Lis de Veracruz: Arte, Ciencia,

Luz
Experiencia Educativa Bioqumica
Clnica
MSAN Francisco Sols
Pez
El EGO consta:
Observacin directa de la muestra

Examen qumico

Examen Microscpico

Pasos bsicos para el EGO
Color y apariencia fsica

Qu apariencia tiene la orina a simple vista?

Es clara o turbia?

Plida, amarillo obscuro o de otro color?
Color de la orina y su posible significado[2] [3]
Color Muestra Causas patolgicas Causas no patolgicas
Amarillo intenso
Orina ms
concentrada, existe
bilirrubina directa o
urobilina.
Uso de tetraciclinas,
fenacetina o
nitrofuantona.
Consumo de
zanahorias.
Rojizo
Hematuria,
hemoglobinuria,
mioglobinuria, porfirinas
(porfirias) o sndrome
carcinoide.
Uso de frmacos o
colorantes como
rifampicina, antipirina,
anilinas, fenolftalena o
rojo Congo. Consumo
de remolacha.
Naranja
Pigmentos biliares,
bilirrubina, pirimidina.
Fenotiazinas, algunos
antimicrobianos
urinarios, uso de
complejo B.
Marrn
Metahemoglobinemia,
hematina cida,
mioglobina, pigmentos
biliares.
Nitrofurantona
Negro
Melanina, alcaptonuria
(cido homogentsico),
hematuria, intoxicacin
por cido fnico y sus
derivados, fiebre
hemoglobinrica del
paludismo.
Levodopa,
complejos de hierro,
fenoles.
Azul verdoso
Intoxicacin por fenol,
infeccin por especies de
Pseudomonas,
trastornos de absorcin
de triptofano
(usualmente congnitos),
metahemoglobinuria,
biliverdina.
Algunas vitaminas,
nitrofuranos, azul de
metileno.
Blanco-lechosa
Quiluria, piuria intensa,
hiperoxaluria.
Incolora o
transparente
Poliuria o diurticos.
Consumo elevado
de agua pura.
Turbia
Piuria, fosfaturias,
fecaluria.
La tira reactiva se utilizan en la
etapa fisicoqumica del uroanlisis
para determinar:

glucosa,
bilirrubina,
acetona,
densidad,
sangre,
pH,
protenas,
urobilingeno,
nitrito y
leucocitos,

o para reafirmar la sospecha de
infecciones por otros agentes
patgenos (parsitos).
pH
Las marcas comerciales miden el pH en aumentos de 0,5 a 1 unidades
entre los pH 5 y 9. Para diferenciar el pH en este amplio rango se utiliza
frecuentemente un sistema de indicador doble de rojo de metilo y azul de
bromotimol.
Protenas
La prueba de protenas en orina de las tiras reactivas se basa en el principio
de error proteico de los indicadores para producir una reaccin colorimtrica
visible. Este principio se basa en el hecho de que algunos indicadores de
pH cambian de color ante la presencia de protenas an cuando el pH del
medio permanece constante.
Indicador-H
+
(Amarillo)
+ Protena Indicador
(Verde-azul)
+ Protena-H
+

Las tiras de orina basan la deteccin de glucosa en la reaccin enzimtica
de la glucosa oxidasa. Esta enzima cataliza la oxidacin de la glucosa por el
oxgeno ambiental para formar D-glucono--lactona y perxido de hidrgeno
En una segunda reaccin acoplada, mediada por una enzima peroxidasa
cataliza la reaccin entre el perxido y un cromgeno (una sustancia que
adquiere color luego de una reaccin qumica), para formar un compuesto
coloreado que indica la concentracin de glucosa.
Glucosa

Como todos los mtodos enzimticos, la reaccin es especfica para
glucosa, pero pueden presentarse algunos falsos positivos debido a la
presencia de restos de agentes oxidantes fuertes o perxido de los
desinfectantes en el instrumental del laboratorio.
1)Catalizada por Glucosa Oxidasa
Glucosa + O
2
D-glucono--lactona + H
2
O
2

2)Catalizada por peroxidasa
H
2
O
2
+ Cromgeno Cromgeno oxidado (coloreado) + H
2
O
Cetonas
El trmino cetonas o cuerpos cetnicos representa en realidad a tres
productos intermedios en el metabolismo de los cidos grasos, la acetona,
el cido acetoactico y el cido betahidroxibutrico.
Las pruebas de tira reactiva se basan en la reaccin del nitroprusiato
(nitroferricianuro). En esta reaccin el cido acetoactico en medio alcalino
reacciona con el nitroprusiato de sodio para producir un complejo de color
magenta
[

Na
2
[Fe(CN)
5
NO] + CH
3
COCH
2
COOH + 2Na(OH) Na
4
[Fe(CN)
5
-N=CHCOCH
2
COOH]
(magenta)
+ H
2
O

Nitroprusiato + cido acetoactico + Medio bsico Complejo rosa-magenta + Agua
Hemoglobina y mioglobina
La presencia de sangre en la orina es, de todos los parmetros usualmente
testeados, el que mas se relaciona con un dao traumtico en los riones o
en la va genitourinaria
La tira reactiva para sangre se basa en la actividad pseudoperoxidasa de la
hemoglobina para catalizar una reaccin entre perxido de hidrgeno y el
cromgeno tetrametilbencidina para producir un producto oxidado de color
azul oscuro. Dependiendo de la cantidad de hemoglobina, el color puede
variar de verde a azul oscuro.
Catalizada por hemoglobina como peroxidasa
H
2
O
2
+ Cromgeno Cromgeno oxidado (coloreado) + H
2
O
Apariencia microscpica
La muestra de orina se examina bajo un microscopio.
Esto se hace para observar:

Clulas,
Cristales,
Moco y ,
Otras sustancias.

