Q.F.B MAESTRIA EN MICROBIOLOGIA BIOQUIMICA Y GENETICA MICROBIANA sojara7@gmail,com Gentica forense OBJETIVO GENERAL: El alumno conocer las leyes de la herencia as como sus avances en la identificacin de sus marcadores genotpicos.
I.- INTRODUCCIN La Biomolcula Gentica Clsica Leyes de Herencia Antecedentes de la clonacin Alelos y genotipos II.- APLICACIN Marcadores genticos tradicionales Proteinas celulares antgenas Protenas sricas
TEMAS Y SUBTEMAS
III.- LA EVIDENCIAS DE LA METODOLOGA DEL ADN El ADN en la Criminalistica Tipos de evidencias Caractersticas de las evidencias Anlisis preliminares
IV.- UNIVERSIDAD DE LEICISTER INGLATERRA (1985) Tcnica RFLP Genotipos
V.- USA (1987) Tcnica PCR Validacin (caso CASTRO)
VI GENTICA CONTEMPORNEA 1.- Hardy-Weinberg Las leyes de la probabilidad Teorema de Bayes
2.- Clasificacin de los marcadores genticos VNTR, STRS, AMPFLPs, ADN mitocondrial
3.- Aplicacin de la metodologa del ADN Identificacin Determinacin de paternidad
EXAMEN 30% Practicas 40% : 20% Desempeo prctico, 20% reporte de prcticas Individual (Impresas prctica . 1, 2,) correo portafolio de todas las prctica con hoja presentacin, ndice con hipervinulo a prctica y referencia a ndice. Tareas: 15% Actividades en clase 15% CRITERIOS DE EVALUACION ADN EN GENTICA FORENSE Unidad 1 Biomolcula Biomolcula?
Molcula: Orgnicas Inorgnicas
C O H N Biomolcula Inorgnicas Agua Sales Orgnicas Glcidos Lpidos Protenas cidos nucleicos 1860 Miescher
Aisl de los ncleos una sustancia cida a la que denomino:
Nuclena
Hoy se le conoce como cido Nucleico CIDOS NUCLEICOS CIDOS NUCLEICOS De acuerdo a la composicin qumica se clasifican en:
Desoxiribonucleicos (ADN) que se encuentran residiendo en el ncleo celular y algunos organelos.
y en cidos ribonucleicos (ARN) que actan en el citoplasma. Se conoce con considerable detalle la estructura y funcin de los dos tipos de cidos. CIDOS NUCLEICOS En 1953 Watson y Crick
resolvieron su estructura
molecular. Qu es el ADN dnde
se encuentra y para qu sirve?
El DNA en la clula DNA nuclear Ubicacin: Ncleo celular
y algunos organelos.
Contener : Informacin
hereditaria.
Funcin del ADN ADN Eucariota *DNA Nuclear *DNA Mitocondrial
*DNA Cloroplastos Componentes A las unidades qumicas que se unen para formar los cidos nucleicos se les denomina nucletidos. Nucletidos Formados por: Base nitrogenada Un grupo fosfato Un azcar (desoxiribosa en el caso de ADN).
Nucletido Informacin Gentica Funcin estructural Bases nitrogenadas Las bases nitrogenadas son las que contienen la informacin gentica y los azcares y los fosfatos tienen una funcin estructural
ADN Purinas: A (Adenina) y G (Guanina). Pirimidinas: T (Timina) y C (Citosina) .
Bases Nitrogenadas. Unin por enlaces Fosfodiester Los nucletidos se unen en el ADN mediante enlace fosfodiester . Unin entre bases. Dimensiones de la hlice Dimetro 20 Angstrom Longitud del paso 34 Angstrom
El tamao de la molcula de ADN se expresa en miles de bases o kb.
La longitud de 1kb es entonces 0.34 micras.
Una molcula de ADN de un 1mm = 3 mil kb o sea tres millones de bases. Organizacin Espacial: Bases: interior Azcar y fosfato: afuera Funcin. Informacin hereditaria Almacena informacin Replica (se duplica) Recombina (se combina) Transmite (se hereda) Conformacin DNA Hlice A, B y Z ADN A: Doble hlice Dextrgira (gira a la derecha) RNA hbridos Ancha y corta 11pb por vuelta 19 grados ADN B Dextrgira (gira a la derecha) Watson y Crick Comn Estable 2.4 nm 10.4pb 1 grado Presenta surco mayor - menor ADN Z: G y C Levgira (gira a la izquierda) Estrecha y larga 1.8 nm 12 pb 9 grados Aplicacin de la tecnologa del ADN Aplicaciones del Conocimiento DNA Elucidacin Cdigo Gentico
Mecanismo - Control Sntesis Protica
Transmisin Informacin Gentica. Compactacin del DNA Compuesta: ADN y protena.
