UNIVERSIDADE DOS AÇORES

DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS

NEUROFISIOLOGIA
TRANSPORTE ATRAVÉS DA MEMBRANA

Fernando Pires
TRANSPORTE ATRAVÉS DA MEMBRANA PLASMÁTICA

Membrana plasmática:

1- Separa o meio exterior do interior

2- Célula pode regular a sua composição interna com

independência
 COMPARTIMENTOS DOS FLUIDOS

Compartimentos:

1- Intracelular

2- Extracelular:

a- Intersticial

b- Plasma

O compartimento intersticial e o plasmático formam o

compartimento extracelular
 ESPAÇO INTERSTICIAL,
EXTRACELULAR E VASCULAR
COMPARTIMENTOS DOS FLUIDOS

Capilar

Citoplasma Extracelular
(Intracelular)

Plasma
Fluido intersticial
Fluido intersticial
 COMPARTIMENTOS DOS FLUIDOS

Separados por membranas semi-permeáveis:

- Parede dos capilares

- Membrana celular
 COMPARTIMENTO INTRACELULAR

 Mais estável

 Sem grandes alterações volumétricas

 Sem grandes variações compartimentais

Intracelular: Inclui a totalidade da água e

electrólitos dentro das células
 COMPARTIMENTO EXTRACELULAR

 Mais instável

 Mais dinâmico

 Fluido intersticial: 80%

 Plasma: 20%
 FLUIDO EXRACELULAR

Pode ser dividido em:

a- Fluido transcelular

b- Fluido intersticial

c- Plasma sanguíneo
 FLUIDO TRANSCELULAR

Separa-se do plasma por outro epitélio para além do endotélio

dos vasos:

 1- Fluido cerebrospinal
 2- Humores aquosos e vítreos
 3- Fluidos serosos das cavidades potenciais
 4- Fluidos sinoviais
 5- Secreções do tracto digestivo
 6- Urina no tracto uro-genital
CONSTITUINTES DOS FLUIDOS ORGÂNICOS
 COMPOSIÇÃO DOS FLUIDOS ORGÂNICOS

Constituintes Plasma Intersticial Intracelular

mOsm/l (extracel.) (extracel.)
Sódio 144 137 10
Potássio 5 4.7 141
Cálcio 2.5 2.4 0
Magnésio 1.5 1.4 31
Cloro 107 112.7 4
Bicarbonato 27 28.3 10
Fosfato 2 2 11
Sulfato .5 .5 1
 COMPOSIÇÃO DOS FLUIDOS ORGÂNICOS

Constituintes Plasma Intersticial Intracelular

mOsm/l
Fosfocreatinina - - 45
Carnosina - - 14
Aminoácidos 2 2 8
Creatinina .2 .2 9
Lactato 1.2 1.2 1.5
ATP - - 5
Hexose fosfato - - 3.7
Glucose 5.6 5.6 -
Proteínas 1.2 .2 4
Ureia 4 4 4
 COMPOSIÇÃO DOS FLUIDOS ORGÂNICOS

As grandes partículas representam:

- 60% da massa dos constituintes intersticiais

- 90% do plasma

- 97% do fluido intracelular

 COMPOSIÇÃO DO FLUIDO INTRACELULAR

 Grandes quantidades (k+, PO43-)

 Quantidades moderadas (Mg2+, SO42-)

 Pequenas quantidades (Na+, Cl-)

 4 x + proteínas do que o plasma (enzimas e proteínas estruturais)

 Moléculas orgânicas de pequena dimensão (metabolismo e

transmissão de sinal: AA, ATP, ácidos gordos)
 Quase sempre sem Ca2+
 COMPOSIÇÃO DOS FLUIDOS ORGÂNICOS

 O espaço estracelular (intersticial e plasma)

contém:

 Grandes quantidades (Na+, Cl-)

 Quantidades moderadas (HCO3-)

 Pequenas quantidades (K+, Ca2+ ,Mg2+, PO43- ,

SO 42-, aniões orgânicos)
MEMBRANA PLASMÁTICA
 MEMBRANA PLASMÁTICA

- 7,5 a 10 nm
- Quase fluida
- Elástica

- Camada bilipídica com várias proteínas no seu seio

- Permeável aos iões e às moléculas neutras

COMPOSIÇÃO DA MEMBRANA PLASMÁTICA

2 Camadas lipídicas

Anfipática:
- Um extremo hidrofílico
- Outro hidrofóbico

Radical fosfolipídico e o hidroxilo → polares

Cadeia hidrocarbonada → não polar

COMPOSIÇÃO DA MEMBRANA PLASMÁTICA
 COMPOSIÇÃO DA MEMBRANA PLASMÁTICA

- Proteínas……………... 55%

- Lípidos…………….… 42%

- Fosfolípidos……….… 26%
- Colesterol…………… 13%
- Outros…………….…. 3%

- Glúcidos………….…. 3%
 MEMBRANAS PURAMENTE LIPÍDICAS

Totalmente permeáveis a gases e moléculas lipossolúveis

Significativamente permeáveis à água

Totalmente impermeáveis aos:

