Stress Acts Cumulatively To Precipitate Alzheimers

Disease-Like Tau Pathology and Cognitive Deficits

Marcela Ovando Tllez
Estudiante Magster Neurociencias
Ioannis Sotiropoulos,1* Caterina Catania,1* Lucilia G. Pinto,2 Rui Silva,2 G. Elizabeth
Pollerberg,3 Akihiko Takashima,4 Nuno Sousa,2 and Osborne F. X. Almeida1
The Journal of Neuroscience, May 25, 2011
INTRODUCCIN
Enfermedad del Alzheimer Etiologa desconocida.

Eventos estresores a los largo de la vida Aumenta riesgo.
Aumento de glucocorticoides en EA

Secrecin GC deterioro cognitivo atrofia neuronal

HIPOCAMPO CORTEZA PREFRONTAL

ALZHEIMER
Prdida de memoria, dificultades de aprendizaje, funciones ejecutivas,
prdida de habilidades del lenguaje.
Acumulacin interneuronal de estructuras proticas: Pares de filamentos
helicoidales (TAU: Formacin de ovillos neurofibrilares) y depsitos
amiloideos (Placas seniles: Beta amiloides)
3 fostatos 9 fosfatos
Muchos pacientes con EA presenta hipersecrecin de glucocorticoides
Dficit cognitivo extensin de la atrofia neuronal.

Severidad de dficit cognitivo se relaciona con la hiperfosforilacin de la
protena TAU del citoesqueleto.

TAU es el principal mediador de los beta-amiloides, luego de
hiperfosforilarse por las quinasas de TAU.

Estrs, mediado por glucocorticoides, influencia en la hiperfosforilacin
de la TAU

ANTECEDENTES
La exposicin al estrs crnico glucocorticoides- a lo
largo de la vida tiene un impacto en la aparicin y
progreso de la enfermedad de Alzheimer La
hiperfosforilacin de TAU sirve para la transduccin
de los efectos negativos del estrs y los
glucocorticoides en la cognicin.

OBJETIVO
Investigar la interrelacin secuencial entre los
elementos patognicos y los mecanismos a travs de
los cuales el estrs podra precipitar un deterioro
cognitivo.

Hipersecrecin de glucocorticoides
Hiperfosforilacin de la protena TAU
Accin de los beta amiloides
MATERIALES Y MTODOS
ANIMALES:
- Ratas Wistar machos
- Edad: 14 meses
- Ubicacin: 4-5 ratas por caja
- Condiciones ambientales: 22C, 70% humedad, 12 horas de ciclos
luz/oscuridad, ad libitum de comida y agua.

Subgrupos: 6-7 ratas 1 mes expuestos a estrs.
- Inyeccin salina hipertnica 9% NaCl i.p., 1 ml/100 g del peso.
- Hacinamiento 1 hora
- Restriccin de movimiento 30 minutos
- Ubicacin en plataforma vibrante/oscilante 1 hora
BetaAmiloide (BA)
BetaAmiloide (BA)
+
Glucocorticoides (GC)
Control
ESTRS SIN ESTRS
MATERIALES Y MTODOS
1- Test de comportamiento
2- Infusin intracerebroventricular beta-amiloides / vehculo 14 das
3- Inyeccin subcutnea dexamethasone, 300 g/ml/kg BW por una
suspensin oleosa (depot) (1:10 Fortecortin, (Merck) en aceite de ssamo
(Sigma) 14 das
4- Test de comportamiento #2

*Eficacia del estrs Sacrifice

Test de comportamiento:
-Water Maze Morris
- 4 das consecutivos
- 170 cm, 31 cm, agua opaca, 22C, pistas extrnsecas.
- Plataforma negra, 12 cm , 30 cm
- Video
Reversin de tareas de aprendizaje 1 da ms tarde
- Reposicionamiento de plataforma
- 1 intento por da

Inmunohistoqumica:
-Western Blot Hipocampo - CPF
- Anticuerpos de inters (TAU-5, CP-13, PHF1, PG5) / BIOGENEX

Deteccin de TAU Detergente insoluble

Anlisis estadstico



MATERIALES Y MTODOS
RESULTADOS:
Anticuerpos TAU dependientes de fosforilacin
Quinasas totales activas
Estrs crnico y CG induce hiperfosforilacin anormal de TAU

