PROGRAMA DE HISTOLOGIA

UNIVERSIDAD DE SUCRE
MEDICINA
2014
PROGRAMA DE PATOLOGIA
INTRODUCCION A LA HISTOLOGIA
OBTENCION DE LA MUESTRA
TIPOS DE BIOPSIAS
COLORACIONES Y COLORANTES
HISTOEMBRIOLOGIA DE LOS TEJIDOS
Histologa
Generalidades
Definicin e historia
Tcnicas especializadas (fijacin, deshidratacin,
aclaramiento, inclusin, corte y coloracin.
Estructura celular (animal y vegetal)
Histologa animal
Origen embrionario de los cuatro tejidos bsicos.
Tejido epitelial y glandular
Tejido conjuntivo (tambin llamado tejido conectivo)

Clulas del tejido conjuntivo.

Programa de Patologia
histologa y embriologia
Tejido conjuntivo embrionario
mesenquimtico
mucoso
Tejido conjuntivo del adulto
tejido conjuntivo laxo
tejido conjuntivo denso
modelado
no modelado
Tejido conjuntivo especializado
Tejido adiposo
Tejido cartilaginoso
Tejido hemopoytico
Tejido linfoide
Tejido seo
Tejido sanguneo
Tejido muscular
Tejido nervioso
Sistema circulatrio
Sistema tegumentario
Aparato digestivo
Pncreas, Hgado y vescula biliar
Apartato urinrio
Sistema reproductor
Que es histologa?
Estudio de los tejidos: clulas, sustancias
intercelulares y lquidos corporales

Objetivos: entender la micro estructura
celular
y correlacionar la forma con la
funcin

Buffers.
Sustancias qumicas utilizadas para mantener el pH
estable.

Tcnicas para la obtencin de una muestra con
Hematoxilina eosina.

1. Obtencin de la pieza
2. Fijacin (formol, bouin)
3. Deshidratacin
4. Aclaramiento (xilol, aceite de cedro)
5. Inclusin en parafina
6. Bloque
7. Desmoldar
8. Corte
9. Coloracin

PASOS A SEGUIR
PAR LA REALIZACION DEL PROCESO
Mtodos
Fijacin. El formol se aplica a la muestra al 10% por
lo menos durante un periodo de seis horas.
2. Obtencin de la muestra. Se le da el
tratamiento deseado a la pieza y se coloca en
una bolsa de gasa, con el fin de enjuagarlo en
agua corriente, por lo menos durante 15 minutos.
3. Deshidratacin.
A. Alcohol al 70% durante 95 minutos
B. Alcohol al 96% durante 95 minutos
C. Alcohol al 100% durante 95 minutos
D. Alcohol al 100% durante 95 minutos

4-ACLARAMIENTO:. Toluol, o xilol entre 90
y 180 minutos
5. Inclusin.
a. Secado de la muestra con gasa
b. Parafina a 56 grados durante una hora
c. formacin de la barra
d. 30 minutos de frezer
e. Fractura del taco.
5. Corte
6. Coloracin.
COLORACION

