ORGANIZAO GNICA DE

PROCARIOTOS
Universidade Federal de Pelotas
Centro de Biotecnologia
Graduao em Biotecnologia
Disciplina: Biologia Molecular
PROCARIOTOS
ORGANISMOS UNICELULARES QUE TM COMO
CARACTERSTICA PRINCIPAL A AUSNCIA DE NCLEO
INDIVIDUALIZADO
- A diviso em 5 Reinos proposta por Whittaker (1969)

- Mas atualmente a proposta de domnios de Woese (1978)
prevalece

SISTEMAS DE CLASSIFICAO DOS
SERES VIVOS
Whittaker
1969


5 reinos
dividos
principalmente
pelas
caractersticas
morflogicas e
fisiolgicas

o 3 tipos de clulas :

oReino Animalia

o Reino Plantae

o Reino Fungi

o Reino Protista
1 Tipo Eucaritica







2 Tipos de
Procaritica
1978, Woese TRS DOMNIOS -
arquibacterias
Domnio
Eucarya
Domnio
Bacteria
Domnio
Archaea
CLASSIFICAO DOS SERES VIVOS
Woese 1977
3 domnios
RNA ribossomal
Estrutura de membrana lipdica
RNA transportador
Sensibilidade a antibiticos

* Domnio Eubacteria: bactrias verdadeiras, possuem parede


* Domnio Eucaria: todos os eucariotos. Ncleo verdadeiro


* Domnio Archae: surgiram a aproximadamente 4 bilhes de anos
so mto primitivas, encontradas em ambientes hostis

- Extremfilas (termfilos Termophylus aquatticus Taq DNA polimerase)
Pyrococcus geisers e guas termais
-Metanognicas (ambientes como
pntanos, ricos em gs metano)

- Acidricas: ambientes cidos

- Halfilas: alta [ ] de sal , salinas
CLASSIFICAO DOS SERES VIVOS
DNA
DNA
RNA
Protena
Replicao
Transcrio
Traduo
Trasncrio Reversa
O QUE UM GENE?
Toda sequencia nucleotdica
necessria e suficiente para a
sntese de um polipeptdeo ou de
uma molcula de RNA estvel.

ESTRUTURA DE UM GENE DE
PROCARIOTO
ESTRUTURA DE UM GENE DE
PROCARIOTO
Promotor
Regio Codificadora
Terminador
Promotor
Regies Codificadoras
Terminador
OPERON
ESTRUTURA DE UM GENE DE
EUCARIOTO
Promotor
Regio Codificadora Stio de PoliA
hnRNA
AAAAAAAAAA
mRNA
AAAAAAAAAA
Exon
Intron
D
N
A

R
N
A

ESTRUTURA DE UM GENE DE
EUCARIOTO
GENES CPIAS, PARALOGOS OU
HORTOLOGOS
30% de identidade ao
longo de 60% de sua
seqncia
O QUE GENOMA?
o conjunto de genes de um
organismo
D
N
A

B
A
C
T
E
R
I
A
N
O

CARACTERSTICAS DE GENOMAS DE
PROCARIOTOS
Ausncia de um complemento diplide de genes
(mutaes)
Uso de quase todo o genoma na codificao e na
regulao (sobreposio)
Colinearidade dos genes e seus produtos proticos
Tendncia de apresentar genes codificando funes
relacionadas agrupados (operons)
Existncia de unidades genticas acessrias
(plasmdios, bacterifagos e transposons)
REPLICAO
USO DE QUASE TODO O GENOMA NA
CODIFICAO E NA REGULAO
Uma cpia de cada gene
Vrias cpias apenas do rDNA (DNA que codifica
para o rRNA)
Sobreposio de genes
COLIARIDADE DOS GENES E SEUS
PRODUTOS PROTICOS
ORGANIZAO DOS GENES EM
OPERONS
- Nmero varivel de regies codificadoras
- Regies intercistrnicas variam de 1 a 40 pb
- Aproximadamente 20 a 30% dos genes esto em
operons
Promotor
Regies Codificadoras
Terminador
OPERON
COORIENTAO DA REPLICAO E DA
TRANSCRIO
Localizao
preferencial de genes
prximo oriC
GENOMAS J SEQUENCIADOS
Fontes de informao

GenBank www.ncbi.nlm.nih.gov/genomes



TIGR www.tigr.org
TAMANHO ESTIMADO DO GENOMA DE
DIFERENTES ORGANISMOS
G
E
N
O
M
A

M
I
T
O
C
O
N
D
R
I
A
L

(For comparison, Eukaryotic chromosomes range from 2.9 Mbp (Microsporidia) to well
over 4,000 Mbp, although the largest genomes are littered with a tremendous amount of
repetitive "junk" DNA.)
T
A
M
A
N
H
O

