianal
OBJETIVO: Mtodo ms efectivo para la bsqueda de

huevos de Enterobius vermicularis

UTILIDAD:

lumbricoides, nana.

Ascaris Trichuris trichura e Hymenolepis

Encontrar huevos de

GRAHAM
MTODO

GRAHAM

CPSULA DUODENAL
OBJETIVO: Demostrar la presencia de parsitos que se

alojan en duodeno y en su momento crean dificultades para el Dx.

UTILIDAD:

Giardia lamblia, stercoralis y Fasciola hepatica.

Strongyloides

CPSULA DUODENAL MTODO

30a 1 hora

C/solucin salina

Extrae exprime

VERDE AMARILLENTO

CPSULA DUODENAL

Mtodo de Baermann
Tcnica especial para identificar larvas de

Strongyloides

Procedimiento
1.- Se coloca un embudo sobre un soporte circular,

unida al embudo un tubo de caucho o manguera, que se cierra en su extremo con una pinza.
2.- Se cubre con dos capas de gasa un crculo de

alambre, cuyo dimetro sea ligeramente inferior al embudo, y de modo que los extremos de la gasa permanezcan doblados dentro del anillo, sobresalir, y se coloca encajado dentro del embudo.

 3.- El embudo se llena con agua templada de 37 hasta

un nivel que cubra a la gasa, y la muestra de heces se coloca sobre ella, parcialmente en contacto con el agua.
4.- El dispositivo se mantiene a temperatura

ambiente durante 8-12 hrs, despus de ello se recogen unas gotas de lquido del tubo del embudo, en una caja de Petri pequea.
5.- Se examina buscando las larvas al microscopio a

pequeos aumentos.