Secado de los cortes en estufa a 58 grados centgrados
durante 15 minutos
Xilol o Toluol durante 15 minutos en estufa
Xilol o Toluol durante 2 minutos
Alcohol al 100% durante 4 minutos
Alcohol al 96% durante 4 minutos
Alcohol al 70% durante 4 minutos
Alcohol al 50% durante 4 minutos
Agua destilada durante 30 segundos
Hematoxilina durante 45 segundos
Agua corriente durante 2 minutos
Alcohol al 50% durante 15 minutos
Eosina durante 30 segundos
Alcohol 96% durante diez minutos
Alcohol al 100% durante 10 minutos
Xilol durante por lo menos un minuto
Montaje con blsamo de Canad sinttico.
COLORACION
La principal coloracin usada en los
laboratorios de patologa es la de
Hematoxilina y Eosina.
Hematoxilina: Colorea los Nucleos
Eosina: Colorea el citoplasma
Con esta coloracin se pueden ver la gran
mayora de las lesiones tisulares y algunos
microorganismos
OTRAS COLORACIONES DE
HISTOQUIMICA
Ziehl Nielsen: Facilita la visualizacin de los
bacilos acido-alcohol resistentes ( Util en
el diagnstico de Lepra y TBC
Metenamina- Nitrato de plata de Grocot:
Permite visualizar los hongos y tambien los
Pneumocystis Carinii
Tricromico o Colracin de Masson:
permite resaltar la presenciade tejido
fibroso (colgeno)
Otras Coloraciones y su
Utilidad
PAS (acido Perydico de Schiff) facilita
apreciar el contenido de glucgeno y
mucina membrana basal y muchos hongos
Mucicarmin: Sirve para evaluar el contenido
de Moco en las clulas o en el intersticio
Rojo Congo permite estudiar la presencia de
Amiloide, sustancia proteinacea que se
deposita entre las clulas de algunos tejidos y
rganos.
Existen otras tcnicas para sustancias como
melanina, hemosiderina, cobre
OTRAS TCNICAD DIAGNSTICAS
En el caso que nose llega al diagnsitco
con H.E y con las histoqumica existen
otras tcnicas como:
Inmuno-histoqumica
Microscopa electrnica
Tcnicas de Biologa Molecular
Citometras de Flujo
Hematoxilina eosina H&E
A partir de 1950 se inicia uso de colorantes
TIPOS DE TOMAS DE BIOPSIAS
DEFINICION: MUESTRA DE TEJIDO DE UN
SER VIVO PARA SU ESTUDIO POR PARTE
DEL MEDICO PATOLOGO
PUEDEN SER:
CON O SIN ANESTESIA
POR PUNCION O ASPIRACION
POR PUNCH, POR TRU-CUT O POR BISTURI
TIPOS DE BIOPSIAS
BIOPSIA INCISIONAL: Cuando se obtiene
solo una porcin de la lesin. Son las ms
comunes. Se utiliza en el estudio de
proceso inflamatorios y ulceras de piel
Cuando se sospecha malignidad en una
lesin.
Es obtenida con bistur, punch,
endoscopias, broncoscopia, tru-cut

TIPOS DE BIOPSIAS
BIOPSIA ESCISIONAL: Cuando se incluye la
totalidad de la lesin que motiv el
procedimiento
Util para el estudio de tumores de piel y
de tejidos blandos
Si se sospecha malignidad, se hacen
mrgenes de reseccin amplios y deben
ser sealados con suturas
TIPOS DE BIOPSIAS
BIOPSIAS POR CONGELACION:
Cuando se requiere de un diagnstico
intra-operatorio, se toma una muestra del
tejido para ser enviada al laboratorio sin
material de fijacion. Se congela con
Nitrogeno liquido o en un Criostato. Y se
colorean.

TIPOS DE BIOPSIAS
Pueden ser:
SIMPLES: Un solo Fragmento de un mismo
sitio
MULTIPLES: De dos o mas sitios y por
separados, y rotulados
ESPECIMENES QUIRURGICOS:
Cuando se envan diferentes rganos
para su estudio



Origen y presencia de cromferos
SIMPLES (1 o + cromferos)
NATURALES: con radial cetnico. Ej: hematoxilina,
eosina, rojo de Brasil
ARTIFICIALES: con radical benceno.
CIDOS: selectivos para protoplasma. Ej: Fast green, eosina,
eritrocina
BSICOS: selectivos para estructuras nucleares. Ej:
hematoxilina y ferrica de delafield
COMPUESTOS (varios cromferos combinados)
SUDAN III
Colorantes cidos (eosina) carga neta
-

