alimentos. Los cazadores- recolectores se desplazaban buscando alimento y mejores refugios, pero la verdadera necesidad comenz durante el neoltico. A partir de sta poca, el aumento de la poblacin oblig a utilizar la ganadera y la agricultura como sostn de las sociedades, con lo que haba que almacenar grandes cantidades de alimentos para los tiempos de escasez Los excedentes de las buenas cosechas se intercambiaban con otros productos de los pueblos lejanos. El secado, ahumado, curado y salado: han sido procesos de conservacin muy comunes desde tiempos muy remotos
DEFINICIONES Y CONCEPTOS Esterilizacin: eliminacin de toda forma de vida, includas las esporas. Asepsia: tcnicas empleadas para impedir el acceso de microorganismos al campo de trabajo. Higienizacin: Agente que reduce la poblacin bacteriana hasta niveles seguros para las exigencias de la salud pblica. Condicin sanitaria, limpieza. Se aplica a objetos inanimados y matan el 99% de los microbios en crecimiento. Tambien se le da el nombre de Sanitizacin Antimicrobiano: agente que mata o inhibe el crecimiento de los microorganismos (antibacteriano, antifngico, etc.). Microbicida (Germicida): agente que mata formas vegetativas, pero no necesariamente las esporas de un microorganismo (bactericida, fungicida, alguicida, etc.). Microbiosttico: agente que inhibe el crecimiento de microorganismos (bacteriosttico, fungisttico, etc.). Desinfeccin: es el proceso de destruccin de los agentes infecciosos. Desinfectante: Sustancias qumicas que matan las formas vegetativas y no necesariamente las formas de resistencia de los microorganismos patgenos. Se refiere a sustancias empleadas sobre objetos inanimados. Antisepsia: Operaciones o tcnicas encaminadas a crear un ambiente que impida el desarrollo de los microorganismos e incluso pueda matarlos. Antispticos: Sustancias qumicas que previenen el crecimiento o accin de los microorganismos ya sea destruyndolos o inhibiendo su crecimiento y actividad. Se refiere a sustancias que se aplican sobre el cuerpo Antibiosis: fenmeno biolgico que detiene o destruye el crecimiento microbiano debido a sustancias producidas por otro ser vivo. Antibiticos: sustancias producidas por un ser vivo que se oponen a la vida de otro ser vivo. Tratamientos trmicos I ntroduccin El uso de los diversos tratamientos trmicos, junto con otras tecnologas, facilita la existencia de productos sanos de larga vida comercial. El calor inactiva o destruye a los patgenos. Una mala aplicacin puede provocar efectos contrarios a los deseados. Referencias Cdigo Internacional Recomendado de Prcticas de Higiene para Alimentos de Baja Acidez y Alimentos Acidificados Envasados - Cac/Rcp 23-1979 (Codex- FAO/OMS) .
Alimentos de Baja Acidez Procesados Trmicamente y Empacados en Envases Sellados Hermticamente 21 Cfr- parte 113 (FDA-USA) .
Cdigo de Prcticas de Higiene para la Elaboracin de Esprragos en Conservas. R.M.N 536-97-SA/DM Digesa- Per Referencias Norma Sanitaria Aplicable a la Fabricacin de Alimentos Envasados de Baja Acidez y Acidificados destinados al Consumo Humano. NTS N069-MINSA/DIGESA-V.01.
Gua para la Exportacin de Alimentos Envasados de Baja Acidez y Acidificados a Estados Unidos (LACF/AF)
Microorganismos Todos los alimentos crudos contienen microorganismos que pueden causar su deterioro necesidad de conservarlos. Necesidad de identificar a dichos microorganismos y los factores que influyen en su desarrollo (fuente de alimentacin, bioproductos resultantes, T, pH, etc.)
Principales razones para controlar los microorganismos: Prevenir la transmisin de enfermedades Evitar el deterioro de los alimentos y otros materiales Evitar la contaminacin en procesos industriales que requieran cultivos puros, en laboratorios de diagnstico o investigacin. Impedir la presencia de lama bacterial en las fbricas ( de papel y de azcar). Impedir la incidencia de enfermedades en las cosechas agrcolas causadas por patgenos. Erradicar microorganismos de un hospedador que est infectado
Clostridium botulinum La bacteria ms preocupante para productores de alimentos envasados Su crecimiento produce toxina capaz de generar dao neuroparalizante en el ser humano, e incluso provocar la muerte. Puede ser ubicada y aislada a partir del suelo o agua, prcticamente en cualquier lugar del mundo.
