AMINOACIDOS:

Son sustancias anfteras: pueden comportarse

como cidos y como bases.

Forma biopolmeros de longitud variable, cadenas
polipeptdicas.

Esteroisomera: L- aa


AMINOACIDOS
Estado de ionizacin como funcin del pH.
El estado de ionizacin de los aminoacidos esta
alterado por un cambio en el pH. Las formas
zwitterionicas predominantes cercanas al pH
fisiolgico.
FAMILIA DE AMINOACIDOS
NATURALEZA DE LA CADENA
O
O
N H
2
NH
2
OH
OH
O H
NH
2
O
O
O
NH
2
N H
2
OH
1. HIDROFOBOS, GRUPO R NO
POLAR: cadenas laterales
hidrocarbonadas.
O
NH
2
S
C H
3
OH
Metionina
2. POLAR CON CARGA NEUTRA:
cadenas laterales hidroflicas,
enlaces H.
Asparagina
3.POLAR CON CARGA NETA:
aninicos, grupo carboxilo -, cido,
enlaces inicos
Acido glutmico
3.POLAR CON CARGA NETA:
catinicos, grupo nitrogenado +,
bsico.
Lisina

Aminocidos proteicos No esenciales


Hacen parte de las protenas, sintetizados por mamferos a partir de
intermediarios
Alanina (Ala, A)
Cistena (Cys, C)
Asprtico (Asp, D)
Glutmico (Glu, E)
Glicina (Gly, G)
Asparragina (Asn, N)
Prolina (Pro, P)
Glutamina (Gln, Q)
Tirosina (Tyr, Y)
Serina (Ser, S)
Aminocidos proteicos esenciales
Se deben consumir puesto que no son sintetizados por lo
mamferos
Fenilalanina (Phe, F)
Arginina (Arg, R)
Histidina (His, H)
Isoleucina (Ile, I)
Lisina (Lys, K)
Leucina (Leu, L)
Metionina (Met,M)
Treonina (Thr, T)
Valina (Val, V)
Triptfano (Trp, W)


AMINOACIDOS PROTEICOS
NE E NE NE NE
AMINOACIDO PROTEICOS
NE NE E E E
E E E NE NE
AMINOACIDOS PROTEICOS
MINORITARIOS
Derivados estructuralmente de los esenciales.
Adaptan mejor una protena de acuerdo a su funcin
Sufren modificaciones:
Metilaciones (metilhistidina), protenas musculares.
Hidroxilaciones (hidroxiprolinas), colgeno
Acetilaciones (acetilisina- histonas)
Fosforilaciones, enzimas, factores de crecimiento.
Carboxilaciones, factores de coagulacin
Dimerizaciones, cistina (tioles).
Ciclaciones (piroglutmico)
Hipermodificaciones, hormonas tiroideas.
AMINOACIDOS NO PROTEICOS
No se incorporan a las protenas:
Alfa- aminocidos: sntesis degradacin
proticos: ornitina, citrulina.
Beta aminocidos: componente estructural
vitaminas.
Gama aminocidos: cido aminobutrico en
neuronas.
AMINOACIDOS NO PROTEICOS
Dos ejemplos de aminocidos no proteicos, intermediarios de la
biosntesis de la urea.
DERIVADOS DE LOS AMINOACIDOS

Modificaciones estructurales o prdidas:
sarcosina, creatina.
Aminas bigenas: prdida del grupo carboxilo.
Ornitinaputrescinaespermidina - espermina
Lisina cadaverina
Alfa cetocidos: prdida del grupo amino. No
nitrogenados que intervienen en el metabolismo.
alfa-cetoglutrico
oxalactico
Pirvico
PROTEINAS
ENLACES PEPTIDICOS
70 kcal/mol
BIOPOLIMEROS
PEPTIDOS Y PROTEINAS
PEPTIDO:
Cadenas de menos a 50 aminocidos
Sintetizados en el laboratorio sin existencia
en organismo vivo.

