INMUNOLOGIA

DIAGNOSTICO LABORATORIAL

La inmunologa laboratorial es
el estudio del sistema inmunolgico, sus funciones y transtornos,
mediante
pruebas
sencillas y sofisticadas

La serologa es el estudio del

Sistema inmunologico utilizando
el suero de la sangre (suero es
el lquido transparente que se
separa cuando la sangre se
coagula)

Los exmenes laboratoriales

inmunolgicos y serolgicos
sirven para:

Identificacin de antgenos y/o

anticuerpos
Investigar los transtornos del
sistema inmunolgico

Prueba de aglutinacin en latex

Es un mtodo de laboratorio
cualitativo o semicuantitativo
para identificar anticuerpos o
antgenos en una variedad de
lquidos, fluidos y detritus
corporales
(suero,
saliva,
orina, lquido cefalorraqudeo,
heces)

En el examen se utiliza
partculas de ltex recubiertas
con un anticuerpo o un
antgeno especfico, si la
contraparte
(antgeno
o
anticuerpo) est presente en la
muestra
sospechosa,
las
partculas
de
ltex
se
agruparn (se aglutinan)

Prueba de aglutinacin en latex

+
Latex cubierto
con anticuerpos

Antgenos en
la muestra
problema

Reaccin
Antgeno/Anticuerpo

+
Latex cubierto
con antgenos

Anticuerpos
en la muestra
problema

Reaccin
Antgeno/Anticuerpo

Prueba de aglutinacin en latex

Tambin se puede hacer una

reaccin de aglutinacin en tubo

No reactivo
(NEGATIVO)

Reactivo
(POSITIVO)

Prueba de aglutinacin en latex

ms comunes

Factor reumatoideo, corresponde

a un conjunto de anticuerpos
fciles de detectar (Ac19S, IgM,
IgG e IgA) contra el fragmento Fc
de la IgG

El mtodo habitual detecta el

factor reumatoideo IgM hasta en
el 80% de los casos de artritis
reumatoide; es positivo con
ttulos iguales o superiores a
1/160

El FR tambin puede encontrarse

en algunos casos de LES,
esclerodermia, dermatomiositis,
rubola, lepra, malaria, y en
algunos casos, en individuos
normales

Protena C reactiva, es un tipo

especial de protena producida
por el hgado que slo est
presente durante episodios de
inflamacin aguda
Se detecta con el uso de un
antisuero (suero que contiene
anticuerpos contra la PCR)

Antgenos febriles (Reaccin de

Widal), para el diagnostico de
enfermedades infecciosas como
fiebre tifoidea, paratifoidea y
brucelosis

A partir de la segunda semana en

cualquiera de las enfermedades
mencionadas aparecen anticuerpos
en la sangre que pueden ser
identificados utilizando antgenos
especficos

Se
utiliza
antigenos:

los

siguientes

Tfico O (somatico)
Tfico H (flagelar)
Paratfico A
Paratfico B

Brucella Abortus

Titulos por encima de 1/80 o

1/120 para cualquier antgeno,
aunados a la sintomatologa y
a un hemograma caracterstico
avalan el diagnstico

Ant-Estreptolisina O, es un
antgeno cuyo ttulo alto indica
una infeccin reciente producida
por el Estreptococo hemoltico
del
grupo
A
(amigdalitis,
escarlatina, erisipela, sepsis
puerperal)

Tiene especial interes para el

diagnstico de las llamadas
segundas enfermedades como
la fiebre reumatica y la
glomerulonefritis postestreptococica

VDRL
(Venereal
Disease
Research Laboratory), RPR
(Prueba rapida de Reagina),
para el diagnstico de la Sfilis

El VRDL es como cualquier

reaccin de latex, mientras
que en el RPR se utiliza
particulas de carbn activado
para poder visulizar mejor la
aglutinacin

V. D. R. L.

No reactivo (NEGATIVO)

Reactivo (POSITIVO)

R. P. R.

No reactivo
(NEGATIVO)

Reactivo
(POSITIVO)

Inmunocromatografa
Es una de las tcnicas de
inmunodiagnstico ms modernas
cuyas principales ventajas son la
sencillez y rapidez del test, debido
a que no es necesaria una
instrumentacin adicional para su
realizacin

Fundamento del mtodo:

La muestra se pone en contacto con
la zona del conjugado, esta lleva
impregnada un dos anticuerpos
especficos contra dos eptopos del
antgeno a detectar y un reactivo de
deteccin

Inmunocromatografa positiva

Inmunocromatografa negativa

Inmunocromatografa en tira
Etapa
Inmunolgica

Etapa
de revelado

NEGATIVO

POSITIVO

Inmunocromatografa en tira

Inmunocromatografa en casette

Se utiliza para el diagnstico

de
embarazo,
diagnstico
cualitativo
de
marcadores
tumorales, hormonas, enzimas
cardacas etc.

