La Ingeniera gentica es la tecnologa del

control y transferencia de ADN de un organismo a

otro, lo que posibilita la correccin de los defectos
genticos y la creacin de nuevas cepas
(microorganismos), variedades (plantas) y razas
(animales) para una obtencin ms eficiente de
sus productos La transferencia de forma artificial
se realiza mediante la tcnica del ADN
recombinante. A sta se han ido sumando otras
tcnicas tales como el uso de las enzimas de
restriccin, el PCR, la transferencia por vectores y
otros.
Se basa en la capacidad de ciertas bacterias que contienen enzimas llamadas
Endonucleasas de restriccin que cortan el ADN por sitios especficos que reconocen,
obtenindose fragmentos de restriccin. Para que se puedan unir despus los fragmentos
de ADN extrao y el ADN que se utilizar como vector, se han de cortar ambos con la
misma enzima. Comparando dichos fragmentos, se construyen los mapas de restriccin,
los cuales se usan para comparar genomas de especies diferentes y establecer cambios
evolutivos as como para detectar mutaciones cromosmicas como delecciones e
inserciones.

FRAGMENTACIN DE ADN
Figura : Clonacin de ADN por la reaccin en cadena de la polimerasa
Mediante la tcnica de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR en ingls) se
pueden obtener grandes cantidades de ADN que permiten diferentes anlisis, a partir
de cantidades mnimas. Se basa en el proceso de replicacin del ADN, para ello se
utilizan unos oligonucletidos que se han de disear como cebadores que inician la
replicacin "in vitro". La replicacin se repite multitud de veces duplicando en cada ciclo
la cantidad de ADN obtenido.
Esta tcnica tiene mltiples utilidades:
realizar pruebas de paternidad o averiguar
la autora de un delito; diagnosticar
enfermedades hereditarias antes del
nacimiento, analizar restos de tejidos en
huesos para hacer estudios filogenticos;
realizar secuenciaciones de genomas
Esta sntesis artificial de ADN se ha de
realizar a altas temperaturas para que las
dos cadenas de ADN no se enrollen entre
s, lo cual puede realizarse gracias a una
enzima ADN polimerasa llamada TAQ,
obtenida de una bacteria termfila.
REACCIN DE CADENA DE POLIMERASA (PRC)
Los vectores ms usados son:
1.- Plsmido (fragmento extra de ADN bicatenario circular de unos 4,3 kb, que existe en
algunas especies de bacterias).
2.- Csmido (similar al plsmido pero de mayor longitud, unos 40 kb).
3.- Virus vector ( en este caso el ADN extrao que se quiere transferir se incorpora al ADN
vrico y funciona como ADN recombinante).
La transformacin de bacterias con ADN extrao se produce en muy pocas clulas (baja
eficacia) en condiciones de laboratorio. Por ello, se emplean vectores genticos que
funcionan como taxistas que transportan a un cliente el ADN recombinante.
Si la introduccin de ADN extrao se
realiza en clulas eucariotas no
reproductoras se denomina al
proceso transfeccin.
Si la introduccin se realiza en
clulas reproductoras de plantas y
animales, la alteracin gnica va a
estar presente en todas clulas del
cuerpo, en este caso se habla de
transgnesis
TRANSFORMACIN CON VECTORES
La tcnica se llama Southern blot. Se utilizan sondas de DNAc
(molculas de DNA marcadas con radioactividad y con una
secuencia conocida) para identificar qu bandas del gel
contienen secuencias complementarias a la de la sonda .
ANLISIS DE ADN
Ubicacin de algunas enfermedades genticas
conocidas en el mapa gentico humano
Este proyecto de investigacin tuvo como
objetivo averiguar la secuenciacin
completa de nucletidos de los 23 pares de
cromosomas humanos, para conocer la
composicin qumica exacta de todos los
genes (genoma) y su ubicacin en cada uno
de los cromosomas, as como toda la
informacin adicional extra no codificante y
estudiar su funcin.
En junio del ao 2001 se presenta una
primera aproximacin de la secuencia
completa, descubrindose que tenemos
muchos menos genes (unos 30.000) de los
inicialmente previstos (100.000).
Figura: Sntesis de la somatostatina en
Escherichia coli
La industria farmacutica produce
actualmente toda una gama de
sustancias que obtiene de
microorganismos como son:
sustancias antimicrobianas (sobre
todo antibiticos de diversos tipos),
vacunas, vitaminas, hormonas
peptdicas (como la insulina, la
hormona del crecimiento o
somatotropina), factores
hipotalmicos (como la
somatostatina) y enzimas.