PROTEINA:
> 51 aminocidos (insulina).
Presentes en todos los organismos vivos.

BIOPOLIMEROS
PROTEINAS: CLASIFICACION

SEGUN SU COMPOSICION:
Simples: slo aminocidos
Conjugadas: otros componentes de diferente naturaleza qumica
Glicoprotenas
Lipoprotenas
Nucleoprotenas
Metaloprotenas, hemoprotenas, flavoprotenas

SEGUN SU FORMA:
Globulares: esfrica u ovoide, hidrosolubles.
Albminas
Globulinas
Histonas
Fibrosas: alargadas, insolubles, base de tejidos estructurales
(escleroprotenas).

SEGN FUNCION BIOLOGICA
Enzimticas ,de reserva, transporte, contrctiles, estructurales, de
defensa, hormonal, receptores, toxinas.

La forma de una
protena es definida
por su secuencia de
aminocidos
Aminocido
Aminocido
Aminocido
Aminocido
PROTEINA
QUE DA
ORIGEN A LA
FORMA
ESTRUCTURAL
DE UNA
PROTEINA ?
BIOPOLIMEROS
PROTEINAS: ESTRUCTURA
PRIMARIA
Define el orden de los aminocidos unidos por enlaces
peptdicos, se forman cadenas polipeptdicas.
Cada protena tiene una nica y precisa secuencia definida
de aminocidos.
Insulina bovina.
La secuencia de los aminocidos en una
protena estn definidos genticamente
PROTEINAS: ESTRUCTURA SECUNDARIA
La libertad de rotacin de los dos enlaces de cada aminocido permite a la
protena plegarse de muchas formas posibles.
La cadena polipeptdica puede plegarse en estructuras regulares tal como alfa
hlice, beta plegada, giros y vueltas (rizos).
Hlices :
Es una estructura
enrollada
estabilizada por
puentes de
hidrgeno
intracadena.

-Plegamiento en
forma de hlice.

-Rotacin hacia la
derecha.
EL PLEGAMIENTO DE UNA PROTEINA
DEPENDE DE:
FUERZAS
ELECTROSTTICAS
FUERZAS DE
VAN DER WAALS
PUENTES
DISULFURO
Interacciones inicas dbiles
Poca estabilidad a las protenas
Asociacin de dos grupos proticos
Inicos de cargas opuestas:
Par ion o puente salino.
Interacciones dipolo dipolo
Fuerza de dispersin de London
fuerzas hidrofbicas
Puentes de hidrgeno
ENLACES NO COVALENTE
PLEGAMIENTO DE LA PROTEINA EN
CONFORMACION COMPACTA
ENLACES NO COVALENTES QE AYUDAN
A PLEGAR LA PROTEINA
Puente
salino
PUENTES DE HIDROGENO EN LAS
BIOMOLECULAS
En protenas
PROTEINAS: ESTRUCTURA SECUNDARIA
Ejemplo: Una gran protena helical:
Ferritina, una protena que almacena
hierro, est construda a partir de un
paquete de helices.
PROTEINAS: ESTRUCTURA SECUNDARIA
-Hoja plegada :
-Cadenas polipeptdicas en zig-
zag,
-Sentido paralelo o antiparalelo.
- Enlaces puentes de hidrgeno.
Las cadenas de polipeptidos pueden
giros reversos y bucles
Los reversos estn
acompaados un
elemento comn
estructural llamado giro
reverso. Esta interaccin
estabiliza cambios
bruscos en direccin de
la cadena polipeptdica.
Las estructuras bucles
bucles W (omega)
sugieren una forma total,
no tienen estructuras
peridicas regulares.
BIOPOLIMEROS
PROTEINAS: ESTRUCTURA TERCIARIA
Estructuras solubles en
agua, compactas con
centros no polares.