Al mismo tiempo sirve para evaluar la presencia de
bacterias, protozoarios, y huevos de helmintos
Bilirrubina
La deteccin de bilirrubina urinaria provee un indicio temprano de
hepatopata y su presencia o ausencia puede utilizarse para determinar las
causas de ictericia clnica.
La ictericia producto de la destruccin acelerada de eritrocitos no produce
bilirrubinuria, debido a que la bilirrubina se encuentra en la forma no
conjugada y los riones no pueden excretarla.

Las tiras reactivas utilizan una reaccin de diazotacin para la deteccin de
bilirrubina. La bilirrubina se combina con una sal de diazonio (2,4-
dicloroanilina o 2,6-diclorobenceno-diazonio-tetrafluoroborato) en medio
cido para producir un colorante azoico con colores que varan del rosado
al violeta:
En medio cido
Glucurnido de bilirrubina + Sal diazo Colorante azoico (violeta)
Urobilingeno
Cuando la bilirrubina conjugada se excreta por el conducto biliar hacia el
intestino, las bacterias intestinales la convierten en una mezcla de
urobilingeno y estercobilinogeno. Parte del urobilingeno se reabsorbe
desde el intestino hacia la sangre recircula al hgado y se vuelve a excretar.
Una pequea parte de este urobilingeno recirculante filtra por rin y
aparece en orina (menos de 1 mg/dl de orina). El estercobilingeno no
puede reabsorberse y permanece en el intestino
1) Reaccin en Multistix (en medio cido)
Urobilingeno + p-dimetilaminobenzaldehdo Colorante rojo
2) Reaccin en Chemstrip (en medio cido)
Urobilingeno + 4-mtoxibenceno-diazonio-tetrafluoroborato Colorante azoico rojo
Nitritos
La prueba de nitritos provee un mtodo rpido de cribado para determinar
posibles infecciones asintomticas causadas por bacterias reductoras del
nitrato. Algunas de las especies de bacterias gram negativas.
Las tiras reactivas detectan nitrito por medio de la reaccin de Greiss en la
que el nitrito reacciona en medio cido con una amina aromtica.
1) En medio cido
2) En medio cido
cido para-arsanlico o sulfanilamida + NO
2
Sal de diazonio
Sal de diazonio + tetrahidrobenzoquinolina Colorante azoico rosa
Leucocitos
La prueba de tira para leucocitos detecta esterasa leucocitaria, presente en
los grnulos azurfilos de monocitos y granulocitos.
La prueba de esterasa leucocitaria es slo indicativa, y no debe utilizarse
para sustentar un diagnstico ya que no reemplaza a la examinacin
microscpica ni al urocultivo
1) Catalizado por esterasa leucocitaria
2) En medio cido
ster de cido indolcarboxlico Indoxilo + cido
Indoxilo + Sal de diazonio Colorante azoico violeta
La prueba de tira reactiva para densidad se basa en el cambio de la
constante de disociacin (pK
a
) de un polielectrolito aninico (poli-(metil vinil
eter/anhdrido maleico)) en medio bsico que se ioniza y libera iones
hidrgeno en proporcin al nmero de cationes presentes en la solucin.

Cuanto mayor es la concentracin de cationes en la orina, mas hidrgenos
se liberan con lo que disminuye mas el pH
Densidad
1)En medio bsico
2) En medio bsico
Polielectrolito-H + Cationes
n+
Polielectrolito-Cationes + nH
+

H
+
+ Azul de bromotimol
(Azul)
Azul de bromotimol-H
+
(Amarillo

Fuentes de informacin
Libros
Pea, Arroyo, Gmez, Tapia, Bioqumica General Departamento de Biologa
Molecular Universidad Nacional Autnoma de Mxico. 6 a Edicin Editorial
Limusa S.A. de C.V. Grupo Noriega y Editores; 2011
Carl E Speicher y amit JR. W. Seleccin de pruebas de laboratorio ms
convenientes Editorial El manual Moderno Mxico, 2010
Analisis de Orina Atlas en Color;Graff S. L, Ed. Mdica ]Panamericana,
Buenos Aires Argentina, 1 Reimpresin 1987
Strasinger, Susan K.; Di Lorenzo Schaub, Marjorie (2008). (en Espaol).
Anlisis de orina y de los lquidos corporales (5 edicin). Editorial
panamericana. pp. 56-57. ISBN 978-950-06-1938-7.

Direcciones electrnicas

1. Anlisis Clnico y Bioqumica en internet.-
www.elmedico.net/anlisis.htm
2.Sociedad Espaola de Bioqumica Clnica y Patologa Molecular.-
www.seqc.es/varios.html


Servidores electrnicos
http://www.carpermor.com
http://laboratorioclinico.110mb.com/cultivoorina.htm