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LA SANGRE
Es una sustancia lquida que circula por las arterias
y las venas del organismo.
De color rojo brillante o escarlata.
Transporte de:
1. Oxgeno desde los pulmones a los tejidos
2. Dixido de carbono desde los tejidos
hacia los pulmones.
3. Sustancias nutritivas desde el intestino
hacia todos los otros rganos.
4. Productos nitrogenados del
metabolismo hacia los riones y el hgado.
5. Hormonas hacia las dianas celulares.
La sangre se integra por:
1. Plasma
2. Elementos formes:
Glbulos rojos
Glbulos blancos
Plaquetas
PLASMA
Es un lquido amarillento en el cual estn
suspendidos o disueltos clulas, plaquetas,
compuestos orgnicos y electrolitos.
Su principal componente es agua alrededor de
90% de su volumen. Las protenas constituyen
9% y las sales inorgnicas, iones, compuestos
nitrogenados, nutrientes y gases el 1%.
ELEMENTOS FORMES:
ERITROCITOS
Tambin llamados hemates o glbulos rojos.
Forma: disco bicncavo de 7.5 micrmetros de dimetro, con una periferia oscura y
un centro claro.
La espectrina y la actina son protenas responsables de la forma de los eritrocitos.
Esta asociacin es la causa de la forma de los eritrocitos y tambin de su capacidad
de deformarse.
Ya maduros carecen de ncleo y organelos. Promedio de vida: 120 das.
LEUCOCITOS
Tambin llamados glbulos blancos.
Cantidad: 6,500 a 10,000 por milmetro cbico de sangre.
A diferencia de los eritrocitos, los leucocitos no funcionan dentro del torrente
sanguneo, pero lo utilizan para desplazarse.
Cuando llegan a su destino migran entre las clulas endoteliales de los vasos
sanguneos (diapdesis) , penetran en el tejido conjuntivo y llevan a cabo su funcin.
HEMATOLOGA
Rama Identificadora

Principal diferencia con la anterior es que
requiere de peritos con estudios hematolgicos
y/o bioqumicos y se realiza en laboratorio.

Orienta el peritaje a partir de rastros de sangre
levantados en el Sitio del Suceso , con la
finalidad de identificar elementos usados en el
ilcito, comprobar coartadas, homicidios,
suicidios, etc.

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HEMATOLOGA IDENTIFICADORA
Se debe estudiar:

Caractersticas macroscpicas
Examen microscpico
Estudio bioqumico
7
2.1 HEMATOLOGA IDENTIFICADORA
Caractersticas Macroscpicas

Color y aspecto


Opacidad
Coagulacin




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Charco
Laguna
Gota
Goteado
Chorreado
Salpicadura
HEMATOLOGA IDENTIFICADORA
Examen Microscpico:

Sangre lquida o seca.

La sangre humana es tan individual como
la huella digital.

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Sistema o grupo de sangre
Un grupo sanguneo es una clasificacin de la sangre de acuerdo
con las caractersticas presentes o no en la superficie de
los glbulos rojos y en el suero de la sangre. Las dos clasificaciones
ms importantes para describir grupos sanguneos en humanos son
los antgenos (el sistema ABO) y el factor Rh.

El sistema ABO fue descubierto por Karl Landsteiner en 1901,
convirtindolo en el primer grupo sanguneo conocido; su nombre
proviene de los tres tipos de grupos que se identifican: los de
antgeno A, de antgeno B, y "O". Las transfusiones de sangre entre
grupos incompatibles pueden provocar una reaccin inmunolgica
que puede desembocar en hemlisis, anemia, fallo
renal, shock y muerte.

Las personas con sangre del tipo A con glbulos rojos expresan antgenos de tipo A
en su superficie y anticuerpos contra los antgenos B en el plasma.
Las personas con sangre del tipo B con glbulos rojos con antgenos de tipo B en su
superficie y anticuerpos contra los antgenos A en el plasma.
Las personas con sangre del tipo O no tienen los dos antgenos (A o B) en la
superficie de sus glbulos rojos pero tienen anticuerpos contra ambos tipos, mientras
que las personas con tipo AB expresan ambos antgenos en su superficie y no
fabrican ninguno de los dos anticuerpos.