Un polimorfismo es una variacin en la secuencia de un lugar determinado del ADN entre los individuos de una
poblacin.
Aquellos polimorfismos que afectan a la secuencia codificante o reguladora y que producen cambios importantes
en la estructura de la protena o en el mecanismo de regulacin de la expresin, pueden traducirse en diferentes
fenotipos (por ejemplo, el color de la piel).
Un polimorfismo puede consistir en la sustitucin de una simple base nitrogenada (por ejemplo, la sustitucin de
una adenina por una citosina) o puede ser ms complicado (por ejemplo, la repeticin de una secuencia
determinada de ADN, donde un porcentaje de individuos tenga un determinado nmero de copias de una
determinada secuencia.
Los cambios poco frecuentes en la secuencia de bases en el ADN no se llaman polimorfismos, sino ms bien
mutaciones. Para que verdaderamente pueda considerarse un polimorfismo, la variacin debe aparecer al menos
en el 1% de la poblacin.
POLI MORFI SMOS
Secuencias polimrficas.- Son secuencias de ADN que,
normalmente, no codifican para un producto gnico, se
distribuyen de forma ms o menos aleatoria a lo largo
del genoma y presentan como caracterstica singular el
hecho de ser polimrficas.
Existen tcnicas de Ingeniera gentica ( Diagnstico
molecular) que se valen de estudiar las secuencias
polimrficas de un genoma , como por ejemplo el
polimorfismo del tamao de los fragmentos de
restriccin (RFLP).- y el polimorfismo de repeticin.
La terapia gentica es una tcnica experimental que utiliza los genes para
tratar o prevenir enfermedades. La forma ms comn de terapia gentica
incluye la insercin de un gen normal para sustituir a uno anormal. Otros
tipos incluyen:
Intercambio de un gen anormal por uno normal
Reparacin de un gen anormal
Alteracin del grado en el que se active o se desactive un gen

TERAPIA GNICA
Las vacunas contienen un agente patgeno causante de una enfermedad infecciosa, pero o
est muerto o est atenuado (son cepas muy poco virulentas). Tambin se puede vacunar
con subunidades del patgeno, stas pueden hoy da fabricarse mediante ingeniera gentica
en gran cantidad. Las subunidades son protenas con poder antignico. As, se ha
conseguido obtener la vacuna de la hepatitis B mediante la tecnologa del ADN
recombinante. El gen de la subunidad proteica del virus de la hepatitis fue introducido en la
bacteria Escherichia coli y en la levadura Saccharomyces cerevisiae, las cuales produjeron
en cultivo la protena del virus.


En el esclarecimiento de un crimen puede ser crucial la prueba que aporte el bilogo forense al determinar la huella
gentica del criminal a partir de un resto de saliva en un cigarrillo (contiene clulas de la mucosa bucal), una mancha de
sangre (leucocitos), restos de semen (espermatozoides) o un simple pelo (clulas del folculo piloso). La tcnica que se
aplica es la del perfilado del ADN o prueba del ADN . Se basa en la presencia de regiones en el material gentico no
codificante que se denominan minisatlites , y que contienen muchas repeticiones en tndem de una pequea
secuencia de nucletidos. Para su deteccin se utilizan sondas gnicas (oligonucletidos marcados con tomos
radiactivos), de modo que cada sonda detecta un minisatlite. Estos minisatlites son de diferente longitud en cada
persona puesto que el nmero de repeticiones en tndem es variable.