D
O
S

G
E
N
O
M
A
S

ORGANIZAO GENMICA EM
DIFERENTES ESPCIES
GENOMA DE Escherichia coli K12
Tamanho: 4.639.221 pb
Nmero de genes: 4.300
ORF mais longa: 7.149 pb (2.383 aa)
87% corresponde a genes ou ORFs
11,4% corresponde a regies intergnicas ou
seqncias reguladoras
Elementos transponveis: 10 tipos diferentes de IS
GENES X ORFS
Gene: seqncia que codifica para uma protena ou
RNA conhecidos
ORF = open reading frame (fase de leitura aberta):
seqncia de nucleotdeos que potencialmente pode
codificar para uma protena
GENOMA DE Metanococcus jannaschi
Arqueobactria isolada de solo da base de um
vulco submarino
Cresce a 85 graus centgrados
Assim como outras arqueobactrias, apresenta
sistema de processamento de informao similar ao
de eucariotos
ELEMENTOS GENTICOS MOVEIS
ELEMENTOS GENTICOS MOVEIS
Transposons Genes
mveis
Plasmdeos Molcula de DNA circular,
extracromossomal, autoreplicativa encontrada em
bactrias
Bacterifagos Vrus de bactrias
BACTERIOFAGO
PLASMDEO
TRANSPOSONS
Plasmdios so molculas de DNA circular, fita
dupla, extracromossmico, que ocorrem
naturalmente em bactrias e algumas leveduras
VETORES PLASMIDIAIS
ELEMENTOS GENTICOS MOVEIS
Tamanho: 1 a 1000
kb
PLASMDEOS
Plasmdeo
VETORES PLASMIDIAIS
PLASMDEOS
PLASMDEOS
Nmero de cpias

Classificao
Repertrio de hospedeiros
Grupo de incompatibilidade
Fentipo conferido pelo plasmdio

Funes codificadas por plasmdios
Toxinas
Adesinas
Bacteriocinas
Resistncia a antibiticos
PLASMDEOS
Nmero de cpias

-Plasmdeos Multicopia;

- Plasmdeos Cpia nica (baixo nmero de
cpias)
Nmero de cpias;
Segregao da diviso
celular
REGULAO
Classificao

Repertrio de hospedeiros
(transmissvel, repertrio de hospedeiro restrito e repertrio de hospedeiro
amplo)


Grupo de incompatibilidade



Fentipo conferido pelo plasmdeo
PLASMDEOS
PLASMDEOS
Funes codificadas por plasmdios

Toxinas
Adesinas
Bacteriocinas
Resistncia a antibiticos
PLASMDEOS
R
E
P
L
I
C
A
T
I
V
O

I
N
T
E
G
R
A
T
I
V
O

PLASMDEOS
PLASMDEOS - CONJUGAO
pTarget
5670 bp
rNeomicina
rAmpicilina
Intron
Poly A
Promotor CMV
BamHI (1257)
EcoRI (1251)
EcoRI (1319)
HindIII (1326)
VETORES PLASMIDIAIS
Vetor de Expresso em
Eucariotos
Fago (lambda)
BACTERIFAGOS
Virulentos (ciclo ltico) infeco, replicao e
liberao das partculas virais aps lise celular

Temperados (ciclo lisognico) integrao do fago
ao cromossomo da clula hospedeira (pr-fago)
- Vrus que infectam bactrias;
- DNA ou RNA;
- Capsdeo
- Biologia do fago
- Utilizados para clonar fragmentos de 9kb a
25 kb
BACTERIFAGO
TRANSDUO
Mecanismo de transferncia de genes de uma clula
bacteriana para outra mediada por um bacterifago.


Transduo generalizada CICLO LTICO

Transduo especializada CICLO LISOGNICO
-So hbridos entre plasmdios e bacterifagos;
- Utilizados para clonar fragmentos de 25 a 35
kb;

COSMDEOS
TRANSPOSONS
So segmentos lineares de DNA capazes de
mudar de posio dentro do genoma.
Barbara McClintock - 1948
CARACTERSTICA DE UM
TRANSPOSONS
Possuem seqncias similares em ambas
extremidades (repeties terminais, geralmente
invertidas);

Carregam genes que codificam enzima capaz de
transport-lo;

Geram duplicao do stio de insero no DNA alvo.
TIPOS DE TRANSPOSONS
Seqncia de Inserso (IS) Transposon
simples que codifica apenas para a transposase
Transposon complexo Contm outros genes
alm dos genes responsveis pela trasposio


OBRIGADA PELA ATENO!