- Iões (Na+, K+, Cl-, etc)

- Moléculas solúveis em água (hidrofílicas ou polares)

MEMBRANAS PURAMENTE LIPÍDICAS
 MEMBRANAS NATURAIS
Permeabilidade maior para moléculas hidrofílicas e iões

Elevada selectividade no transporte destas substâncias

Contém proteínas de transporte → Permeabilidade maior

Membrana plasmática (fibra muscular esquelética em repouso):

= 20 x + permeável ao K+ do que ao Na+

Explicação: Presença na membrana de proteínas específicas

denominadas canais iónicos
MEMBRANAS NATURAIS
 MOLÉCULAS NEUTRAS

O que determina a direcção na qual as moléculas e os iões se

movem através da membrana?

Gradiente de concentração

Movimento do líquido:

Da alta concentração → para a baixa concentração

 MOLÉCULAS COM CARGA ELÉCTRICA

O movimento através da membrana depende do:

- Potencial eléctrico
existente entre os 2 lados
da membrana

- Potencial de acção
 POTENCIAL DE MEMBRANA DAS CÉLULAS

Mede-se em microeléctrodos → Perfuram a célula sem a

destruir

Magnitude em repouso (dezenas de mV) varia com o tipo de

célula:

1- Cél. excitáveis (nervosas e musculares): -70 a -90 mV

2- Cél. não excitáveis → + baixo (hepatócito = -40 mV)

 POTENCIAL DE MEMBRANA DAS CÉLULAS

Negatividade do potencial da membrana (repouso):

1- Favorece a entrada de catiões

2- Opõem-se á entrada de aniões

Mesmo com gradientes de concentração elevados

 MOVIMENTO ATRAVÉS DA MEMBRANA

A direcção de deslocação dos iões e moléculas

carregadas é influenciada por:

1- Potencial de membrana

2- Carga da molécula ou ião

3- Gradiente de concentração

Colectivamente estas influências constituem o

gradiente electroquímico
PERMEABILIDADE DAS MEMBRANAS CELULARES

Às moléculas polares

Deve-se a 2 tipos de proteínas membranares de transporte:

1- Os canais iónicos

2- As proteínas transportadoras
 CANAIS IÓNICOS

- Proteínas controladoras do transporte de iões através

da membrana plasmática

- Contém poro revestido por água atravessando a

totalidade da espessura da membrana (aquaporinas)

- Passagem para o soluto de acordo com o seu gradiente

electroquímico
 CARACTERÍSTICAS DOS CANAIS IÓNICOS

- Grande capacidade de transporte:

- Cerca de 106 k+/segundo

- Selectivos para o tipo de ião que atravessa o poro

- Designam-se em função do ião: canais de Na+, canais

de K+, canais de Ca2+, etc.
CANAIS IÓNICOS
CANAIS IÓNICOS
 PROTEÍNAS TRANSPORTADORAS

 Ligam-se a substâncias específicas

- Pequenas moléculas orgânicas (glucose)

- Iões inorgânicos (K+, Na+)
 Cada transportador é específico para uma determinada
molécula

Sofrem alteração conformacional

- Ligação do soluto faz passar de um lado para o

outro da membrana
 PROTEÍNAS TRANSPORTADORAS

 Tem menor capacidade de transporte que os canais iónicos

 As mais rápidas transportam 104 mol./seg.

Em média: 102 a 103 mol./seg.