Define el plegamiento
espacial de la cadena
completa, e incluye las
interacciones covalentes o de
otros tipos (puentes de
hidrgeno, electrostticas,
hidrfobas, de Van der
Waals), que gobiernan dicho
plegamiento.
BIOPOLIMEROS
PROTEINAS: ESTRUCTURA CUATERNARIA
Asociaciones de varias
subunidades
polipeptdicas que
interactan y se
disponen espacialmente
para ser funcionales.
ESTRUCTURA DE LA HEMOGLOBINA
PROPIEDADES DE LAS PROTEINAS EN
DISOLUCION


Mayor parte globulares disueltas en fluidos
biolgicos (dil. sal.)
Naturaleza poliinica: extremos y residuos
laterales con aminocidos hidrfilos
protena numerosas cargas (+ -): poliin
necesita contraiones pequeos para equilibrar
su carga.

Punto isoelctrico (pI):

pH al cual su carga neta es nula, por compensacin
interna de las cargas.
pH< pI: protenas carga positiva
pH > pI: protenas carga negativa
pI depende de composicin de los aa.
Las protenas ms solubles interacciones entre ellas
por repulsin electrosttica.
pH = pI solubilidad mnima.
Concentracin moderada de sales solubilidad
Concentracin elevada sales solubilidad. Competencia
por molculas de agua.



Naturaleza macromolecular:

Forman disoluciones coloidales. El comportamiento protico
en membranas semipermeables: no paso macromolculas.
Ultrafiltracin
Dilisis
Aclaramiento renal
DESNATURALIZACION DE LAS
PROTEINAS

Desnaturalizacin: es la prdida de su forma
nativa, perdiendo su actividad biolgica
Por calor
pH extremos
Agentes caotrpicos: urea y detergentes inicos
Afectadas protenas cuaternarias oligomricas y
terciarias globulares ( solubilidad)
Irreversible en la mayora de los casos
CLASIFICACIN DE PROTENAS

Se clasifican en :
HOLOPROTENAS
Formadas solamente por aminocidos
HETEROPROTENAS
Formadas por una fraccin protenica y
por un grupo no protenico, que se
denomina "grupo prosttico

Holoprotenas
GLOBULARES
Prolaminas:Zena (maza),gliadina (trigo), hordena (cebada)
Gluteninas:Glutenina (trigo), orizanina (arroz).
Albminas:Seroalbmina (sangre), ovoalbmina (huevo),
lactoalbmina (leche)
Hormonas: Insulina, hormona del crecimiento, prolactina, tirotropina
Enzimas: Hidrolasas, Oxidasas, Ligasas, Liasas, Transferasas...etc.
FIBROSAS
Colgenos: en tejidos conjuntivos, cartilaginosos
Queratinas: En formaciones epidrmicas: pelos, uas, plumas,
cuernos.
Elastinas: En tendones y vasos sanguineos
Fibronas: En hilos de seda, (araas, insectos)
Heteroprotenas
GLUCOPROTEINAS Ribonucleasa
Mucoprotenas
Anticuerpos
Hormona luteinizante
LIPOPROTEINAS De alta, baja y muy baja densidad, que transportan lpidos en
la sangre.
NUCLEOPROTEINAS Nucleosomas de la cromatina
Ribosomas
CROMOPROTEINAS Hemoglobina, hemocianina, mioglobina, que transportan
oxgeno
Citocromos, que transportan electrones
ALGUNAS PROTEINAS

