MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

Microbiologia Industrial
Es la disciplina que utiliza los microorganismos, generalmente
cultivados a gran escala, para obtener productos comerciales de
valor o para realizar importantes transformaciones qumicas.

Se origin con procesos de fermentacin alcohlica: fabricacin
de vino y cerveza.
Despus para productos farmacuticos; (antibiticos), aditivos
alimentarios (aminocidos), enzimas y compuestos qumicos como
butanol y cido ctrico.

Todos estos procesos industriales se basaban en la potenciacin
de reacciones metablicas, con el fin, de aumentar la produccin.


1. Microorganismos y productos industriales
Los microorganismos industriales son seleccionados
cuidadosamente para que produzcan uno o ms
productos especficos

Con el fin de lograr esta elevada especializacin, las
cepas industriales estn alteradas genticamente, por
mutacin o por recombinacin.

Habitualmente se reprimen o se eliminan las vas
metablicas menores y frecuentemente existe en ellas
un desequilibrio metablico.
2. Origen de las cepas industriales
La fuente ltima de todas las cepas es el ambiente
natural.

Cuando se patenta un nuevo proceso industrial, al
solicitante de la patente se le requiere para que
deposite una cepa capaz de llevar a cabo el proceso, en
una coleccin de cultivos reconocida.

Hay varias colecciones de cultivos que actan de
depositaras y suministradoras de cultivos microbianos
3. Mejora de cepas
La fuente inicial de un microorganismo industrial es el
ambiente natural, pero el aislamiento original se modifica
en gran medida en el laboratorio.
Como resultado de esta modificacin, es posible anticipar
una mejora progresiva en el rendimiento de un producto.
El ejemplo ms espectacular de tal mejora progresiva es el
de la penicilina, el antibitico producido por el hongo
Penicillium chrysogenum.
Cuando se produjo por primera vez la penicilina a gran
escala, se obtuvieron rendimientos de 1-10 g/ml.
A lo largo de los aos, como resultado de la mejora de las
cepas acoplada a cambios en el medio y en las condiciones
de cultivo, el rendimiento de penicilina aument hasta
50.000 mg/ml.
Bancos de cepas
Abreviatura Nombre Localizacin
ATCC
CBS
CCM
CDDA
CMI
DSM
FAT
IAM
NCIB
NCTC
NRRL
PCC
American Type Culture Collection
Centraalbureau voor Schimmekul turen
Czechoslovak Collection of Mkroorganisms
Canadian Department of Agricultura
Commonwealth Mycological Institute
Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen
GmbH
Faculty of Agriculture, Tokyo University
Institute of Applied Microbiology
Nationa l Collection of Industrial Bacteria
National Collection of Type Cultures
Northern Regional Research Laboratory
Pasteur Culture Collection
Rockville, MD, Estados Unidos
Baarn, Holanda
J. E. Purkyne University, Brno, Repblica
Checa
Ottawa, Canad
Kew, Reino Unido
Braunsweig, Alemania
Tokyo, Japn
Universidad de Tokyo, Japn Aberdeen,
Escocia
Londres, Reino Unido
Peora, IL, Estados Unidos
Pars, Francia
4. Propiedades de un microorganismo industrial
Debe producir la sustancia de inters.
Es preciso disponer del organismo en cultivo axnico
(puro), debe ser genticamente estable.
Debe ser posible mantener cultivos del organismo
durante un perodo de tiempo largo en el laboratorio y
en la planta.
Debe crecer rpidamente y producir el compuesto
deseado en un perodo de tiempo corto.
Debe ser capaz de crecer en un medio de cultivo
lquido y relativamente barato.
Medios de cultivo a escala industrial, son por ejemplo,
el licor de maz, el suero de leche y otros materiales de
desecho industriales.
4. Propiedades de un microorganismo industrial
Que sea posible eliminar las clulas microbianas del
medio de cultivo, con relativa facilidad.
En el laboratorio, las clulas se retiran
principalmente por centrifugacin, pero la
centrifugacin a gran escala puede ser difcil o cara.
Los organismos industriales ms favorables son
aquellos que tienen un tamao de clula grande
Los preferidos son los hongos, las levaduras y las
bacterias filamentosas.
Deben ser susceptible de manipulacin gentica.
5. Productos industriales
Clulas, como la levadura para panadera.
Sustancias producidas por las clulas.
Como enzimas: glucosa isomerasa, frmacos
como los antibiticos, esteroides y
alcaloides, y aditivos alimentarios, as como
productos qumicos, tales como el etanol.

