Fermentación Etanol

Proyecto de Vinculacin Productiva
Programa de Recuperacin de Empresas en Crisis

DISEO Y PUESTA EN MARCHA DE UN SISTEMA
SEMICONTINUO DE FERMENTACION PARA LA PRODUCCION
DE ETANOL A PARTIR DE MATERIAS PRIMAS RENOVABLES
MEDIANTE Saccharomyces cerevisiae

Ing. Fabio Rafael Tarntola
Ing. Angel Augusto Roggiero
Ing. Sandra Dimarco
Facultad de Ciencias Aplicadas a la Industria

Biotecnologa
La Biotecnologa utiliza agentes biolgicos de distinta
naturaleza, desde plantas o animales hasta
microorganismos, clulas de tejidos animales o vegetales
o enzimas, para obtener productos de utilidad en muy
diversos campos: farmacutico, diagnstico, mdico,
quirrgico, agrcola, alimentario, ambiental, etc.


PRODUCTOS, REACCIONES Y GRUPOS MICROBIANOS RESPONSABLES
DE LOS PROCESOS FERMENTATIVOS MAS IMPORTANTES

Los grupos que mas interesan desde el punto de vista alimentario son: enterobacterias y clostridium
(Sanitario) y bacterias lacticas , propionibacterias y levaduras (Productivo)

Levaduras
Zimomonas

Lactico+ etanol+ CO2
Lactobacilos.
Streptococcus
Leuconostoc

Clostridium
propionicum y
Propioniobacteriu
m

enterobacterias
Clostridium
butiricum
Biomasa + CO2
O
2

H
Hongos
comerciales

PRODUCCION DE LEVADURAS Y SUB-PRODUCTOS
Especie Productos y Aplicaciones
Saccharomyces cerevisiae Panificacion, cerveza, vinos, bebidas destiladas,
etanol, sidra, levadura para alimentacion humana y
animal, sub-productos de levadura (autolisados,
hidrolizados, proteinas, componentes: aa,
vitaminas, invertasa, etc)
Saccharomyces uvarum cerveza
Saccharomyces sake sake
Saccharomyces bayanus Vinos burbujeantes
Saccharomyces lactis lactasa
Saccharomyces fragilis Alimentos, suplementos animales, etanol
Candida utilis Alimentos, suplementos animales, acidos nucleicos
Candida lipolytica suplementos animales

INTRODUCCIN
La produccin de etanol siempre ha tenido como
objetivo el consumo humano y la obtencin de
bebidas alcohlicas concentradas mediante
destilacin. Su uso como materia prima qumica se
inicia a principios de la microbiologa industrial,
pero su obtencin se lleva a cabo mediante la
hidratacin cataltica del etileno. No es hasta hace
pocos aos cuando la atencin ha vuelto de nuevo
a la produccin por fermentacin del etanol para
fines qumicos y como combustible.


El proceso qumico de produccin de bioetanol se basa
simplemente en una fermentacin, que es un cambio qumico
en las sustancias de naturaleza orgnica llevado a cabo por la
accin de enzimas. Lo que ocurre en una fermentacin es que
las sustancias orgnicas complejas se transforman en otras
simples.

La mayora de las levaduras que se cultivan son del gnero
Saccharomyces. Concretamente la especie Saccharomyces
cerevisiae es una de las ms utilizadas ya que participa en
muchas fermentaciones.


El bioetanol se utiliza en vehculos como sustitutivo de la
gasolina, bien como nico combustible o en mezclas que, por
razones de miscibilidad entre ambos productos, no deben
sobrepasar el 5-10% en volumen de etanol en climas fros y
templados, pudiendo llegar a un 20% en zonas ms clidas.
El empleo del etanol como nico combustible debe realizarse
en motores especficamente diseados para el
biocombustible. Sin embargo, el uso de mezclas no requiere
cambios significativos en los vehculos, si bien, en estos
casos el alcohol debe ser deshidratado a fin de eliminar los
efectos indeseables sobre la mezcla producidos por el agua.

El microorganismo
La especie Saccharomyce cerevisiae utilizada en este estudio
fue suministrada por el Laboratorio de Biotecnologa de la
Facultad de Ciencias Aplicadas a la Industria


una ventaja adaptativa para las levaduras, que
pueden sobrevivir en anaerobiosis. Pero
solamente lo utilizan cuando no hay oxgeno
disponible y ello en relacin con el bajo
rendimiento energtico de la fermentacin
alcohlica, en comparacin con el de la
degradacin oxidativa de la glucosa.


El Bioreactor
El Bioreactor semicontinuo consta de un reactor por cada
etapa del proceso. Cada reactor tiene una capacidad de 1 litro
construido en vidrio con tapa esmerilada con cuatro accesos;
dos para la entrada y salida de gases, una para suministro de
inculo y de medio nuevo y otra para monitoreo de muestras y
control de temperatura.


Las variables
Velocidad de crecimiento,
tiempo de generacin,
sustrato limitante,
concentracin del producto, c
concentracin celular,
flujo volumtrico,
tasa de dilucin
como base para la determinacin de la max , Ks ,
Productividad, Concentraciones de biomasa y
sustrato en el equilibrio.