1. MATRIZ EXTRACELULAR MEC
CONSTITUYENTES

MAYORES
M.E.C
FIBRAS
MENORES
ADHESIN
Fibronectina
Laminina
Tenascina
Osteopondina
Trombospondina
Entactina
CONSTITUTIVAS
O DE SOPORTE
Glicosaminoglicanos
GAG
Proteoglicanos
P.G
Colageno
Elastina
FUNDAMENTAL
INTERACCIONES ENTRE LAS CELULAS Y SU AMBIENTE
1. MATRIZ EXTRACELULAR
ORGANIZACIN MACROMOLECULAR
MATRIZ EXTRACELULARES (MEC)
1. CONSTITUYENTES MAYORES
a. FIBRAS CONSTITUTIVAS O DE SOPORTE
COLAGENO
Familia protenas fibrosas, todos
animales multicelulares.
Producidas por fibroblastos, tejidos
conectivos y otros tipos.
Componente mayor de piel y huesos
25% del total de protenas
MOLECULA:
- Firme y larga estructura helical triple
cadena (tres alfa)
Simple cadena
de colgeno
Tres cadenas
superhlice
COLAGENO
FIBRILAR
COLAGENO: FORMACION DE HIDROXIPROLINA
Residuos de prolina en RE

Ya incorporados a cadenas polipeptdicas
del colgeno
Glicina: espaciada cada tres a.a hacia el centro de la cadena: ms
pequea facilita la estrechez y unin de la superhlice. Gly-X-Y

Prolina (X) estabiliza la hlice. Hidroxiprolina (Y)
Cerca de 25 diferentes cadenas alfa (codificada por genes
diferentes).
Cerca de 20 tipos de colgeno.
MATRIZ EXTRACELULARES (MEC)
1. CONSTITUYENTES MAYORES
a. FIBRAS CONSTITUTIVAS O DE SOPORTES
COLAGENO
LINEAS CRUZADAS ENTRE CADENAS LATERALES DE LISINA CON
UNA FIBRILA DE COLAGENO.
UNIONES COVALENTES
LISINA Y HIDROXILISINAS DESAMINADAS POR LISIL OXIDASA PARA
PRODUCIR ALDEHIDOS ALTAMENTE REEACTIVOS.
TIPO FORMULA MOLECULAR FORMA
POLIMERIZADA
DISTRIBUCION TISULAR
FORMANDO
FIBRILAS:
FIBRILLAR
I
[a1(I)]
2
a2(I) fibrilar Hueso, piel, tendn,
ligamentos, cornea,
rganos internos (90%)
II
[a1(II)]
3
fibrilar Cartlago, disco
intervertebral, notocordo,
humor vtreo
III
[a1(III)]
3
fibrilar Piel, vasos sanguneos,
rganos internos
V
[a1(V)]
2
a2(V) Fibrilar (con tipo I) IDEM tipo I
XI
A1(XI)a. (XI)a3 (XI) Fibrilar (con tipo
II)
IDEM tipo II
ASOCIADO A
FIBRILAS
IX
A1(IX)a2(IX)a3(IX)
con fibrilas tipo II
Asociacin lateral Cartlago
XII
[a 1(XII)]
3
con fibrilas
tipo I
Asociacin lateral Tendn, ligamentos, algn
otro tejido
FORMADOR
DE REDES
IV
[a 1(IV)
2
a2(IV) Redes
semejantes a
lminas
Lmina basal
VII
[a 1(VII)]
3
Fibrilas de anclaje Epitelio escamoso
estratificado
MATRIZ EXTRACELULARES (MEC) 1. CONSTITUYENTES MAYORES
a. FIBRAS CONSTITUTIVAS O DE SOPORTES COLAGENO
TIPOS DE COLAGENO
INTERACCIONES DE FIBRAS Y NO FIBRAS DE COLAGENO
COLAGENO TIPO IV
COLAGENO TIPO IX: unin en
patrones perodicos a la superficie
de una fibrila colageno tipo II
EVENTOS INTRACELULARES Y EXTRACELULARES EN LA
FORMACION DE UNA FIBRA DE COLAGENO
MATRIZ EXTRACELULARES (MEC)
1. CONSTITUYENTES MAYORES
a. FIBRAS CONSTITUTIVAS O DE SOPORTES

FIBRAS ELASTICAS:
Red de fibras y lminas
Propiedad elstica
Asociacin de un protena
elastina (hidrofbica 750
aas)
Red con puentes cruzada
mediante enlaces covalentes
(restos de lisinas).