La enfermedad humana est vinculada principalmente a los tipos I y II y a la toxina A. La toxina es ingerida por el hombre junto con los alimentos y absorbida por el duodeno. Si esto ocurre, se produce una parlisis flcida que puede provocar la muerte por parlisis respiratoria.
Clostridium botulinum Temperatura La utilizacin y el control de la temperatura es uno de los factores bsicos para conservar los alimentos, pues afecta la viabilidad y los factores microbianos.
Temperatura Las temperaturas pueden afectar a todas las etapas del crecimiento bacteriano: fase de latencia, velocidad de crecimiento, numero final de clulas. En lneas generales, es posible afirmar que el efecto de la temperatura depender de varios aspectos: las clases de microorganismos, los tipos de alimentos, los tiempos de almacenamiento.
La accin de altas temperatura La destruccin de los microorganismos por efecto del calor (temperatura superior a aquellas a las que crecen los microorganismos) se debe a al coagulacin de las protenas y a la in activacin de las enzimas necesarias para su normal metabolismo, lo que provoca su muerte o lesiones sub letales. LA ACCI ON DE LAS TEMPERATURAS ALTAS Por tanto, las temperaturas altas aplicadas en los alimentos actan as: - Impiden la multiplicacin de los microorganismos. - Causan la muerte de las formas vegetativas de estos. - Destruyen las esporas. LA ACCI ON DE LAS TEMPERATURAS ALTAS La termo resistencia depende de varios factores: Relacin tiempo temperatura. El tiempo necesario para destruir clulas o esporas, bajo ciertas condiciones, disminuye al aumentar la temperatura. Concentracin inicial de microorganismos o formas vegetativas. Cuantos ms microorganismos haya, mayor ser el tratamiento trmico que se precise. LA ACCI ON DE LAS TEMPERATURAS ALTAS Medio de Cultivo. La accin, el tipo y la cantidad de los nutrientes varan en funcin de los microorganismos, de manera que, cuanto mas favorable sea el medio para el crecimiento, mas resistentes sern. Temperatura de Incubacin. La mxima resistencia de una bacteria a su destruccin coincide con su temperatura ptima de crecimiento.
Penetracin del Calor Porqu?
Determinaciones de penetracin de calor son requeridas para asegurar que el punto frio en el material (alimento) alcanza una temperatura apropiada por un tiempo adecuado Penetracin del Calor Porqu? El objetivo del estudio de penetracin de calor es determinar la posicin del punto fro en el material (alimento)y alcanzar el proceso deseado temperatura/tiempo Mtodos de transferencia de calor Calor por Conductividad la energa molecular es trasmitida por contacto directo Calor por Conveccin el movimiento de grupos de molculas en un fluido (natural o artificial) Calor por Radiacin onda electromagntica transfiere calor de un cuerpo a otro Calor por conductividad La energa es directamente trasmitida por molculas adyacentes. En alimentos o materiales slidos o semislidos donde flujo es no significativo. Proceso Lento que depende en la conductividad del material.