El sistema Rh es el segundo sistema de grupos sanguneos
en la transfusin de sangre humana con 20 a 50antgenos
actualmente. En 1940, el Dr. Landsteiner descubri otro
grupo de antgenos que se denominaron
factores Rhesus (factores Rh), porque fueron descubiertos
durante unos experimentos con monos Rhesus (Macaca
mulatta). Las personas con factores Rhesus en su sangre se
clasifican como Rh positivas; mientras que aquellas sin los
factores se clasifican RH negativas. Es comn para los
individuos D-negativos no tener ningn anticuerpo anti-D IgG
(inmunoglobulinaG) o IgM, ya que los anticuerpos anti-D no
son normalmente producidos por sensibilizacin contra
sustancias ambientales. Las personas Rh negativas forman
anticuerpos contra el factor Rh, si estn expuestas a sangre
Rh positiva.
Subgrupo de A y B.
Se diferencian por las cantidades de
antgenos A,B u O sobre los eritrocitos.
El subgrupo A se clasifican por la cantidad
de antgeno A y disminuye en el orden A1,
A2,A3 etc. Es as con los subgrupos
B3,BX,BM,BEI etc.

Clasificacin de los subgrupos
Grado de aglutinacin.
Presencia o ausencia del Anti A.
Aglutinacin con Anti H (Lecitina).
Tiempo de hemlisis

Porfirinas
Son un grupo de protenas que al combinarse con el hierro para formar al
grupo Hem, que es un pigmento rojo capacitando a la hemoglobina a captar
el oxgeno.
Las principales fbricas de porfirinas del organismo son el hgado y
la mdula sea. En sta, se sintetizan altas cantidades de grupo hemo para
producir suficiente hemoglobina, sustancia necesaria para el transporte
de oxgeno. En el hgado, el Hemo se utiliza para formar otras sustancias
que fundamentalmente sirven para desintoxicar.
Hemoglobina y sus derivados
Los valores siguientes representan el porcentaje de derivados de
hemoglobina sobre la base de la hemoglobina total:
Carboxihemoglobina: menos del 3% (pero puede ser hasta del 15%
en los fumadores) de monxido de carbono.
Metahemoglobina: menos del 3%, Es un pigmento marrn que
resulta de la oxidacin de hierro de la molcula hemoglobnica. sta
puede adquirirse o ser hereditaria y congnita, as como resultado
de la accin de agentes oxidantes como los nitritos, derivados de la
anilina, sulfonamidas, fenacetina...
Sulfahemoglobina: indetectable, a molcula sulfuro unida de
forma irreversible, lo que impide la fijacin normal del oxgeno. Se
encuentra presente en la sangre en cantidades pequesimas.

Carboxihemoglobina:
10 a 20%: comienzan a aparecer los sntomas de intoxicacin por
monxido de carbono
30%: se presenta intoxicacin grave por monxido de carbono
50% a 80%: ocasiona intoxicacin mortal por monxido de carbono
Metahemoglobina:
10% a 25%: ocasiona cianosis
35% a 40%: ocasiona dificultad respiratoria y dolor de cabeza
Superior al 60%: ocasiona letargo y estupor
Superior al 70% ocasiona la muerte
Sulfahemoglobina:
Los valores de 10 gramos por decilitro (g/dL) ocasionan coloracin azulada
de la piel debido a la falta de oxgeno (cianosis), pero no producen efectos
dainos.

Deteccin
Sangre
Cambio
de color
Reaccin
qumica
Thevenon Roland

Tetrametilbencidina
Kastle-Meyer
Adler
Leucomalaquita
Luminol
Blue Star
Inmunocromatolgicas
RSID
TM
Hexagon OBTI

ABAcard Hema Trace
En las pruebas preliminares para la deteccin de sangre, se
busca poner de manifiesto la existencia de la enzima peroxidasa
de la hemoglobina, la cual causa el rompimiento del perxido de
hidrgeno (siempre presente en estas pruebas). La liberacin
del oxigeno produce el cambio de coloracin en el reactivo
utilizado (reactivo oxidado). Un resultado positivo no garantiza
que sea sangre, existe en campo otros elementos que pueden
reaccionar con estas pruebas dando un falso positivo, adems
que un resultado positivo nos indica que es sangre y no que sea
de origen humano
PRUEBAS CATALITICAS DE LA
SANGRE
Un hisopo con una
presunta muestra de
mancha de sangre
humedecido, se pone en
contacto con una tira
Hemastix con TMB. Una
tira Hemastix es una varilla
utilizada para detectar la
presencia de sangre. Si la
tira Hemastix se vuelve de
color azul-verde, la prueba
es positiva.
Tetrametilbencidina
Kastle-Meyer
La fenolftalena es el reactivo qumico activo en
esta prueba. Se prepara a partir de 2 g de
Taleina de fenol, 30 g de potasa anhidra, 100 g
de agua destilada y 20 g de polvo de zinc, se
hierve tornndose rojo. Se aplica 2 ml de la
solucin y 2 ml de una solucin con la muestra.
Cuando la sangre, el perxido de hidrgeno, y la
fenolftalena se mezclan, se produce un color
rosa oscuro. Este cambio de color se debe a la
hemoglobina que causa una reaccin qumica
entre el perxido de hidrgeno y fenolftalena.