Cubiertas por una capa de
microfibrillas compuesta de
glicoprotenas (fibrilina).
- UNION POR ENLACES
COVALENTES RED ENTRECRUZADA
MATRIZ EXTRACELULARES (MEC)
1. CONSTITUYENTES MAYORES
a. FIBRAS CONSTITUVAS O DE SOPORTES
FIBRAS ELASTICAS:
Se estiran con la
tensin y retoman su
forma inicial
pasivamente cuando la
tensin se libera.

Ayudan al
funcionamiento de
tejidos y rganos como
piel, vasos sanguneos
y pulmones
-SEGMENTO AORTA PERRO.
-RED DENSA DE FIBRAS
ELASTICAS CAPA EXTERNA

TECNICAS PARA EL ESTUDIO

Muestras biolgicas mezclas complejas:
fines clnicos, biotecnolgicos o
investigacin.
Cromatografa
Electroforesis
Ultracentrifugacin
Biuret verde bromocresol
Las proteinas pueden ser extradas de las
clulas para ser purificadas.
CENTRIFUGACION DIFERENCIAL
La clulas se fraccionan en un
homogenizador y la mezcal
resultante, homogenizado, es
centrifugado paso a paso de
manera que se incremente la
fuerza centrfuga.

EL material denso puede
formar un sedimento en la
parte inferior.

Las fracciones aisladas
pueden usarse para
adicionales purificaciones.
Las protenas pueden purificarse e acuerdo a la
solubilidad, tamao, carga y afinidad de unin.
Dialisis.
Las molculas proticas
(rojo) son retenidas
dentro de la bolsa de
dilisis, mientras las
molculas (azul)
difunden en el medio
circundante.
Chromatografa por gel de filtracin
Una mezcla de proteinas en un pequeo volumen es
aplicada a una columna fijada con esferas porosas.
Las protenas grandes no pueden entrar dentro de las
cuentas, y estas emergen ms pronto que las pequeas.

Chromatografa de intercambio
inico.
Esta tecnica separa
proteinas
principalmente de
acuerdo a su carga
neta.
Chromatografa de afinidad
Esta tcnica toma ventaja
de su alta afinidad de
muchas protenas por sus
grupos qumicos
especficos.
Es un poderoso medio
para aislar factores de
transcripcin, protenas
que regulan la expresin
de los genes..
High-Pressure Liquid Chromatography
(HPLC).

Filtracin en gel por HPLC
define claramente las
protenas individuales debido a
su gran poder de resolucin.
Versin realzada de la tcnica
en columna.
Los materiales en la columna
son mucho ms divididos con
mayor interaccin.
La columna es hecha de finos
materiales, se aplica presin
para obtener un adecuado
flujo.
El resultado neto es alta
resolucin y rpida
separacin.
Proteins Can Be Separated by Gel
Electrophoresis and Displayed
Cmo puede saberse si un esquema de
purificacin es efectiva?
Una va es acertar que con cada ruta, la
actividad especfica incrementa.
Otra es visualizar la efectividad mostrando
las protenas presentes. La tcnica de
electroforesis hace esto posible.
Polyacrylamide Gel Electrophoresis.
Polyacrylamide Gel Electrophoresis.
Formacin de un gel
de Poliacrilamida .
Una malla
tridimensional se
forma por
monmeros
activados
copolimerizantes
(azul) y entrecruzador
(rojo).
Polyacrylamide Gel Electrophoresis.
Tincin de
protenas despus
de la electroforesis.
Con azul de
Coomassie.
Polyacrylamide Gel Electrophoresis.
La electroforesis
puede determinar la
masa. La movilidad
electrofortica de
muchas protenas en
gel SDS-
poliacrilamida es
inversamente
proporcional al
logaritmo de su masa.

Punto Isoelectrico
Se establece un gradiente de pH en un gel antes de correr la
muestra.
(A) La muestra se corre y el voltaje es aplicado. La protena puede
migrar a su pH isoelctrico, localizacin en la cual ella no tenga
carga neta.
(B) Las protenas forman bandas que pueden ser cortadas y usadas
para adicionales experimentos.