Calor por conveccin Transferencia de calor por el movimiento de grupos de molculas desde una ubicacin a otra Lquidos o gases que pueden fluir Proceso Rapido que brinda transferencia de calor eficiente Factores que influyen: Tamao, forma, composicin del envase Fuente (ubicacin) del calor Viscosidad Espacio de cabeza Ubicacin del punto de fro Cmara de calentamiento Cmara de calentamiento Transferencia de calor a un material (alimento) en una cmara puede ser calculado. Sin embargo, como existe diferentes variables se prefiere el mtodo emprico para caracterizar el calentamiento de un material Distribucin de calor El ensayo de distribucin de calor es el procedimiento diseado para determinar experimentalmente el comportamiento y operacin de un autoclave especfico durante el calentamiento, mantenimiento y enfriamiento, con el objetivo de verificar que el proceso trmico programado, temperatura y transferencia de calor, sea uniforme para todos los envases, cualquiera sea su ubicacin e identificar la zona ms fra del autoclave Penetracin del calor Es el procedimiento diseado para determinar experimentalmente el comportamiento del calentamiento y enfriamiento del producto/envase (formato especfico) en el punto de calentamiento ms lento y en un autoclave especfico con el objetivo de establecer tratamientos trmicos programados seguros Penetracin del calor Temperatura de cmara (autoclave) :A ms alta diferencia de temperatura entre el material (alimento) y el medio de calentamiento causa una penetracin de calor mas rpida Forma del envase Envases altos promueven corrientes de conveccin en alimentos de calentamiento por conveccin Tipo del envase Penetracin de calor es mas rpido a travs de metal que a travs de vidrio o plstico debido a la conductividad trmica Penetracin del calor La velocidad de penetracin de calor es medida colocando una sonda en el centro trmico del envase (el punto de calentamiento mas lento o punto critico) . En envases cilndricos, el centro trmico es el centro geomtrico para alimentos de calentamiento por conduccin Escaldado El escaldado es un tratamiento trmico suave que consiste en someter al producto, durante un tiempo ms o menos largo, a una temperatura inferior a 100c. Se utiliza en la conservacin de las hortalizas para fijar su color o para disminuir su volumen y, antes de su congelacin, con el fin de destruir enzimas que puedan deteriorarlas durante su conservacin. No obstante, se puede recurrir al escaldado en procesos de otros alimentos, como el desengrasado del atn antes de enlatarlo o el pre cocinado de los crustceos, para facilitar la eliminacin del caparazn
ESCALDADO Esta tcnica destruye las formas bacterianas vegetativas, as como los mohos y las levaduras. Puesto que, como los efectos letales del calor son acumulativos, el escaldado elimina los grmenes sensibles al calor y sensibiliza a los termos resistentes; este proceso puede incrementar la eficacia de un posterior tratamiento trmico PASTEURI ZACI ON Procedimiento Trmico, realizado a temperaturas inferiores a 100C, destruye parte de los microorganismos Un tratamiento pasteurizante esta recomendado en los siguientes casos: - Cuando un tratamiento trmico ms elevado dae el producto, por ejemplo, la leche. PASTEURI ZACI ON - Si se pretende eliminar los patgenos de un alimento; es el caso de la leche pasteurizada para hacer queso. - Cuando los principales microorganismos que alteran el producto no sean muy termo resistente; es lo que ocurre con las levaduras en los jugos de frutas PASTEURI ZACI ON Los tiempos y las temperaturas de tratamiento varan segn el producto y la tcnica de pasterizacin. Existe un mtodo de temperatura alta y tiempo corto(HTST) , en el que la temperatura es de 71,7C y el tiempo, al menos , de quince segundos ; y otro mtodo de temperatura baja y tiempo larga (LTH) :son 62,8c durante treinta minutos , de aplicacin en la leche, pudiendo existir otros sistemas para otros derivados lcteos PASTEURI ZACI ON El objeto de este tratamiento es no alterar de forma profunda los caracteres organolpticos de los alimentos, sino la destruccin de los microorganismos patgenos. PASTEURI ZACI ON Pasteurizacin tradicional: 63 a 65C por 30 min Pasteurizacin Flash: el lquido se calienta a 72 o C por 15 seg y rpidamente se enfra. Puede ser adaptada a flujos continuos. Ultrapasteurizacin: 150 o C por 1-3 seg Tindalizacin o pasteurizacin fraccionada: Calentamiento del material de 80 a 100 C hasta 1 hora durante 3 das con sucesivos perodos de incubacin. Se utiliza cuando las sustancias qumicas no pueden calentarse por encima de 100 C sin que resulten daadas. Las esporas resistentes germinarn durante los perodos de incubacin y en la siguiente exposicin al calor las clulas vegetativas son destruidas. ESTERI LI ZACI N La esterilizacin es un procedimiento mas drstico; en ella , las temperaturas son superiores a 100C (115C a 127C) . Para alcanzarlas, se autoclaves con vapor a presin o esterilizadores Para que el procedimiento sea lo mas efectivo posible, se lleva a cabo en autoclaves con agitacin continua o discontinua. ESTERI LI ZACI N Este sistema de conseguir elevadas temperaturas en poco tiempo cada vez mas utilizado; se llama uperizacin o procedimiento UHT ( ultra-haute temperature) se trata de elevar la temperatura a 150C , por inyeccin de vapor saturado, durante uno o dos segundos ; as se mata a bacterias y esporas ; luego , se pasa a un proceso de enfriamiento a temperaturas cercanas a 4C. A.- Esterilizacin por calor hmedo: Autoclave Tindalizacin Pasteurizacin Herbir B.- Esterilizacin por calor seco: Horno Incineracin Altas Temperaturas La alta temperatura combinada con un alto grado de humedad es uno de los mtodos ms efectivos para destruir microorganismos. El calor hmedo mata los microorganismos porque coagula sus protenas siendo ms rpido y efectivo que el calor seco que los destruye al oxidar sus constituyentes qumicos. Hay que distinguir entre calor hmedo y calor seco: La accin letal del calor es una relacin de temperatura y tiempo afectada por muchas condiciones. Las esporas de Clostridium botulinum son destruidas: En 4 a 20 minutos a 120 C en calor hmedo En 2 horas de exposicin al calor seco. Bacteriosttico Bactericida Bacterioltico Esterilizacin por calor hmedo El calor en forma de vapor a saturacin y a presin proporciona temperaturas superiores a las que se obtienen por ebullicin. Autoclave: El aparato utilizado se llama autoclave (una olla que regula la presin interna y el tiempo). Los autoclaves de laboratorio : Presin de vapor de una atmsfera por encima de la presin atmosfrica lo cual corresponde a una temperatura de 120C.
El tiempo de exposicin depende del volumen del lquido, de tal manera que para volmenes pequeos (hasta unos 3 litros) se utilizan 20 minutos a 120 C; si los volmenes son mayores debe alargarse el tiempo de tratamiento.
Usualmente 15 minutos a 121C No se deben esterilizar en el autoclave: Sustancias que no se mezclan con el agua porque no pueden ser alcanzadas por el vapor sobreviviendo los microorganismos que contengan. Sustancias que se alteran o son destruidas por tratamientos prolongados de calor.
La esterilizacin comienza cuando se ha alcanzado la temperatura ptima en el interior del aparato (autoclave o estufa) Segn el contenido, un autoclave puede requerir tiempos ms largos para alcanzar la temperatura de esterilizacin. Esterilizacin casera de frascos en olla a presin: Se llena de agua la olla hasta 1/3 del alto de lo que se vaya a esterilizar Se colocan los frascos bien lavados se tapa la olla y se deja a fuego vivo Cuando pita se saca el aire para que quede slo vapor de agua. Se deja volver a pitar y se baja el calor a bajo Se dejan cuentan de este momento en adelante 15 minutos. Se puede apagar el fuego y dejar enfriar antes de sacar el material GRACIAS POR SU ATENCIN LAS ALTERACI ONES MI CROBI ANAS Los alimentos enlatados que comercialmente se consideran estriles ( no se deterioran despus de ser tratados por el calor y no contienen patgenos viables) pueden sufrir alteraciones microbianas debido, principalmente, a dos fenmenos : defecto en la esterilizacin y contaminacin tras esta. LAS ALTERACI ONES MI CROBI ANAS El defecto de la esterilizacin puede tener su origen en una insuficiente aplicacin de temperatura, en una carga microbiana inicial anormalmente elevada, algunos ingredientes que estn muy contaminados, en una defectuosa manipulacin del autoclave o del esterilizador, o en una mala regulacin de los instrumentos de control. Si la alteracin se debe a una contaminacin la causa ser un cierre incorrecto o golpes, que hayan daado el recipiente. LAS ALTERACI ONES MI CROBI ANAS Las bacterias implicadas pueden ser aerbicas, anaerbicas, en cuanto a los requerimientos de oxigeno. Respecto a la temperatura de crecimiento, los microorganismos son mesfilos o termo filos