Es un solucin inestable por lo que hay que
evitar la oxidacin de la misma colocndolo en
un frasco obscuro y evitar que este en contacto
con el aire.
O de la bencidina: debido a que el agua oxigenada es
inestable, algunos autores proponen una solucin de 0,2 g
de perborato de sodio y 0,1 de bencidina disuelto en 10 ml
de cido glacial, si es positiva adquiere un color verde-
azulado. Si no hay cambio, aadir 1 2 gotas de agua
oxigenada concentrada, cuando la muestra contiene
peroxidasa, se debe observa un cambio de color inmediato a
azul intenso esto debe aparecer en menos 10 segundos.

Puede dar positivo a sulfocianuros, derivados del hierro, el
formol, la piedra pmez, el talco , la albmina, la arena,
frutas cidas y algunas plantas como espinacas y
zanahorias.
Prueba de Adler
cido actico, solucin alcohlica de
piramidn, y perxido de hidrgeno. Una
coloracin azul violcea indica la presencia
de sangre.


Prueba de Thevenon-Roland
o del piramidn.
Deteccin
Sangre
Cambio
de color
Reaccin
qumica
Thevenon Roland

Tetrametilbencidina
Kastle-Meyer
Adler
Leucomalaquita
Luminol
Blue Star
Inmunocromatolgicas
RSID
TM
Hexagon OBTI

ABAcard Hema Trace
Los principales componentes capaces de
catalizar esta reaccin de emisin de luz
son los metales de transicin y
peroxidasa.
?

1902.. Smicthz. Sintetiz el Luminol (quimioluminiscente).
1927.. Lummel . La quimioluminiscencia se daba despus de la oxidacin del
compuesto.
1934.. Albercht. Lo llam Luminol, la rx se daba en presencia de perxido de
hidrogeno.
1936.. Gleu y Pfannstiel. Luminiscencia en presencia de sangre (capacidad
peroxidasa de
la hemoglobina.


Los primeros experimentos realizados con el luminol como
herramienta forense se llevaron a cabo en 1937
por Spech't, y fue probado en una variedad de bases como
el csped, ladrillos, piedras o paos con sangre.

En 1951, Grodsky propuso una mezcla de polvo hecho de
compuesto de luminol, carbonato de sodio, y perborato de
sodio mezclado con agua destilada, pero el uso de
carbonato de sodio produce una lenta reaccin en el
proceso de oxidacin de la hemoglobina. Por lo tanto, no es
muy luminoso y es de breve duracin.
Por otra parte, una vez que los agentes reactivos se
disuelven en el agua, la vida de la solucin obtenida es muy
corta.
La frmula es muy inestable y txica, debido
a la presencia de perborato de sodio.

Emplea:
Carbonato de sodio
Crear soln alcalina.
Perxido de hidrgeno.
Agente oxidante.
Luminol
Sustancia a ser oxidada con la
subsecuente emisin de luz.
La sangre es el sistema peroxidasa que cataliza la rx.
El luminol es un compuesto
quimioluminiscente por lo que provoca la
produccin de luz por parte de la peroxidasa
presente en la muestra.
Se prepara mezclando 0,5 g de luminol con 25
g de carbonato de sodio, siendo esta una
mezcla estable y se guardo, es cuando se
utiliza cuando se mezcla con una solucin de
3,5 g perborato de sodio en 50 ml de agua
destilada.
Desventajas del luminol..
Perdida de diversos
marcadores genticos

Diluye muestras ya diluidas,
lo que coloca al indicio por
debajo de los lmites de
deteccin
Total obscuridad.
En el ao 2000, Blum descubri una nueva frmula a base
de luminol que eliminara todos los numerosos
inconvenientes que ste presentaba, esta nueva frmula fue
posteriormente llamado BlueStar FORENSIC.

BLUESTAR, no afecta el posterior anlisis del ADN y no
presenta ningn peligro para el operador, dado que no es
carcinognico y es biodegradable.

La reaccin dura varios minutos y es mas intensa, el reactivo
de BLUESTAR puede usarse varias veces sobre una
misma zona, sin afectar el ADN y se toman fcilmente
evidencias visibles mediante cmaras fotogrficas de tipo
estndar, lo cual elimina la necesidad de utilizar equipos
sofisticados.


MAYOR SENSIBILIDAD.