Se realizaron 3 experimentos completos para concentraciones
de pulpa de durazno iniciales de 2, 4, y 8 g/100mL
respectivamente. En cada experimento se realizaron los
siguientes pasos: fermentacin que contiene el inoculo de
Saccharomyces cerevisiae en un medio azucarino con el fin
de eliminar la etapa de adaptacin y arrancar en etapa de
crecimiento exponencial para la produccin de etanol. El
tiempo de fermentacin alcohlica fue de 48 horas a
condiciones anaerbicas.
El suministro de medio e inoculo nuevo, 500mL, en el periodo
de suministro se realiza cada 48 horas para un flujo
volumtrico de 500mL/48 horas en las dos etapas. Se
consideraron tres suministros para cada experimento a
intervalos de 48 horas.


Para todos los experimentos la inoculacin fue de
aproximadamente 10
6
levaduras
Determinacin de nitrgeno y protena en la
biomasa.
Derminacin de los Azcares Reductores.
Determinacin de Glucosa.
Determinacin de las concentracin de Etanol.

S = concentracin de sustrato en el reactor en equilibrio estacionario.
x = concentracin de masa celular en el reactor en equilibrio.
mx = velocidad especfica mxima de crecimiento.
D = Tasa de dilucin.
Y = Constante de conversin o rendimiento que describe la relacin
entre la biomasa formada y el sustrato consumido.

D - mx
D Ks
= S

( )
D - mx
0
D Ks
S Y x
-
- =

S
S
S
S
S


ETAPA FERMENTACIN

Tabla 1. Datos de crecimiento celular y disminucin del
sustrato a travs del tiempo en la etapa de fermentacin
alcohlica. Para los tres experimentos.
Experimento 1 Experimento 2 Experimento 3
Tiempo (h) Levaduras
(m.o./ml)
*10
6
% Azcar
Reductor
(g/100 ml)
Levaduras
(m.o./ml)
*10
6
% Azcar
Reductor
(g/100 ml)
Levaduras
(m.o./ml)
*10
6
% Azcar
Reductor
(g/100 ml)
0 2.4 1.84 4.2 5.24 1.4 3.25
12 48.2 1.36 46.2 2.54 56.2 2.41
24 94.3 1.02 121.4 1.25 108.3 1.86
36 286.2 0.76 392.3 0.86 321.6 0.94
48 621.3 0.14 784.2 0.12 716.1 0.21


Tabla 2. Datos de Concentracin Celular, Concentracin de
Azcar Reductor y de Alcohol en los tiempos de suministro de
nuevo medio de cultivo en la etapa de fermentacin. Para los
tres experimentos.
Experimento 1 Experimento 2 Experimento 3
Tiemp
o (h)
Levad
uras
(m.o./
ml)
*10
6
%
Azca
r Red
(g/100
ml)
Etanol
g
/100ml
Levad
uras
(m.o./
ml)
*10
6
%
Azca
r Red
(g/100
ml)
Etanol
g
/100ml
Levad
uras
(m.o./
ml)
*10
6
%
Azca
r Red
(g/100
ml)
Etanol
g
/100ml
0 2.4 1.84 0 1.4 3.25 0 4.2 5.24 0
48 621.3 0.14 1.04 716.1 0.07 1.86 7.84.2 0.12 2.54
48.5 304.5 1.04 0.47 364.2 2.16 0.78 382.3 3.86 1.31
96.5 824.3 0.25 1.31 0.05 2.42 824.3 0.02 2.92
97 425.3 0.92 0.56 495.3 2.38 0.56 472.2 4.23 1.52
145 921.3 0.12 1.34 1124.2 0.02 2.62 1221.6 0.04 3.42


Tabla 3. Datos de velocidad especfica de crecimiento y de la
constante de conversin para las diferentes concentraciones
de azcar reductor inicial, en la fermentacin.

EXPERIMENTO SUSTRATO INICIAL
Azcar Reductor
Inicial
VELOCIDAD
ESPECFICA
(h
-1
)
CONSTANTE DE
CONVERSIN (Y)
N lev x10
8
/g azcar
1 1.84 0.090 3.68
2 3.25 0.124 295.4
3 5.24 0.115 142.8


CONCLUSIN

A nivel industrial, teniendo en cuenta la cintica de
crecimiento en cultivo continuo es posible en
funcin de la productividad deseada, dimensionar
con precisin los fermentadores y las instalaciones
anexas (bomba, compresor, extractor, columna de
destilacin) y de este modo reducir al mximo las
inversiones y los gastos de funcionamiento.

Los cultivos continuos permiten igualmente tener
una produccin homognea, de calidad constante,
lo cual es importante para las transformaciones
ulteriores.
Se puede observar que la tasa de productividad
(P= X. D) est cercana a los valores reportados en
la bibliografa para la transformacin de la glucosa
en etanol mediante la Saccharomyces cerevisiae .

De esta manera se ha obtenido una alternativa viable de
fabricacin de bioetanol mediante procesos catalticos
enzimticos de bajo costo con materias primas abundantes en
la Regin, tales como, Duraznos, Ciruelas, Uvas, Peras,
Manzanas y Damascos.


El Futuro
Caracterizacin y estudio de viabilidad de un
proceso industrial de obtencin de inulina y
bioetanol a partir de Helianthus tuberosus
Por su atencin,
MUCHAS GRACIAS!

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