6. Crecimiento y sntesis del producto en procesos
industriales
Etapas: fase de latencia, fase logartmica y fase
estacionaria.
Dos tipos fundamentales de productos
metablicos: primarios y secundarios.
Un metabolito primario es el que se forma
durante la fase primaria del crecimiento del
microorganismo
Un metabolito secundario es el que se forma
cerca del final de la fase de crecimiento,
frecuentemente cerca de, o en la fase estacionaria
del crecimiento
Metabolitos primarios microbianos
Un proceso microbiano tpico, es el etanol obtenido por fermentacin.
Debido a que el crecimiento slo puede tener lugar, si puede producirse
energa, la formacin de etanol tiene lugar en paralelo con el crecimiento.

Los metabolitos secundarios. Algunos son los metabolitos ms comunes
y ms importantes de inters industrial. Los ms conocidos y ms
ampliamente estudiados son los antibiticos.
El metabolito secundario se produce, generalmente, a partir de varios
productos intermedios que se acumulan, en el medio o en las clulas,
durante el metabolismo primario.
En algunos casos se han identificado inductores especficos de la
produccin de metabolitos secundarios.
Por ejemplo, se ha identificado un inductor especfico de la produccin de
estreptomicina, un compuesto denominado Factor A.

7. Materias primas utilizadas en fermentacin
Los medios utilizados en las fermentaciones industriales
deben contener todos los elementos necesarios para la
sntesis del material celular y para la formacin de
producto; adems, y ser baratos.

Si el producto deseado es la biomasa o protenas
celulares, el diseo del medio debe permitir velocidades
de crecimiento elevadas y alta biomasa.
7. Materias primas utilizadas en fermentacin
Si se desea un producto celular:

En producto asociado al crecimiento, el medio debe satisfacer
simultneamente las necesidades para el crecimiento celular y
para mejor formacin de producto.

En productos no asociados al crecimiento . El medio debe ser
tal que inicialmente las clulas que tengan propiedades
fisiolgicas adecuadas se produzcan eficazmente durante la fase
exponencial despus de la cual las condiciones deben favorecer
la sntesis de producto a una velocidad ptima.
a)Influencia del medio en el crecimiento celular
Los microorganismos necesitan carbono, nitrgeno,
minerales, a veces factores de crecimiento, agua y (si son
aerobios) oxgeno para formar su biomasa y como fuente
de energa para la biosntesis y mantenimiento celular.
La composicin de la mayora de microorganismos es
similar, y en consecuencia puede utilizarse como punto
de partida para disear un medio.
Los valores tpicos para el C, H, O, N y S, en % en peso de
clulas secas, son 45, 7, 33, 10 y 2,5.
Elementos traza como Cu, Mn, Co, Mo, B y otros metales.
Algunos microorganismos necesitan nutrientes
especficos: aminocidos, vitaminas o nucletidos.
b) Formacin de producto
Cuando la formacin de producto depende de
inductores, debe incorporarse al medio el inductor
especfico.
Si la formacin de producto est sujeta a la represin por
el catabolito por substratos como glucosa y otros
carbohidratos, es necesario utilizar un mutante sin esta
regulacin o suministrar el carbohidrato en forma
continua o discontinua pero de modo que sus niveles
permanezcan por debajo de la concentracin crtica.
Una fuente de N utilizable rpidamente inhibe la
produccin de antibiticos.
En los hongos, el ion amonio impide la absorcin de
aminocidos.
c) Oxigeno
La mayora de procesos son aerobios, por lo que
requieren el suministro de oxgeno como materia
prima.
La oxidacin completa de la glucosa, representada por
la ecuacin
C
6
H
12
O
6
+ 6O
2
= 6H
2
O + 6CO
2

necesita 192 g de oxgeno para oxidar 180 g de
glucosa.

Suponiendo que los nicos productos extracelulares
que se forman son el CO
2
y el H
2
O, se necesitan 0,4 g
de oxgeno para producir 1 g de peso seco bacteriano
a partir de glucosa.

