DETERMINACIN DE ALCOHOL

EN SANGRE DE RATA
Laboratorio de Toxicologa General
Determinacin de Etanol
1. La determinacin de alcohol etlico en humores o tejidos humanos es una de
las prcticas analticas ms frecuente en un laboratorio forense.





2. Puede producir en el hombre formas clnicas del estado de inconciencia o
disminucin de reflejos, consignndose datos estadsticos que dan cuenta de
su relevancia crimingena

Vas metablicas hepticas
SMOE Puede ser el responsable del 10% o ms de la oxidacin del etanol cuando las
concentraciones de alcohol son altas o las exposiciones son repetida.
Va de las catalasas, que catalizan la oxidacin del etanol, con gran predominio en los
microsomas hepticos.
El alcohol es soluble en agua
El 2 y el 10% del etanol ingerido se elimina sin metabolizar, principalmente
por orina (3%), aire expirado (0.7%) y sudor (menos del 0.1%).
La mayora del alcohol consumido (90-98%) se elimina al ser metabolizado
por el hgado

OBJETIVOS
Determinar el grado de alcoholemia en
muestras de sangre.
Hipotesis
Se espera que mediante el mtodo Qumico de
microdifusin de Conway conocer la cantidad de
etanol en sangre de rata debido a la oxidacin
del alcohol con el dicromato de potacio lo que
da lugar a el remanente del dicromato el cual se
determinara su absorbancia por espectroscopia.
Tcnica de microdifusin de Conway
Es un sistema cerrado en la cual el etanol es
separado de la matriz biolgica para ser
absorbido en otro compartimento.

El etanol reacciona con una solucin cida de
dicromato de potasio mediante un proceso
de oxido-reduccin.
Para dar una serie de colores que van del amarillo
(color original del reactivo) que nos indica que no
hay reaccin, al azul, dependiendo de la cantidad
del etanol que se encuentre en la muestra.
Prueba presuntiva
Metodologa
2ml mezcla oxidante
(Dicromato de potasio +
cido sulfrico)
1ml sangre + 1ml agente liberante
(solucin saturada de carbonato de
potasio)
Cerrar la cmara y mezclar con
movimientos rotatorios
Dejar en reposo
durante 2 horas
a temperatura
ambiente
BLANCO: Colocar 2 mL de la solucin
de dicromato de potasio en un matraz
volumtrico de 10 mL y aforar con
agua destilada
Transferir la mezcla oxidante de la
cmara a un matraz volumtrico
de 10 mL, aforar y agitar
Leer un espectrofotmetro, a
una longitud de onda de 430 nm
RESULTADOS Y DISCUSIONES
DETERMINACIN DE ETANOL EN SANGRE
06/05/2014
Abad, A., P.; Huerta, A., M.; Pacheco, H., E.;
Snchez, S., S.
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Clculos
Muestra Absorbancia
Blanco
(K
2
Cr
2
O
7
)
1.070 1.00
A 0.890 0.985
B 0.575 0.556
C 0.491 0.462
D 0.324 0.363
E 0.688 0.633
Concentracin Absorbancia
Volumen
Ocupado
Concentracin
Total de
K
2
Cr
2
O
7

4.618

1.0 2 mL 9.263

PM K
2
Cr
2
O
7
= 294 mg/mol PM CH
3
CH
2
OH = 46 mg/mol

2(K
2
Cr
2
O
7
) = 3(CH
3
CH
2
OH)

588 mg/mol 138 mg/mol

Cantidad de K
2
Cr
2
O
7
que no reaccion =
(9.623 /)
1.0


Muestra A =
(9.623

) .0.937
1.0
= 9.016

A= 9.623

- 9.016

= 0.606

588 mg
dicromato
138 mg
alcohol

0.606 mg
dicromato
x

X= 0.142 mg/mL
06/05/2014
Abad, A., P.; Huerta, A., M.; Pacheco, H., E.;
Snchez, S., S.
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RESULTADOS
Muestra Absorbancia
Concentracin de
Etanol
Grado de
Intoxicacin
Blanco
(K2Cr2O7)
1.070 1.0 - -
A 0.890 0.985 0.142 mg/mL Ligera
B 0.575 0.556 0.981 mg/mL Ligera
C 0.491 0.462 1.182 mg/mL Ligera
D 0.324 0.363 1.482 mg/mL Moderada
E 0.688 0.633 0.766 mg/mL Ligera
06/05/2014
Abad, A., P.; Huerta, A., M.; Pacheco, H., E.;
Snchez, S., O.
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CONCLUSIONES
DETERMINACIN DE ETANOL EN SANGRE
06/05/2014
Abad, A., P.; Huerta, A., M.; Pacheco, H., E.;
Snchez, S., S.
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