Na
+
anilina
f

Colorantes bsicos (hematoxilina?) carga neta
+

anilina
+
Cl
f



Componentes aninicos
Grupos PO
4
-
de cidos nucleicos
Grupos SO
3
-
de glucosaminoglucanos
Reaccin de grupos aninicos con un
colorante bsico Basofilia
Tincin con hematoxilina
Componentes catinicos
(grupos aminos ionizados de protenas)
Reaccin de grupos cationicos con un
colorante cido Acidofilia
Grupos aldehdo y el reactivo de
Schiff
La capacidad de la fuscina bsica
decolorada (reactivo de Schiff) de
reaccionar con los grupos aldehdo trae
como consecuencia la aparicin de un color
rojo distintivo y es la base de las reacciones
del PAS (cido perydico reactivo de Schiff)
y de Feulgen
Tie carbohidratos y macromoleculas ricas en
carbohidratos, detecta glucogeno en clulas
PAS + HCl tien DNA.
PAS=cido perydico - Reactivo de Schiff
EMBRIONARIO TEJIDOS
RGANOS, APARATOS Y
SISTEMAS
ECTODERMA
Nervios
Epitelio Glandular
Epidermis y estructuras
Mucosas
Sistema nervioso y rganos
de los sentidos
MESODERMA
Muscular
Conjuntivo y
adiposo
Cartilaginoso y
seo
Epitelial glandular
Sistema muscular
Dermis
Esqueleto
Aparato excretor
Aparato reproductor
Aparato circulatorio
Pulmones
Glndulas endocrinas
ENDODERMA
Epitelial y
glandular
Aparato digestivo
Epitelio de revestimiento
interior de los pulmones
DE CELULA A TEJIDOS
CELULA
TEJIDO ORGANO
SISTEMA SER VIVO
EPITELIO
Tejido sin sustancias intercelulares que separen las
clulas e incluye todas las membranas compuestas
por clulas que recubren el exterior y las superficies
internas. Se estudian con base en su morfologa no
por su embriologa. Viene del latin Epi: sobre, Thele:
pezn
Cubierta o revestimiento de los rganos
internos y externos del cuerpo, incluido
los vasos. Recubre todas las superficies
del organismo, tapiza las cavidades
corporales y forma glndulas.
Papilas lengua, E. olfatorio, retina
FUNCIONES
Proteccin de los tejidos subyacentes contra
lesiones traumticas.
Transporte transcelular de molculas a travs
de las capas epiteliales
Secrecin de muco, hormonas y enzimas etc.
Absorcin de material (tubo intestinal).
Control del paso de materiales entre los
compartimientos del cuerpo por medio de
permeabilidad selectiva entre las clulas
epiteliales.
Identificacin de las sensaciones mediante
papilas gustativas: retina y clulas ciliadas del
odo.


Caractersticas
Las clulas forman una lmina contigua,
estn firmemente unidas entre si mediante
complejos de unin. Presentan tres tipos de
uniones: ocluyentes (estrechas), adherentes
(estabilidad) adhesin al citoesqueleto de la
clula contigua. Comunicantes (mantienen
la homeostasis en los organos.
Presentan poco espacio intercelular y poca
matriz extracelular
Est separado del tejido conectivo por una
matriz extracelular llamada lmina basal,
sintetizada por clulas epiteliales.

REGIN APICAL
REGIN
LATERAL
Caractersticas
Es avascular, el tejido conectivo de
sostn le proporciona nutricin, O
2
por
medio de difusin, a travs de la
membrana celular.
EPITELIO
LAMINA BASAL
TEJIDO CONECTIVO
EPITELIO DE SUPERFICIE O DE REVESTIMIENTO EXTERNO SE
CONTINUA CON LOS PASAJES DEL DIGESTIVO,
RESPIRATORIO Y URINARIO
CLASIFICACI
N
1. Cantidad de
estratos celulares
(nmero de clulas
entre la lmina basal
y la superficie libre).

Epitelio Plano Simple
Membrana
compuesta por una
sola capa de clulas,
se originan del
mesodermo.
Endotelio (vasos
sang.)
Mesotelio
(Cavidades
corporales y organos.

Compuesto
Membrana
compuesta por ms
de una capa de
clulas


2. Segn la morfologa de las
clulas
Clulas planas (escamosas)
cubico
Cilindrico
Especiales
Seudoestratificado

De transicin (polimorfico)
ESQUEMAS EPITELIOS
EPITELIO PLANO SIMPLE: Una capa de clulas