Estas tcnicas tambin pueden utilizarse para realizar pruebas de paternidad y para identificar a personas
desaparecidas de las que se tengan sus huesos; esto ocurri con los restos seos de los miembros de la familia del
ltimo zar de Rusia asesinados por los bolcheviques.
Particin (fisin) de embriones tempranos:

Los individuos son muy semejantes entre s, pero diferentes a sus padres. Es preferible emplear la
expresin gemelacin artificial, y no debe considerarse como clonacin en sentido estricto. Ocurre
naturalmente en plantas e invertebrados.
Tipos de Clonacin:
Clonacin verdadera:

Transferencia de ncleos de clulas de individuos ya nacidos a vulos o zigotos enucleados. Se
originan individuos casi idnticos entre s (salvo mutaciones somticas) y muy parecidos al
donante (del que se diferencian en mutaciones somticas y en el genoma mitocondrial, que
procede del vulo receptor).

Paraclonacin:

Transferencia de ncleos procedentes de blastmeros embrionarios o de clulas fetales en
cultivo a vulos no fecundados enucleados y a veces, a zigotos enucleados. El progenitor
de los clones es el embrin o feto.

Clonacin:
El proceso por el que se consiguen copias idnticas de un organismo ya desarrollado,
de forma asexual.
Posible usos de los diversos tipos de
Clonacin
Terapias para enfermedades mitocondriales
Tejidos humanizados y Organos para
Xenotransplantes
Transgnicos (Produccin de Medicamentos)
Produccin ganadera
Salvar especies de la extincin
Clonacin reproductiva
Clonacin teraputica
Tambin llamadas Troncales, Estaminales o Stem Cells
Son Clulas capaces de:
Generar como descendencia Clulas hijas especializadas en algn tipo tisular
Autorrenovarse en el tiempo
Tipos de Clulas Madre.-
Embrionales: son aquellas que forman parte de la masa celular interna de un embrin de 4-5
das de edad. stas son pluripotentes .
Adultas: son clulas que se encuentra en tejidos u rganos que puede renovarse y pueden
diferenciarse para producir todos o algunos de los principales tipos de clulas especializadas de
tejidos u rganos.
Clulas Madre:
Posible aplicacin de las Clulas Madre Embrionales para Terapias


Investigacin Biomdica : mecanismos de funcionamiento de los sistemas orgnicos en patologas.
Diseo de Nuevos Medicamentos
Terapias Celulares para Alzheimer, Parkinson y Enfermedades Neurodegenerativas
Ingeniera de Tejidos


Algunos linajes de las Clulas Madre Adultas:
Cordn Umbilical dan Hematopoyticas
Hematopoyticas dan linajes sanguneos e
inmunitarios como glbulos rojos, plaquetas
y glbulos blancos
Estroma de la Mdula sea dan tejidos
mesenquimticos como hueso, cartlago,
msculo, ligamento, tendn y tejido adiposo

Sistema Nervioso Central dan neuronas,
astrocitos, oligodendrocitos, microgla y
astrogla.



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Fenmeno de Transdiferenciacin:
Plasticidad de las clulas madre de adultos que permite que las clulas
precursoras de un linaje, en condiciones determinadas, den origen a clulas
de otros linajes.

La Ingeniera Tisular constituye un conjunto de conocimientos, tcnicas y mtodos de base
biotecnolgica que permiten disear y generar en el laboratorio sustitutos tisulares, tejidos
artificiales de origen heterlogo o autlogo a partir de clulas madre y biomateriales.
La Medicina Regenerativa es un campo interdisciplinario emergente de investigacin y
aplicaciones clnicas centrado en la reparacin, reemplazo o regeneracin de clulas, tejidos
u rganos para restaurar una funcin daada por cualquier causa, incluyendo defectos
congnitos, trauma y envejecimiento. Ella utiliza una combinacin de varios
procedimientos tecnolgicos que van ms all del trasplante tradicional y las terapias
sustitutivas.