Integrada por 2 tipos de protenas:
1.- Histonas
2.-Protenas cromosmicas No histonas Cromatina Funcin:
Empaquetar ordenadamente ADN
Cinco Grupos: Contenido de Arginina y Lisina.
Histonas 146 pb
8 unidades de Histonas
H2A
H2B
H3
H4
Composicin del nucleosoma Solenoide Micrografa de fibras de cromatina Fibra de 10 nm (nucleosoma) Fibra de 30 nm (nucleosoma) A) Heterocromatina: Permanece Condensada durante la Interfase.
B) Eucromatina: Forma activa de la cromatina Vuelve a su estado Disperso en la Interfase. Cromatina Compactacin del DNA Cromosomas Organismo N Cromosomas (2n) Organismo N Cromosomas (2n) Hombre, Homo sapiens 46 Roble blanco, Quercus alba 24 Chimpanc, Pan troglodytes 48 Pino , Pinus ponderosa 24 Mono rhesus, Macaca mulata 48 Cerezo, Prunus cerasus 32 Caballo, Equus caballus 64 Col , Brassica oleracea 18 Asno, Equus asinus 62 Rbano, Raphanus sativus 18 Perro, Canis familiaris 78 Guisante, Pisum sativum 14 Gato, Felis domesticus 38 Guisante, Lathyrus odoratus 14 Ratn, Mus musculus 40 Frijol, Phaseolus vulgaris 22 Segmento de DNA
Unidad de Herencia Concepto Gen Cariotipo A) Individuo normal B) Individuo con trisoma del par 21 http://www.biologia.arizona. edu/human/act/karyotyping/k aryotyping2.html REALIZA 2 EJERCICIOS DE CARIOTIPOS(DIGITAL) E IMPRIME LA PAG. Cantidad de Genoma Desnaturalizacin DNA Proceso Causas: pH Temp. A. Q. UV Renaturalizacin EL ADN en la criminalstica Observacin del ADN La Gentica Bsica La transmisin de las caractersticas de padres a hijos es la herencia.
La rama de la biologa que estudia la herencia es la gentica
Hoy en da, la gentica es una de las reas ms activas de la investigacin cientfica. Qu es la gentica? Conceptos importantes en gentica: Gen: Unidades de informacin hereditaria, son fragmentos de ADN.
Cromosomas: Son estructuras que contienen a los genes.
Alelos: Genes que determinan una caracterstica, por ejemplo color de pelo: oscuro o claro.
Locus: Alelo : Posicin de un gen dentro del genoma versin de un gen en un locus (p3) Gen dominante: Siempre se expresa ya sea en condicin homocigota o heterocigota. Se representa por letras maysculas. homocigota AA o heterocigota Aa
Gen recesivo: Es aquel que no se expresa en presencia de un gen dominante, se representa por letras minsculas. Homocigoto recesivo aa Homocigoto: Contiene genes iguales para una caracterstica (alelos). Puede ser homocigoto dominante AA recesivo aa.
Heterocigoto: Contiene alelos diferentes para una caracterstica Aa. Heterocigoto: Homocigoto: Individuo que en un gen dado en cada cromosoma posee un alelo distinto, Ej. Aa Individuo que en un gen dado en cada cromosoma posee el mismo tipo de alelo Ej. AA, aa Fenotipo: caractersticas visibles de un organismo
Genotipo: Constituido por las caractersticas genticas de un individuo.
Gregor Mendel (1822-1884)
Asisti a la Universidad de Viena, donde estudi biologa y matemticas. La gentica y Gregor Mendel Los primeros experimentos de Mendel Mejorar las plantas mediante cruces
Descubrir principios que explican cmo se heredan las caractersticas en los seres vivientes Escogi tres pares de caractersticas en contraste en las semillas, dos en las vainas y dos en los talllos. SEMILLAS EXPERIMENTACIN Mendel empez sus experimentos desarroll lneas, de plantas que eran puras para cada uno de los siete pares de caractersticas.
Al permitir que los guisantes se autopolinizaran durante varias generaciones, Mendel produjo siete pares de lneas puras. 1 Ley de la segregacin Dos homocigotos para un carcter, todos los descendientes de la primera generacin son idnticos entre si, con uno de los caracteres igual a lo padres
Dominantes:
Recesivo :
2 ley de La segregacin de los caracteres Al cruzar entre si individuos de la generacin F1 la descendencia no ser uniforme por la separacin de los caracteres, la expresin de estos caracteres es de manera aleatoria, se obtienen combinaciones distintas en una porcin 3:1 Ejercicio En el ser humano el gen para el albinismo es recesivo con respecto al gen del pigmento de la piel normal. Si se cruza un individuo albino(nn) con uno de piel normal (NN), Cul ser el resultado de esa cruza? Y si se cruza uno Nn con uno nn Cul ser el resultado de la cruza? http://www.biologia.arizona.edu/mendel/sets/mono/0 2q.html REALIZA 5 EJERCICIOS DE LA PRIMERA LEY DE MENDEL (DIGITAL) Y ANOTA LAS RESPUESTAS CORRECTAS EN LA LIBRETA.