Prueba de ELISA
Prueba de Enzimo-InmunoEnsayo, para la deteccin de
antgenos o anticuerpos

Se basa en el uso de
antgenos
o
anticuerpos
marcados con una enzima, de
forma que los conjugados
resultantes tengan actividad
tanto
inmunolgica
como
enzimtica

Al estar el antgeno o anticuerpo

marcado
con
una
enzima
e
insolubilizado sobre un soporte
(inmunoadsorbente),
la
reaccin
Ag-Ac quedar inmovilizada y con la
adicin de un substrato especifico
que actua sobre la enzima producir
un color observable a simple vista o
cuantificable mediante el uso de un
espectrofotmetro

Prueba de ELISA
Pocillos o soportes inmunoadsorbentes

Prueba de ELISA

Ac en el fondo del pocillo

Ag de la muestra problema
se une al Ac en el fondo
del pocillo

Prueba de ELISA

Se agrega el conjugado
(Ac-Enzima )

Se agrega la sustancia
reactante para producir
color

Prueba de ELISA

Se agrega una sustancia

STOP para que pare la
reaccin

Prueba de ELISA
Lector de la reaccin en los pocillos

Tipos de ELISA

Con anticuerpos marcados

ELISA Directo
ELISA Indirecto
ELISA Tipo sandwich
Con antgenos marcados
ELISA Competitivo

Las pruebas de ELISA han tomado

relive con el diagnstico del SIDA
(virus del VIH), pero se puede
utilizar para el diagnstico de
cualquier
otra
enfermedad
infecciosa y para el dosaje de
metabolitos, hormonas, marcadores
tumorales, entre otros

ELISA para HIV

Los Ac contra las protenas del HIV
pueden encontrarse en el suero
generalmente dentro de las 6 a 12
semanas tras contraer la infeccin.
Para realizar este examen se
necesita de un consentimiento
informado por parte del paciente

El examen de ELISA para HIV es

una prueba de despistaje, un
resultado positivo necesita una
reconfirmacin
con
pruebas
definitivas (Western Blot, PCR)

Existe una zona gris o indeterminada, que amerita estudios

confirmatorios en pacientes con
coductas de riesgo y en mujeres
embarazadas

Resultados de ELISA para HIV

NEGATIVO: < 0.90 Uds
ZONA GRIS (INDETERMINADO)
0.90 0.99 Uds
POSITIVO: = > 1.00 Uds

Dosaje de Inmunoglobulinas
El dosaje de Igs se puede realizar
mediante el Enzimo-inmunoensayo (ELISA) o por el mtodo
de la quimioluminiscencia que
para este caso se denomina
inmunoquimioluminiscencia

Inmunoquimioluminiscencia

Inmunoglobulina A
La IgA acta protegiendo la piel y las
mucosas frente a microorganismos
Concentraciones elevadas de IgA se
encuentra en hepatopatas crnicas,
infecciones crnicas, enfermedades
autoinmunes (artritis reumatoide,
lupus
eritematoso)
y
en
la
sarcoidosis

La IgA aumenta en los mielomas

especficos de la IgA
La sntesis de IgA disminuye en
enfermedades
de
inmunodeficiencia congnita y adquirida, en
gastroenteropatas y en grandes
quemados

Valores referenciales IgA

0 a 1 ao: 0 83 mg/dl
1 a 10 aos: 20 204 mg/dl
11 a 19 aos: 53 348 mg/dl

Adultos: 70 400 mg/dl

Inmunoglobulina E
La IgE est firmemente ligada a los
mastocitos y solo se halla libre en
el suero en pequeas cantidades
Cuando un antgeno (alrgeno)
contacta con la IgE el mastocito se
estimula y libera histamina y otras
aminas vasoactivas

Las
aminas
vasoactivas
son
responsables del aumento de la
permeabilidad vascular, contraccin
del msculo liso y en reacciones
alrgicas como fiebre del heno,
asma, urticaria y eczema

Valores referenciales IgE

0 a 1 ao: 0.00 14.90 UI/ml
1 a 10 aos: 0.00 89.90 UI/ml
11 a 15 aos: 0.00 199.00 UI/ml

16 a ms aos: 0.00 99.90 UI/ml

Inmunoglobulina G
La IgG es importante por su
actividad antiviral y antimicrobiana
Niveles elevados de IgG se
observan en hepatopatas crnicas
(hepatitis, cirrosis), enfermedades
infecciosas, lupus eritematoso y
fibrosis quistica

La IgG aumenta en el mieloma

especfico de IgG
La sntesis de IgG disminuye en
enfermedades
de
inmunodeficiencia congnita y adquirida, en
enteropatas, sndrome nefrtico y
en grandes quemados

Valores referenciales IgG

0 a 1 ao: 232.00 1411.00 mg/dl
1 a 10 aos: 453.00 1560.00 mg/dl
11 a 15 aos: 759.00 1584.00 mg/dl

16 a ms aos: 700.00 1600.00 mg/dl

Inmunoglobulina M
Se utiliza para evaluar la inmunidad
humoral, diagnstico y monitorizacin de la terapia en casos de
magroglobulinemia de Waldestrom
o mieloma de clulas plasmticas

Valores referenciales IgM

0 a 1 ao: 0.00 145.00 mg/dl
1 a 10 aos: 19.00 179.00 mg/dl
11 a 15 aos: 35.00 188.00 mg/dl
16 a ms aos: 23.00 230.00 mg/dl