 PROTEÍNAS TRANSPORTADORAS

A capacidade de transporte de
uma célula depende do:

1º- Nº de proteínas
transportadoras

2º- Nº de moléculas transportadas/unidade de tempo

 TRANSPORTE PASSIVO

Não há custo de energia para a célula

Difusão simples através da membrana (lípidos)

Através dos poros membranários (água)

Através dos canais iónicos (sódio)

Difusão facilitada (glucose)

 TRANSPORTE PASSIVO

Quando as moléculas ou iões atravessam a membrana

plasmática a favor do seu gradiente electroquímico

Faz-se principalmente através dos canais iónicos ou

proteínas transportadoras

Designa-se por isso por:

Transporte facilitado
DIFUSÃO FACILITADA
 TRANSPORTE ACTIVO

Contra o gradiente electroquímico

Requer consumo directo ou indirecto de energia

metabólica

Envolve uma proteína transportadora cuja actividade,

muitas vezes, depende da energia metabólica
derivada da hidrólise do ATP (ex. Bomba de Na+)
TRANSPORTE ACTIVO
TRANSPORTE ACTIVO
 TRANSPORTE ACTIVO

Exemplos de transporte activo:

- Fagocitose

- Exocitose

- Endocitose
 TRANSPORTE ACTIVO SECUNDÁRIO

Transporte de uma substância (ex.: glucose) contra o seu

gradiente electroquímico através da associação desse
transporte à entrada de outra substância (ex:. Sódio) a
favor do seu gradiente electroquímico

Depende da manutenção pela bomba de sódio e de uma

concentração intracelular de sódio inferior à concentração
extracelular
TRANSPORTE ACTIVO SECUNDÁRIO
 TRANSPORTE ACTIVO

Mecanismos responsáveis pela manutenção da composição

iónica das células:

- Bomba de sódio presente em todas as células

- Troca sódio intracelular por potássio extracelular

- Contra os respectivos gradientes de concentração

 DESCOBERTA DA BOMBA DE SÓDIO

[ Na+] ↑
Eritrócitos
(intracelular)

[ K+] ↓

Sangue armazenado a baixas temperaturas:

- Após algum tempo eritrócitos ganham Na+ e perdem K+

- Situação reverte-se com incubação do sangue a 37ºC

 DESCOBERTA DA BOMBA DE SÓDIO
Eritrócitos que perderam K+ se incubados a 37ºC (solução ≈ ao
plasma) voltam a acumular K+ intracelular, mas apenas na presença
de glucose

Entrada de K+ e saída de Na+ dos eritrócitos ocorre contra o seu

gradiente de concentração

Este processo necessita de glucose

O movimento destes iões depende da actividade de uma proteína de

membrana que utiliza a energia libertada pela degradação metabólica
da glucose

Trata-se da bomba de sódio

 FUNCIONAMENTO DA BOMBA DE SÓDIO

Estudos realizados no axónio gigante da lula a partir da injecção de

Na+ radioactivo no axónio:

Mediu-se a taxa de bombeamento de Na+ radioactivo para o

exterior

Quando a taxa de ATP era bloqueada por um inibidor metabólico →

taxa de bombeamento ↓ ↓ ↓

Com injecção de ATP no axónio → taxa de bombeamento ↑↑↑

 FUNCIONAMENTO DA BOMBA DE SÓDIO

Na mesma experiência:
A remoção do K+ da solução extracelular inibia o
efluxo do Na+

Há estreita ligação entre a hidrólise do ATP, o efluxo

de sódio e o influxo de potássio

Por cada molécula de ATP hidrolisada:

- 3 iões de Na+ (exterior)

- 2 iões de K+ (interior)
FUNCIONAMENTO DA BOMBA DE SÓDIO
 IMPORTÂNCIA DA BOMBA DE SÓDIO

Baixa [Na+] → Estabiliza volume celular

Pressão osmótica depende do nº de partículas presentes na

solução

Osmolaridade no exterior da célula deve-se :

- Pequenos iões inorgânicos no fluido extracelular (Na+, K+, Ca2+)

Osmolaridade no interior da célula deve-se :

- Iões inorgânicos e ao grande nº de moléculas incapazes de atravessar
a membrana plasmática (ATP e proteínas)
 IMPORTÂNCIA DA BOMBA DE SÓDIO

●Tendência (gradiente de difusão):

[intracelular de iões] = [extracelular de iões]

●Se não fosse contrariada: (dificuldade de difusão no interior)

[intracelular de iões] > [extracelular de iões]

● A água entraria por osmose dentro das células

provocando o seu
 BOMBA DE SÓDIO

Bomba de Na+ ajuda a:

1- [intracelular de Na+] →↓↓↓

2- Osmolaridade extracelular = osmolaridade intracelular

Permitindo assim:
A manutenção dum volume celular relativamente constante
 PROTEÍNAS TRANSPORTADORAS QUE REGULAM
A CONCENTRAÇÃO INTRACELULAR DE H+