La transmisin de mas de un carcter se realiza de manera independiente a los otros, el resultado son nuevas combinaciones que no estn en P.
Ejemplo En el ser humano el gen para la Miopa es dominante sobre el de la visin normal y el gen para nariz aguilea es dominante sobre la nariz recta. Si se cruza un organismo con miopa y nariz aguilea (MMAA), con uno de visin normal y nariz recta (mmaa) cul ser el resultado. MMAA X mmaa
F1 MmAa
F2 MmAa X MmAa GAMETOS MA, Ma, mA, ma
Herencia ligada al Sexo: Heterocromosomas Autosomas Homogamticos Heterogamticos Genes ligados al sexo
Herencia ligada al Sexo-Humanos Herencia ligada al Sexo-Humanos Herencia ligada al cromosoma Y Un gen: Y = en todos los hombres Hipertricosis en el pabelln auricular
Herencia ligada al cromosoma X Un gen: X = En las mujeres: lo expresan y transmiten ..
Ej: HEMOFILIA: Mujeres portadoras si son heterocigotos y hemoflicas si son homocigotas Hombres siempre la padecen.
Otras enfermedades ligadas al sexo: Daltonismo Ictiosis Hipertricosis Daltonismo Anomala caracterizada por la incapacidad de distinguir entre el color verde y el rojo. Esta ligado nicamente al cromosoma x Enfermedad hereditaria. El trmino daltonismo fue establecido por el fsico britnico John Dalton, quien lo padeca. Enfermedad riesgosa de padecer en una sociedad donde los colores son parte de muchos smbolos y seales pticas, como los semforos. Esta enfermedad es considerada un tipo de discromatopsia (incapacidad para ver los colores). Ya que esta enfermedad se ubica en el cromosoma x es mas probable en los hombres ya que tenemos uno x y uno y. Si ese x es portador, es seguro que sea daltnico. El daltonismo es predominante en varones con caractersticas de piel blanca y nativos de Centroeuropa. CLONACIN Klon es una palabra griega que significa retoo, rama o brote.
En el lenguaje cientfico: Conjunto de individuos que desciende de otro por va vegetativa o asexual. http://www.biologia.arizona.edu/mendel/sets/sex1/06 Q.html REALIZA LOS EJERCICIOS 6,7,8,DE HERENCIA LIGADA AL SEXO (DIGITAL) Y ANOTA LAS RESPUESTAS CORRECTAS EN LA LIBRETA. La clonacin: Accin de reproducir a un ser de manera perfecta en el aspecto fisiolgico y bioqumico de una clula A partir de una clula de un individuo se crea otro exactamente igual al anterior Los primeros experimentos de trasplante de ncleos se realizaron en anfibios 1952 Los huevos fecundados son de gran tamao (12 mm) PRIMERAS CLONACIONES 27 de febrero de 1997, Ian Wilmut y colaboradores del Instituto Roslin Nacimiento de un cordero clnico nacido a parir de clulas adultas: Dolly. CLONACIN EN MAMFEROS Primer paso: se toma una clula somtica del individuo a copiar Segundo paso: se toma un vulo no fertilizado y se descarta el ncleo Tercer paso: se combinan el citoplasma y el ncleo. ste ltimo tiene toda la herencia ADN de la madre, por ello el clon ser igual a ella. Cuarto paso: se aplica una mnima corriente elctrica para que la clula se empiece a dividir como si hubiese sido fertilizada.
PROCEDIMIENTO DE CLONACIN Quinto paso: las clulas se multiplican en un tubo de ensayo. Sexto paso: se implanta el embrin en un tero de una oveja nodriza a la que se ha hormonado previamente Sptimo paso: nace el clon.
En Agosto del 2002 nace con xito en Argentina el primer bovino clonado, de raza Jersey (Pampa).
A mediados del 2003 nacen en la Argentina doce terneras transgnicas destinadas a que expresen en su leche la protena humana hGH u hormona de crecimiento, para tratar enanismo. OTRAS CLONACIONES En el mundo hay ya ms de 300 mamferos clonados con la misma tcnica que dio lugar a Dolly.