MUERTE DE LAS POBLACIONES MICROBIANAS Y CURVAS DE SUPERVIVENCIA Criterio de muerte de un microorganismo: prdida irreversible de la capacidad de reproduccin en un medio adecuado. Tambin implica destruccin de la clula Proliferacin: desarrollo y crecimiento de los microorganismos y por lo tanto, incremento de su poblacin Supervivencia: no hay ni muerte ni proliferacin, permaneciendo los microorganismos inactivos o inhibidos. Caso terico de desinfeccin Tiempo Supervivientes Muertes por unidad de tiempo Total muertes Porcentaje total de muertes 1. 1.000.000 0 0 0 2. 100.000 900.000 900.000 90,0000% 3. 10.000 90.000 990.000 99,0000% 4. 1000 9.000 999.000 99,9000% 5. 100 900 999.900 99,9900% 6. 10 90 999.990 99,9990% 7. 1 9 999.999 99,9999% Cuando una poblacin microbiana se expone a un agente letal, la cintica de la muerte es casi siempre exponencial ya que el nmero de supervivientes disminuye de forma geomtrica con el tiempo. S o b r e v i v i e n t e s
p o r
u n i d a d
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v o l u m e n
100% L o g a r i t m o
d e
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v o l u m e n
Tiempo (horas) Factores que afectan el control de los microorganismos El nmero de microorganismos El tiempo de exposicin. La concentracin del agente de control Condiciones ambientales locales El tipo de microorganismos La temperatura El estado fsico de el microorganismo El nmero de microorganismos
A mayor nmero de microorganismos y/o resistencia de la poblacin se necesitar mayor tiempo de esterilizacin.
Para determinar el nmero de sobrevivientes es necesario conocer el tamao inicial de la poblacin.
Para establecer los procedimientos de control hay que considerar dos factores: la tasa de mortalidad y el tamao de la poblacin inicial Disminucin progresiva en el nmero de microorganismos sobrevivientes en funcin del tiempo de exposicin al agente El tiempo de exposicin. D: tiempo requerido para reducir la poblacin microbiana un 90% Efecto de la concentracin del agente de control Tiempo (minutos) Efecto de diferentes concentraciones de fenol sobre una poblacin de E.coli Condiciones Ambientales El calor es ms eficaz en un medio cido que en uno alcalino. La consistencia del material, acuoso o viscoso, influye marcadamente en la penetracin del agente. Las concentraciones altas de carbohidratos aumentan, por lo general, la resistencia trmica de los organismos. La presencia de materia orgnica extraa reduce notablemente la eficacia de los agentes antimicrobianos : No permite que el agente llegue al microorganismos Se combina con el desinfectante y lo precipita Se combina con el desinfectante y lo inactiva dejando libres concentraciones tan bajas que no logran el efecto deseado sobre la poblacin microbiana Desinfeccin por UV http://www.cepis.ops-oms.org/eswww/fulltext/aguabas/ultravio/ultravio.html La naturaleza del microorganismo Tipo de microorganismo: las clulas vegetativas en desarrollo son mucho ms susceptibles que las esporas. Estado fisiolgico de las clulas: las clulas jvenes son ms vulnerables que las viejas.
Tiempo La temperatura
Efecto de la temperatura en el control de E.coli con fenol a una concentracin de 4,62 g/l El estado fsico de el microorganismo Agente esterilizante Escherichia coli Esporas bacterianas Esporas fngicas Virus y bacterifagos Calor hmedo 1 3.000.000 2-10 1 - 5 Calor seco 1 1.000 2 - 10 5 Fenol 1 100.000.000 1 - 2 30 Formaldehdo 1 250 - 2 Radiacin ultravioleta 1 2 - 5 5 - 100 5-10 Orahn, Bacteriol.Rev.,9, 1 , 1945 Modo de accin de los agentes microbianos: Alteran la permeabilidad de la membrana Daan las protenas y los cidos nucleicos
Para determinar la eficacia antimicrobiana (la muerte de los microorganismos) se utilizan tcnicas que descubran a los sobrevivientes es decir, a los capaces de reproducirse; ya que los incapaces de reproducirse estn muertos. Se utilizan mtodos cuantitativos de siembra en placa en los que los supervivientes se detectan porque forman colonias. FACTORES FISICOS DE CONTROL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO Pasteurizacin: Es un proceso que reduce la poblacin microbiana de un lquido. La leche, nata y ciertas bebidas alcohlicas (cerveza y vino), los jugos, se someten a tratamientos de calor controlado que slo matan a ciertos tipos de microorganismos pero no a todos. La leche pasteurizada no es estril.
