CONOCIENDO EL

MICROSCOPIO
Historia del Microscopio
1590. Primer microscopio compuesto
fue construido por los
holandeses H. Jansen y
Z. Jansen

1611 Kepler sugiri la manera de construir
un microscopio compuesto


1655 Hooke utiliz un
microscopio
compuesto para
describir unas
pequeas celdillas
en los cortes de
corcho a las que
denomin "clulas".
1674 Leeuwenhoek inform sobre
su descubrimiento de protozoos.
Nueve aos ms tarde observ
por primera vez bacterias


1833 Brown public sus observaciones microscpicas de
las orqudeas, y describi claramente el ncleo
celular.

1838 Schleiden y Schwann propusieron la teora celular,
afirmando que la clula nucleada es la unidad
estructural y funcional de las plantas y los animales.

1857 Kolliker describi las mitocondrias de las clulas
musculares.
1879 Flemming describi con gran claridad el
comportamiento de los cromosomas
durante la mitosis de las clulas animales

1882 Koch utiliz colorantes de anilina para teir
microorganismos e identific las bacterias que causan
la tuberculosis y el clera.
1908 Khler desarrolla el microscopio de fluorescencia
1930 Lebedeff dise y construy el primer microscopio de
contraste interferencial.
1931 Ruska y Knoll construyen el primer microscopio
electrnico
1932 Zernicke invent el microscopio de contraste de
fases. Se observan por primera vez clulas vivas no
teidas en detalle.
1934 Von Ardenne construye el primer microscopio
electrnico de barrido
Alberts, Bruce, Biologa Molecular de la
Clula (2da. Edicin, Ediciones Omega,
Barcelona, 1994)
1981 Allen e Inou perfeccionaron la microscopa ptica de
contraste video-amplificada.
Microscopios
Estereoscpicos
o lupas
Compuestos

M. ptico,
fotnico
o corriente

M. contraste
de fases
M. de
fluorescencia
M. Electrnico
M. E. de transmisin

M. E. de barrido

Microscopio estereoscpico o lupa
Aparato simple que forma una imagen
aumentada. (app. 540 veces)
Mayor poder de penetracin que el
microscopio de luz
Microscopios Compuestos
Poseen dos lentes que producen una
imagen ampliada, vertical e invertida al
objeto
Microscopio ptico, fotnico o
corriente
Es de campo claro ya que la luz
que llega perpendicular a la
preparacin, la atraviesa y
penetra el sistema ptico,
permitiendo un campo bien
iluminado.
Clula de Pisum,
coloracin: safranina-fast-greenTraqueidas del leo de Pinus

El microscopio ptico tiene un
lmite resolucin de cerca de 200
nm (0.2 m). Las clulas
observadas bajo el microscopio
ptico pueden estar vivas o fijadas
y teidas.
Microscopio de contraste de fases
Se usa
principalmente para
aumentar el contraste
entre las partes claras
y oscuras de las
clulas sin colorear.
Es ideal para
espcimenes
delgados, o clulas
aisladas
Phase contrast image of cultured
epithelial cells using a 20X objective
Microscopio de fluorescencia
Usa luz U.V. con una longitud de
onda (100 y 380 nm) menor que
la luz blanca (380 a 750 nm).
Esta luz excita ciertas sustancias
que emiten radiaciones (mayor a
380 nm) que las hace visibles.
Algunos materiales no requieren
colorantes pues tienen
fluorescencia propia y otros
deben ser teidos con colorante
fluorescente, es estimulado por
un haz de luz, emitiendo parte de
la energa absorbida como rayos
luminosos.
Clulas epiteliales , triple coloracin: ncleo
(azul), microtubulos (verdes), actina (rejo).
Microscopio electrnico
Posee mejor poder de resolucin y
aumento que los microscopios antes
mencionados.
Permite visualizar la ultraestructura celular
El microscopio electrnico de
transmisin (MET) tiene un limite de
resolucin de cerca de 2 nm. Un MET
permite observar profundidades despus
de haber sido fijadas y teidas con iones
de metales pesados. Los electrones son
dispersados cuando pasan a travs de
una fina seccin del espcimen, y luego
detectados y proyectados hacia una
imagen sobre una pantalla fluorescente.
El microscopio electrnico de barrido
(MEB) tiene un limite de 2nm. El MEB
permite observar la superficies de las
muestras, despus de haber sido
fijadas y teidas con iones de metales
pesados. Con esta tcnica los
electrones son reflectados sobre la
superficie del espcimen.
Observa detenidamente las siguientes fotos tomadas mediante microscopio
(micrografas) y seala qu tipo de microscopio se utiliz en cada caso. Justifica
a. Ameba, organismo
formado por una sola
clula (unicelular), que
mide cerca de 50
micrones
b. Clulas del interior de una
trompa de Falopio. Cada uno
de los pelitos que se ven
mide 10 micrones de largo y
se llaman cilios
c. Espermio
acercndose a un
vulo. El vulo
humano es una
clula que mide
poco ms de 100
micrones
d. Ncleo de una
clula animal, de
alrededor de 5
micrones de
dimetro
e. Corte transversal de una
hoja
f. Poros de salida de
glndulas gstricas.
Por una de ellas sale
un chorro de jugo
gstrico
g. Corteza cerebral
humana, que tiene un
espesor de unos pocos
milmetros
h. Glbulo blanco
deformado al atravesar
por un capilar
sanguneo. Este capilar
tiene un dimetro de
unos 10 micrones
i. Capilar sanguneo
cortado
transversalmente,
por el que asoma un
glbulo rojo, clula
que mide 7 micrones
de dimetro
Percepcin 3D
Tanto en la microscopa ptica como elctrica de transmisin, las muestras
se observan en cortes, vale decir, lminas delgadas que faciliten el paso de la luz o
los electrones segn corresponda. Por este motivo, para poder observar
microscpicamente, es necesario tener una buena percepcin tridimensional. Hay
que saber proyectar la estructura 3D desde una imagen que siempre ser
bidimensional, porque se trata de la foto de una lmina.
Para ensayar tal habilidad, se propone el siguiente ejercicio. Se trata de interpretar
de qu manera se hizo el corte para lograr las siguientes imgenes de objetos
comunes.
Objeto Foto
Forma en que se hizo el
corte
(dibuja o explica)
Peineta
Cuchara
Lpiz
Peineta
Tomate
Dado
Disquete
Preparacin tal como
se ve al microscopio
ptico. Se trata de las
clulas de la cubierta
interna del intestino
Mal esquema de una preparacin
microscpica
Preparacin tal como
se ve al microscopio
ptico. Se trata de las
clulas de la cubierta
interna del intestino
Esquema que no es esquema. Mas
bien es un retrato de la preparacin
Buen esquema de una preparacin
microscpica
Preparacin tal como
se ve al microscopio
ptico. Se trata de las
clulas de la cubierta
interna del intestino