Como consequência da respiração celular

a- Células produzem ácidos metabólicos (CO2, ácido

carboxílico) que alteram [intracelular de H+]

b- Células mantém [citoplasmática de H+] ≈ 10-7 (pH = 7)

c- Este valor é ligeiramente superior ao do fluido

extracelular mas bastante inferior ao que seria de esperar
em função do gradiente electroquímico do H+
REGULAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO INTRACELULAR H+

Mecanismos que permitem manter o H+ intracelular

relativamente constante:

1- Permuta de H+ intracelulares por Na+ extracelular

2- Co-transporte de Na+ e HCO3- para o interior das células

para aumentar a concentração intracelular de bicarbonato

3- Troca de bicarbonato intracelular por cloreto extracelular

REGULAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO INTRACELULAR H+

1 2

3
 A CONCENTRAÇÃO INTRACELULAR DE CÁLCIO

É apertadamente regulada por vários mecanismos:

Fluido intracelular de mamífero contém muito pouco

cálcio livre:

a- [Ca2+ intracelular] = 10-7 M

b- [Ca2+ extracelular] = 1-2 x 10-3 M

 A CONCENTRAÇÃO INTRACELULAR DE CÁLCIO

A diferença do gradiente de [Ca2+]

através da membrana plasmática é utilizada por diversas
células para transmitir sinais para o meio intracelular

Um aumento de Ca2+ livre intracelular serve para

activar uma série de processos diferentes:
- Contracção muscular
- Iniciação da secreção

Logo, é importante que as células em repouso

mantenham baixos níveis intracelulares de cálcio!!!
 MECANISMOS PARA A MANUTENÇÃO DE
BAIXOS NÍVEIS DE CÁLCIO

1- O Ca2+ pode ser bombeado desde o interior da célula

através da membrana plasmática por uma Ca2+ - ATPase, ou
bomba de cálcio

2- O Ca2+ intracelular pode ser permutado por Na+

extracelular pela proteína permutadora Na+ - Ca2+

3- A bomba de Ca2+ é também utilizada para transportar

Ca2+ para o interior de organitos celulares (depósitos de
Ca2+)
 MECANISMOS PARA A MANUTENÇÃO DE
BAIXOS NÍVEIS DE CÁLCIO

1- Ca2+ - ATPase, ou bomba de cálcio: utiliza energia

derivada do ATP para bombear Ca2+ contra o seu gradiente

2- Proteína permutadora Na+ - Ca2+: A deslocação de Na+

para o interior da célula a favor do seu gradiente
electroquímico liberta energia que é utilizada no transporte de
Ca2+ para fora da célula (transporte activo secundário)

3- A bomba de Ca2+ é também utilizada para transportar

Ca2+ para o interior das mitocôndrias e retículo
endoplasmático
MECANISMOS PARA A MANUTENÇÃO DE
BAIXOS NÍVEIS DE CÁLCIO
A BOMBA DE CÁLCIO
 POTENCIAL DA MEMBRANA
Das células em repouso depende:
- Do gradiente de K+ através da membrana plasmática

Funcionamento da bomba de Na+:

- Provoca acumulação intracelular de K+

Uma parte destes iões K+ difundem-se para o exterior da célula

a favor do seu gradiente de concentração através dos canais de K+

Estes K+ (exterior) não são substituídos por iões Na+:

- Membrana plasmática é menos permeável a este catião
- Em repouso membrana é 10 a 100 x + permeável ao K+ que ao Na+
 POTENCIAL DA MEMBRANA

Difusão do K+ leva à acumulação de cargas negativas no lado

interior da membrana

A carga negativa dá origem a uma diferença de potencial:

- Potencial de membrana

Gradiente de [K+] → Difusão exterior

Carga negativa no interior da célula atrai esses mesmos iões

Potencial ao qual estas duas forças se anulam é

designado por potencial de equilíbrio do potássio
 ACTIVIDADE DOS CANAIS IÓNICOS

Pode ser regulada por:

1- Voltagem da membrana

2- Sinais químicos

Canal iónico activado pelo ligando:

- Canal iónico que é activado pela ligação de um

composto químico específico, o agonista ou ligando
CANAL IÓNICO ACTIVADO PELO LIGANDO
 CANAL IÓNICO ACTIVADO PELA VOLTAGEM

Canal iónico activado pela voltagem:

Abre-se em resposta à despolarização da membrana
 CANAIS IÓNICOS

Ambos os tipos encontram-se amplamente

distribuídos pelas células do organismo
apresentando um determinado tipo celular
um repertório de canais iónicos específico
da função por ele desempenhada