La temperatura seleccionada para la pasteurizacin se basa en el tiempo trmico mortal de microorganismos patgenos
Es el tiempo ms corto necesario para matar una suspensin de bacterias a una temperatura determinada. Mycobacterium tuberculosis es el patgeno ms resistentes al calor que puede transmitirse por la leche cruda y se destruye en 15 minutos a 60 C. Coxiella burnetti, agente causal de la fiebre Q, se encuentra a veces en la leche, es ms resistente al calor que Mycobacterium tuberculosis por lo que la pasteurizacin de la leche se realiza: A 62,8 C durante 30 minutos A 71,7 C durante 15 segundos Pasteurizacin tradicional: 63 a 65C por 30 min Pasteurizacin Flash: el lquido se calienta a 72 o C por 15 seg y rpidamente se enfra. Puede ser adaptada a flujos continuos. Ultrapasteurizacin: 150 o C por 1- 3 seg Tindalizacin o pasteurizacin fraccionada: Calentamiento del material de 80 a 100 C hasta 1 hora durante 3 das con sucesivos perodos de incubacin. Se utiliza cuando las sustancias qumicas no pueden calentarse por encima de 100 C sin que resulten daadas. Las esporas resistentes germinarn durante los perodos de incubacin y en la siguiente exposicin al calor las clulas vegetativas son destruidas. Esterilizacin por calor seco: Horno : La esterilizacin seca se logra a 160-170 C por 2-3 hrs. El calor seco se utiliza principalmente para esterilizar material de vidrio y otros materiales slidos estables al calor. Para el material de vidrio de laboratorio se consideran suficientes dos horas de exposicin a 160 C. Incineracin: La destruccin de los microorganismos por combustin o cremacin. En los laboratorios, las asas de siembra se calientan a la llama de mecheros Bunsen. La incineracin tambin se utiliza en la eliminacin de residuos hospitalarios. Bajas Temperaturas En general, el metabolismo de las bacterias se inhibe a temperaturas por debajo de 0 C. No matan a los microorganismos sino que pueden conservarlos durante largos perodos de tiempo. Circunstancia aprovechada por los microbilogos para conservar los microorganismos indefinidamente. Los cultivos de microorganismos se conservan congelados a -70 C o incluso mejor en tanques de nitrgeno lquido a -196 C.
Para evitar el crecimiento de los microorganismos patgenos y alterantes en la carne: 1. Controlar que las carnes se expidan a la temperatura mximo adecuada: +7 para las canales y los cuartos, +3 para las vsceras, - 12 para las carnes congeladas, -18 para las ultracongeladas, +4 para la carne de aves y de conejo. 2. Controlar que el mantenimiento de la cadena del fro Controlar las condiciones en que se hace la descongelacin de la carne. 3.- Radiaciones A.- Radiaciones ionizantes Rayos gamma Rayos catdicos B.- Radiaciones no ionizantes Luz ultravioleta Radiaciones ionizantes Rayos gamma Las radiaciones gamma tienen mucha energa y son emitidas por ciertos istopos radiactivos como es el Co60. Son difciles de controlar porque este istopo emite constantemente los rayos en todas direcciones. Estos rayos pueden penetrar materiales, por lo que un producto se puede empaquetar primero y despus esterilizar. Rayos catdicos Radiacin con haz de electrones Se usan para esterilizar material quirrgico, medicamentos y otros materiales. Ventaja: el material se puede esterilizar despus de empacado (ya que stas radiaciones penetran las envolturas) y a la temperatura ambiente. Radiaciones no ionizantes Luz ultravioleta: Radiaciones con longitudes de onda alrededor de 265 nm son las que tienen mayor eficacia como bactericidas (200 - 295 nm). La luz UV tiene poca capacidad para penetrar la materia por lo que slo los microorganismos que se encuentran en la superficie de los objetos que se exponen directamente a la accin de la luz UV son susceptibles de ser destrudos. Se usan para reducir la poblacin microbiana en: Quirfanos Cuartos de llenado aspticos en la industria farmacutica Superficies contaminadas en la industria de alimentos y leche. Bodegas de carne refrigeradas Ondas ultrasnicas (sonicacin) En general, los microorganismos suspendidos en un lquido y sometidos a la accin de ondas ultrasnicas de altas intensidades (20,000 ciclos/seg.) durante cierto tiempo se destruyen porque se rompe la pared celular y se pierde el contenido de la clula. Se usan en tratamiento de pequeos volmenes de agua Filtracin Membranas con poros de un tamao determinado o materiales filtrantes. El tamao del poro depender del uso al que se va a someter la muestra. Los microorganismos quedan retenidos en parte por el pequeo tamao de los poros del filtro y en parte por adsorcin a las paredes del poro durante su paso a travs del filtro debido a la carga elctrica del filtro y de los microorganismos. Debido al pequeo tamao de los virus, nunca es posible tener certeza de que, por los mtodos de filtracin que dejan libre de bacterias una solucin, se van a eliminar tambin los virus.