Un esquema de purificacin de protenas puede
evaluarse cuantitativamente.

Cuantificacin de protenas. Protocolo de purificacin ficticio.
Step0000 Total protein
(mg)
Total activity
(units)
Specific
activity,
(units mg
-1

Yield (%) Purification
level
Homogeniz
ation
15,000 150,000 10 100 1
Salt
fractionation
4,600 138,000 30 92 3
Ion-
exchange
chromatogr
aphy
1,278 115,500 90 77 9
Molecular
exclusion
chromatogr
aphy
68.8 75,000 1,100 50 110
Affinity
chromatogr
aphy
1.75 52,500 30,000 35 3,000
Electrophoretic Analysis of a Protein
Purification
El esquema de
purificacin de la anterior
tabla se analizo por SDS-
PAGE.
Cada lnea contiene 50
mg de muestra.
La efectividad de la
purificacin puede verse
como la banda ms
prominente con respecto
al resto.
La ultracentrifugation es importante para
Separar biomoleculas y determinar sus masas

Densidad y
coeficientes de
sedimentacin de
componentes
celulares.
Zonal Centrifugation.
(A) Formacin de un gradiente de densidad
(B) Capa de la muestra sobre la superficie del gradiente
(C) Tubo en un rotor y centrifugacin
(D) Recoleccin de las muestras.
PROTEINAS
DIGESTION , ABSORCION,
TRANSPORTE Y DISTRIBUCION
DIGESTION
LUGAR FUENTE DE
ENZIMAS
PROCESO DIGESTIVO
DIGESTION DE PROTEINAS
ESTOMAGO ESTOMAGO
(GLANDULAS
GASTRICAS)
PROTEINA
PEPSINA
POLIPEPTIDOS
CORTOS
INTESTINO
DELGADO
PANCREAS POLIPEPTIDO
TRIPSINA
TRIPEPTIDO +

QUIMIOTRIPSINA
DIPEPTIDO
A-A-A-A-A-A-A-A A-A-A A-A
DIPEPTIDOS
CARBOXIPEPTIDASAS
AMINOACIDOS

AMINOPEPTIDASA
LIBRES
A-A A A A
INTESTINO DELGADO A-A-A TRIPEPTIDOS
PEPTIDASAS
AMINOACIDO
A-A + DIPEPTIDOS LIBRES
A A A
DIGESTION INTESTINAL DE PROTEINAS
PROTEINA
Enterocinasa

Tripsina


Quimiotripsina



Elastasa
Pptido con Arg
Lis-COOH terminal


Pptido con
COOH terminal
aromtico

Pptido con
COOH terminal
aliftico

Carboxipeptidasa B





Carboxipeptidasa A
Aminocidos
bsicos


Pptidos
pequeos



Aminocidos
neutros
DIGESTION Y ABSORCION DE
PROTEINAS
- Movimiento de nutrientes desde la luz del tracto digestivo a sangre
linfa.
- Intestino delgado: duodeno y yeyuno
- Transporte activo secundario a
- Simporter+ATPasa Na
+
-K
+













- Pinocitosis endocitosis: absorcin ntegra de la protena, lactantes
IgG, si persiste en adultos: alergias al huevo, pescado, mariscos
- No a menores de 6 meses.