MAYOR INTENSIDAD DE LUZ .

MAYOR DURACIN DE LA
LUMINISCENCIA.

NO REQUIERE OBSCURIDAD TOTAL.

NO REQUIERE NINGN TIPO DE
EQUIPO ESPECIAL PARA TOMAR
EVIDENCIAS FOTOGRAFICAS.

NO INTERFIERE LA TIPIFICACION
DEL ADN.

ESTABLE A LO LARGO DEL TIEMPO.

NO ES TXICO.

FCIL DE USAR.

BlueStar FORENSIC
Deteccin
Sangre
Cambio
de color
Reaccin
qumica
Thevenon Roland

Tetrametilbencidina
Kastle-Meyer
Adler
Leucomalaquita
Luminol
Blue Star
Inmunocromatolgicas
RSID
TM
Hexagon OBTI

ABAcard Hema Trace
Las pruebas inmunocromatolgicas (tanto para
sangre como para semen y saliva) se basan en una
reaccin antgeno anticuerpo (sndwich anticuerpo-
antgenoanticuerpo)
Inmunocromatolgicas..
ABAcard Hema Trace
Fcil de usar.
Rpida.
Alta sensibilidad.
Detecta trazas de hemoglobina humana.

Materiales y reactivos :

1.- Inmunocromatoplacas.
2.- Un cuenta gotas y un desecante sellado dentro de cada prueba.
3.- Tubos de extraccin (buffer de extraccin).
4.- Etiquetas de identificacin.
5.- Hisopos de algodn estriles.
6.- Instrucciones.
Almacenamiento
El Kit debe almacenarse por debajo de 82 F (28 C) hasta la fecha de
vencimiento impreso en el kit de prueba. No utilice el kit despus de la
fecha de caducidad. Evite el congelamiento. Almacenado correctamente
tendr una vida til restante de al menos un ao.

Si la hemoglobina humana est presente en la muestra, reacciona con el
anticuerpo mvil de hHb y se forma un complejo mvil antgeno-anticuerpo,
este complejo migra a travs del papel absorbente hacia el rea T, en sta rea
hay un anticuerpo antihumano inmovilizado, ste captura el complejo mvil,
formndose entonces un sndwich anticuerpo-antgeno -anticuerpo. Como un
control positivo interno el conjugado anticuerpo-tinte que no se une al
anticuerpo presente en la zona T es capturado por un anticuerpo
inmovilizado presente en la zona C.


Positivo Negativo
Invlido
Pruebas de cristalizacin
Descubiertos por Teichman en 1853, son caractersticos de la sangre. La reaccin se
basa en el hecho de que, por la accin del calor, el cido actico y el cloruro de sodio
en presencia de sangre dan lugar a la formacin de clorhidrato de hematina
cristalizado.
Los cristales se presentan como prismas rmbicos alargados y pequeos. Vistos de
frente ostentan la forma de paralelogramo alargados, de bordes netos y ngulos
vivos, oscilantes entre los 60 y120 grados centgrados.
Generalmente los cristales estn aislados, pero pueden tambin agruparse, dando
lugar a formas de cruces o estrellas.
La muestra se lleva al microscopio con la solucin y se observa la formacin de los
cristales.
Un resultado negativo no es garanta de la
ausencia de sangre.
ESPECTROFOTOMETRIA
Espectrofotometra es un proceso de uso comn en el campo de la ciencia
forense para rastrear pruebas . Este proceso utiliza la radiacin infrarroja y
las luces ms comnmente visibles para determinar la transmisin de luz ,
la absorcin , y propiedades de reflexin de cualquier forma de materiales
diminutos .
Realizando una estimacin de la concentracin de los pigmentos de la
sangre, introducida en el rea forense por Hufner.
La espectrofotometra es la medicin de la cantidad de energa radiante
que absorbe o transmite un sistema qumico en funcin de la longitud de
onda; es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o
transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida
de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma
sustancia.
Aprovechada la absorcin de radiacin electromagntica en la zona del ultravioleta
y visible del espectro. La muestra absorbe parte de la radiacin incidente en este
espectro y promueve la transicin del analito hacia un estado excitado,
transmitiendo un haz de menor energa radiante. En esta tcnica es medida la
cantidad de luz absorbida como una funcin de la longitud de onda utilizada. La
absorcin de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la
estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica.
Es usado en manchas muy antiguas o cuando fallan los anteriores
mtodos de identificacin, la extraccin de las manchas se realizan
con Lauril sulfato de Sodio, en presencia de Mercaptoetanol, la
hemoglobina presenta dos picos uno de 558 nm y otro de 529 nm.