EPITELIO SIMPLE
PLANO
EPITELIO SIMPLE PLANO ARTERIA Y VENULA
EPITELIO PLANO SIMPLE
Clulas aplanadas con ncleo oval en el
centro
Presentes en capilares renales
Circulatorio y Vasos sanguineos Endotelio,
Mesotelio (pleura)
Casos especiales epitelio plano simple
SIMPLE
ARTERIA
Endotelio
Nucleos del endotelio
Tnica intima
Tnica media
Tnica externa
ESCAMOSO
SIMPLE
CELULAS ENDOTELIALES. VISTA DE CELULAS
ENDOTELIALES DE UN PEQUEO VASO EN UN
CORTE TRANVERSAL. OBSERVE EL NUCLEO
MESOTELIO: ES EL EPITELIO QUE RECUBRE
CAVIDADES INTERNAS
CUBICO
EPITELIO CUBICO SIMPLE TUBULO RENAL
EPITELIO CUBICO SIMPLE
Clulas cuadradas con ncleos esfricos
en el centro.
Conductos secretores, renal y ovarios


CILINDRICO
EPITELIO CILINDRICO SIMPLE - INTESTINO
EPITELIO CILINDRICO SIMPLE
Columnares o
cilndricas con
ncleos ovales a la
misma altura de la
base.
Tubo digestivo y es un
epitelio secretor.
Posee borde enribete
en cepillo que son
prolongaciones
celulares
Funciones: Proteccin en superficies hmedas especializacin
para secretar moco (estomago, endocervix) o para absorber
(intestino delgado, digestin)
EPITELIO CILINDRICO SIMPLE CILIADO
Ejemplo trompas de
falopio, epididimo.
Los cilios desplazan
moco a lo largo de la
membrana.
EPITELIO CILINDRICO SEUDOESTRATIFICADO
Clulas sobre lamina
basal, todas llegan a
la superficie, con
ncleos en posicin
irregular.
Ncleo en la parte
mas ancha pero a
diferentes niveles.
traquea
FUNCIONES:
Captan el polvo evitando
que entre a los pulmones
Humedecen el aire
inspirado

TRAQUEA
Membranas epiteliales
estratificadas
Epitelio cilndrico estratificado
Epitelio plano estratificado no
queratinizado
Epitelio de transicin

CUBIERTAS EN SUPERFICIES SECAS
Epitelio plano estratificado queratinizado

CILINDRICO
ESTRATIFICADO
EPITELIO CILINDRICO ESTRATIFICADO
Clulas profundas son similares al
Epitelio Plano Estratificado pero las
superficies tienen forma cilndrica.
Presentes en los conductos excretores
de glndulas de gran tamao.
EPITELIO PLANO ESTRATIFICADO
Estratos son variables pero la
capa identificable es gruesa.
Clulas de la membrana basal
son cbicas altas o cilndricas
ordenadas y se achatan hacia
la superficie hasta ser
escamosas.
Epidermis, fauces, esfago.
EPITELIO PLANO ESTRATIFICADO NO QUERATINIZADO
Fauces, vagina y no hay
perdida del ncleo.
EPITELIO CUBICO ESTRATIFICADO
Poco frecuente.
Glndulas sudorparas
EPITELIO TRANSICION
Recubre rganos huecos que
sufren variaciones de volumen,
las clulas mas superficiales
son mas redondeadas que
planas (plano estratificado)

Contrado las capas bsales
cbica se vuelven cilndricas.

Dilatado se distinguen dos
capas recubiertas de celulas
cbicas bajas.



UROTELIO
EPITELIO TRANSICION

VEJIGA
Epitelio de transicin

PLANO
ESTRATIFICADO NO
QUERATINIZADO
VAGINA
EPITELIO PLANO ESTRATIFICADO
QUERATINIZADO .PIEL

Las clulas superficiales sufren
metamorfosis y se transforman en
queratina firmemente adherida a las
clulas vivas
FUNCIONES DE LA QUERATINA
Impermeable al agua
Impide que el cuerpo se embeba en
agua al tomar un bao
Relativamente impermeable a las
bacterias de la lnea de defensa contra la
infeccin.
Protege de lesiones de desgaste

ESTRATOS DE LA EPIDERMIS
Capa basal o germinativo
Estrato espinoso
Estrato granuloso (Granulos de queratohialina)
Estrato lcido
Estrato corneo ( queratina)
Tarea
Elabore una tabla con los distintos
epitelios y su posicin en el organismo.