Aminocidos
Transporte
activo
> %
Membrana luminal
enterocito
Transportadores para
a.a especficos+ Na
Transporte
pasivo
HIGADO SANGRE
ABSORCION DE PROTEINAS
Na
+
K
+

Na
+

ABSORCION DE PROTEINAS
Nutrimentos no absorbidos: pasan a intestino grueso.
Colon bacterias: fermentativas, putrefaccin y E. coli
Fermentacin- putrefaccin: produce CO
2
, metano, H, N y cido
sulhdrico.
Descarboxilacin: cadaverina, putrescina, histamina, indol y escatol.
Desaminacin: amoniaco.
Metabolismo intestinal de los aminocidos:
Destino final de los aminocidos digeridos y abosrbidos es
utilizacin metablica por otros tejidos.
Gran parte del metabolismo tiene lugar en las clulas de las
mucosas intestinal.
TRANSPORTE Y DISTRIBUCION
HIGADO: Va porta al hgado.
Control de aminocidos: rpida sntesis y degradacin de protenas.
Las protenas plasmticas son eliminadas de la circulacin
constantemente por el hgado e hidrolizadas a aminocidos para
otros tejidos.
Vida media de la protena srica como heptica 10 das
(musculares 180 das).
Estado post absortivo: protenas corporales reserva de nitrgeno,
msculo. Ciclo glucosa- alanina (msculo- hgado).

RION: Incremento en la produccin de in amonio como respuesta
a una acidosis metablica: amoniognesis.
UBIQUITINA: PROTEINA QUE MARCA PROTEINA PARA
SU DESTRUCCION
PRIMER PASO PARA DEGRADAR UN
AMINOACIDO ES REMOVER EL NITROGENO
CICLO DE LA UREA: ION AMONIO ES
CONVERTIDO A UREA
HISTOQUIMICA DE LAS ROTEINAS
Estudio sobre material fijado e includo en parafina,
estos mtodos pueden modificar las cadenas
polipeptdicas.

La fijacin formlica: reticulariza las cadenas
polipeptdicas, pero se hace reversible con los
siguientes tratamientos con alcoholes.

Fijacin con alcoholes: conservacin pobre de la
arquitectura tisular

Fijacin con metales: bloquean grupos qumicos.
HISTOQUIMICA DE LAS ROTEINAS:
aplicacin de mtodos de digestin enzimtica
Proteasas: rompen enlaces peptdicos.
Su empleo es til. Incrementa la intensidad de la
reaccin de algunos grupos. Desenmascara
determinantes antignicos ocultos por fijacin e
inclusin.
Tipos:
Pepsina: enzima del jugo gstrico, segregada por estmago, pH
1.5-2. Ataca la mayora de protenja: elastina , colgeno. No
queratinas.
Tripsina: del pncreas. pH: 7-8. Acta sobre todas las
protenas, mejor desnaturalizadas.
Pronasa: bacteria. Semejante a la tripsina. Mayor eleccin.
METODOS HISTOQUIMICA PARA
COLORACION DE PROTEINAS
Han sido superados por los mtodos
inmunohistoqumicos.
Se clasifican en tres grupos:
a. Reaccin general: pretenden colorear globalmente a
las protenas presentes en un tejido, identificndolas
como tales. Similar a la reaccin biuret.
Disolucin protica + sulfato de cobre diludo en medio
bsico: color rosa malva. (complejo cuproalcalino).

METODOS HISTOQUIMICA PARA
COLORACION DE PROTEINAS
Han sido superados por los mtodos inmunohistoqumicos.
Se clasifican en tres grupos:
tetrazorreaccin.

b. Reacciones de grupo: no la molcula. Si un corto nmero de
grupos reactivos especficos. Base para mtodos histoenzimticos,
inmunohidotqumicos:

Reacciones de ninhidrina- Schiff: desaminacin oxidativa de las
cadenas polipeptdicas. Sustitudos por grupos carbonilos.
y tetrazorreaccin: sales de diazonio aromticas (bencidina
tetrazoada) se acoplan con fenoles y aminas aromticas o
heterociclicas de residuos de aminocidos de las protenas.

METODOS HISTOQUIMICA PARA
COLORACION DE PROTEINAS
Han sido superados por los mtodos
inmunohistoqumicos.
Se clasifican en tres grupos:

c. Reacciones especficas:grupos qumicos particulares:
sulfhidrilo, fenol, indol, guanidil. Presentes
especficamente en protenas determinadas.