RESULTADOS
Fosforilacin TAU / HIPOCAMPO-CPF
RESULTADOS:
GC potencia Beta amiloide Hiperfosforilacin TAU
Efectos potenciadores de los glucocorticoides Generacin
de beta amiloides.
RESULTADOS
RESULTADOS:
GC potencia Beta amiloide Hiperfosforilacin TAU
Estrs aumenta sensibilidad de GC y Beta amiloides.
Animales + stress > cambio hiperfosforilacin TAU en CPF
RESULTADOS
RESULTADOS:
Perfiles de comportamiento: Reversal learning
RESULTADOS
Flexibilidad cognitiva CPF
RESULTADOS
DISCUSIN
Ratas saludables, naturales (no transgnicas) y de edad media.

Estrs crnico y los glucocorticoides inducen una anormal hiperfosforilacin
de la TAU en HIPOCAMPO y CORTEZA PREFRONTAL EA

Glucocorticoides exgenos potenciaron la habilidad de los beta amiloides a
nivel central , para inducir la hiperfosforilacin de epitopos de TAU y
acumulacin citoplasmtica de TAU Agravado con estrs.

Estrs y glucocorticoides comprometen el hipocampo (relacionado con la
memoria de referencia) y la CPF (conductas de flexibilidad).

Niveles de corticosterona (54,7 vs 384,6) nm/ml
Medicin de masas (-12,1 vs +6,1) g
Timo (4,3 vs 7,6) mg/kg
RESULTADOS
Epitopes (pThr231 y pSer262) Estabilidad del microtbulo.

Estrs + GC Extensa hiperfosforilacin de TAU Epitopes

Estrs agrava la agregacin de TAU Ovillos Neurofrilares.

Hiperfosforilacin de TAU Mecanismo celular mediante el cual el estrs
y glucocorticoides causan la disfuncin dendrtica y sinptica.

Tau: escencial para beta amiloides Relevantes en eventos responsables
de la disfuncin cerebral causada por el estrs.

Animales con estrs crnico son ms sensibles a acciones perjudiciales de
los GC y Beta amiloides Hiperfosforilacion disfuncin en memoria.





FIN


Los hallazgos de que la protena cinasa 5 ciclindependiente (cdk5), y el activador neuronal p35
intervienen en la va mediante la cual el pptido beta amiloide provoca muerte neuronal en enfermedades
como EA ha generado gran inters en averiguar su mecanismo de accin. Cdk5 es una de las principales
cinasas que fosforilan a tau,
34
por lo que se le ha llamado cinasa de tau II (TPKII). Cdk5 se encuentra
distribuida en varios tejidos y lneas celulares, aunque su actividad primaria se ha identificado en tejido
neuronal.
Evidencias recientes indican que el complejo cdk5/ p35 participa en el crecimiento axonal normal y en la
extensin de procesos neurticos en neuronas. Adems participa en la migracin y diferenciacin
neuronal durante el desarrollo del sistema nervioso. En regiones como el sistema lmbico del cerebro
maduro puede mantener el potencial plstico neuronal. Cdk5 es importante para la regulacin fina de
eventos post raduccionales que originan cambios subcelulares en la organizacin del citoesqueleto.
Investigaciones recientes han demostrado que la gran mayora de cdk5 forma un complejo multimrico
de alto peso molecular 60, 200, 400 y 670 Kda, en donde cdk5 est asociada con p35, p25, sinapsina, tau,
CK1, bcateninas y Ncadherinas.
35,36
Estos hallazgos indican que cdk5 es una protena multifuncional
que asociada a otras protenas celulares interacta con el citoesqueleto y forma complejos supra
moleculares. Cdk5 contribuye a la fosforilacin de tau humana en los residuos S202, T205,5235yS404.
35

Hyperphosphorylation of tau disrupts its normal function in regulating axonal transport and leads to the
accumulation of neurofibrillary tangles and toxic species of soluble tau. Furthermore, degradation of
hyperphosphorylated tau by the proteasome is inhibited by the actions of A. These two proteins and
their associated signalling pathways therefore represent important therapeutic targets for AD.