Son difciles de utilizar en lquidos con muchos slidos suspendido Segn el tamao del poro se puede lograr esterilidad o reduccin de los microorganismos En las plantas de tratamiento de agua se logra remover hasta el 90-99% de los microorganismos filtrando el agua previamente floculada y sedimentada La filtracin se utiliza para Emulsiones oleosas, aceites, algunos tipos de pomadas. soluciones termolbileS: lquidos biolgicos (suero de animales, soluciones de enzimas, algunas vitaminas y antibiticos). Esterilizar soluciones oftlmicas, soluciones intravenosas, drogas diagnsticas, radiofrmacos, medios para cultivos celulares, y soluciones de antibiticos y vitaminas. Existen tres tipos bsicos de filtros: Filtros profundos o Filtros de profundidad: consisten de un material fibroso o granular prensado, plegado, activado, o pegado dentro de los canales de flujo. En este tipo de filtros la retencin de las partculas se produce por una combinacin de absorcin y de retencin mecnica en la matriz.
Filtros HEPA Un filtro HEPA (High Efficiency Particulate Air) Est compuesto por pliegues de acetato de celulosa que retienen las partculas (includos los microorganismos) del aire que sale de una campana de flujo laminar.
Membranas filtrantes: tienen una estructura continua, y la retencin se debe principalmente al tamao de la partcula. Los filtros de membranas son discos de steres de celulosa con poros tan pequeos que previenen el paso de los microorganismos Partculas ms pequeas al tamao del poro quedan retenidas en la matriz del filtro debido a efectos electrostticos. Estos filtros son desechables. Los filtros de membrana se utilizan en: La esterilizacin de lquidos En el anlisis microbiolgico de aguas ya que concentran los microorganismos existentes en grandes volmenes de agua.
Filtros de membrana de nitrocelulosa Electron micrograph Schleicher and Schuell
Millipore PVDF membrane. Electron micrograph
Filtro de microfibras de vidrio. Electron micrograph Whatman Filtros de huella de nucleacin (Nucleoporo): son pelculas muy delgadas de policarbonato que son perforadas por un tratamiento conjunto con radiacin y sustancias qumicas. Son filtros con orificios muy regulares que atraviesan la membrana verticalmente. Funcionan como tamices, evitando el paso de toda partcula con un tamao mayor al del poro. Desecacin La desecacin de las clulas vegetativas microbianas paraliza su actividad metablica. Este proceso se utilizaba ampliamente antes del desarrollo de la refrigeracin. El tiempo de supervivencia de los microorganismos despus de desecados depende de muchos factores, entre ellos la especie microbiana. En general, los cocos Gram (-) son ms susceptibles a la desecacin que los cocos Gram (+). Las endoesporas bacterianas son muy resistentes a la desecacin pudiendo permanecer viables indefinidamente.
Presin osmtica La pared celular de las bacterias las protege de cambios en la presin osmtica del medio. Pero si la presin osmtica externa es alta el organismo puede morir. Altas concentraciones de sal interrumpen los procesos de transporte a travs de la membrana y desnaturalizan las protenas.