Control del pH
Con frecuencia se aade fosfato inorgnico en exceso a los
procesos de fermentacin debido a su buena capacidad
tamponante.
El pH puede controlarse tambin con la adicin de
hidroxisales, amoniaco lquido o gaseoso y cidos sulfrico y
clorhdrico.
El pH del medio se controla con frecuencia de forma
indirecta mediante un balance equitativo entre las fuentes
de carbohidrato y nitrgeno.
Los carbohidratos contribuyen frecuentemente a reducir el
pH debido a la formacin de cidos orgnicos, y las sales de
amonio producen usualmente condiciones acidas debido a
la liberacin del cido libre durante la asimilacin del ion
amonio.
Espuma
Se produce debido a la desnaturalizacin de las protenas en la interfase gas-lquido.
Los antiespumantes actan reduciendo la tensin superficial de las espumas hasta
dispersarlas.
Medios de fermentacin microbiana
Los hidrocarburos, alcoholes y cidos, se utilizaron como medios de fermentacin
cuando el petrleo era barato.

Hoy, las fuentes de carbono y energa ms importantes son materias primas renovables
que contienen azcar y almidn.

Hoy en da compiten con la produccin de alimentos por el almidn y los productos
basados en este hidrato de carbono.

La lignocelulosa representa aproximadamente el 50 % de la produccin anual mundial
de biomasa, que alcanza las 10
11
Tm. Por el contrario, la produccin anual de almidn y
azcar es muy inferior, de unas 10
9
y 10
8
Tm respectivamente.
a) Carbohidratos
El almidn es el carbohidrato ms importante
utilizado actualmente en los procesos de
fermentacin.
Puede emplearse en forma de granos o races,
enteros o molidos, de plantas como el maz, el
arroz, el trigo, las patatas y la mandioca.
Durante el calentamiento o esterilizacin de
los grnulos el almidn gelifica
Requiere una etapa de hidrlisis enzimtica

b) Nitrgeno
Las fuentes ms importantes de nitrgeno para
la fermentacin son el amoniaco, los nitratos, la
urea y el nitrgeno presente en los cereales y
races y sus subproductos.
Los aminocidos purificados se utilizan
nicamente en casos muy especiales en los
procesos de fermentacin, usualmente como
precursores.
Medios de cultivo de clulas animales
El suero fetal de ternera es la mayora de las veces
aplicable universalmente.
Mezclando suero fetal con otros sueros alternativos o
suplementando niveles bajos de suero fetal con medios
ricos en factores de crecimiento se han conseguido ahorros
substanciales.
El suero contiene diversos factores esenciales para el
metabolismo y proliferacin celular, incluyendo factores de
iniciacin, protenas ligadoras, factores de unin y
compuestos de peso molecular bajo.
El conocido como BME (medio basal de Eagle),
ampliamente utilizado en el cultivo de clulas de
mamferos.
Medios de cultivo para el crecimiento de clulas vegetales
La mayora de los medios de cultivo de clulas vegetales
tienen una fuente de carbono orgnico, una fuente de
nitrgeno, sales inorgnicos y reguladores del
crecimiento.
La fuente de carbono ms utilizada es la sacarosa,
tambin pueden emplearse glucosa, fructosa, maltosa y
lactosa.
La fuente ms importante de nitrgeno en el medio son
los nitratos, aunque a veces resulta beneficiosa la
suplementacin con sales amnicas.
Algunas especies de clulas necesitan nitrgeno orgnico
en forma de aminocidos.
En la mayora de los cultivos de clulas vegetales son
necesarias hormonas vegetales: auxinas, y citoquininas.
Mantenimiento del medio de cultivo
El medio para almacenamiento y subcultivo de cepas
industriales, debe ser diseado de forma que se
conserven las caractersticas del cultivo y minimicen la
variacin gentica.
En general, en el medio de mantenimiento se debe
minimizar la produccin de metabolitos txicos por el
organismo, que pueden tener efectos desestabilizantes
para la cepa.
Las cepas que tiendan a ser inestables deberan ser
mantenidas, cuando sea posible, en medios selectivos.
Para muchos cultivos celulares existen medios de
mantenimiento sinteticos.