COLORAO

BACTERIANA
Prof: Liliane Melo

As tcnicas de colorao iniciadas

por Paul Erlich eRobert Koch (18431910) permitiram ao microbilogo
distinguir as clulas bacterianas
quanto a sua morfologia, tamanho e
arranjo celular e diferenci-las de
acordo com as suas caractersticas
tintoriais.

COLORAO SIMPLES

COLORAO SIMPLES

Tcnica caracterstica pelo uso de

apenas um corante, permitindo a
observao da forma, tamanho e o
grupamento de clula bacteriana.

uma tcnica utilizada para deteco de

cocos
que
causam
a
meningite
( Neisseria meningitidis) em amostra de
LCR.

COLORAO SIMPLES

1)

2)

3)

Mtodo:
Preparar o esfregao bacteriano em
lmina.
Cobrir toda lmina com soluo de Azul
de Metileno, aguardar 5 min. e
desprezar o corante.
Lavar a lmina rapidamente em gua
corrente, secar, sem esfregar e
observar com leo de imerso ao
microscpio.

COLORAO GRAM

COLORAO GRAM

Hans Christian Joachim Gram

COLORAO DE GRAM
(Colorao diferencial)

Este mtodo de colorao foi

empiricamente desenvolvido pelo
bacteriologista dinamarqus, Christian
Gram, em 1884, e permite distino
entre diferentes bactrias que podem
mostrar uma morfologia similar, porm
com propriedades tintoriais diferentes.
A COLORAO DE GRAM CLASSIFICA AS BACTRIAS EM
DOIS GRUPOS: GRAM POSITIVAS E GRAM NEGATIVAS.

Parede Celular Bacteriana

Estrutura e Propriedades Tintoriais

CLASSIFICAO BACTERIANA
SEGUNDO AS CARACTERISTICAS
TINTORIAIS.
COLORAO GRAM
BACTRIAS GRAM POSITIVAS
Cocos: Staphylococcus; Streptococcus

Bacilos:
Lactobacillus;
Listeria;
Corynebacterium

CLASSIFICAO BACTERIANA
SEGUNDO AS CARACTERISTICAS
TINTORIAIS.
COLORAO GRAM
BACTRIAS GRAM NEGATIVAS

Cocos: Neisseria; Moraxella; Branhamella

Bacilos:Todos os representantes da famlia
Enterobacteriaceae (Escherichia coli;
Klebsiella spp.; Enterobacter spp.; etc.)

COLORAO GRAM
Componentes e Protocolo

Cristal Violeta

Lugol

1 min.: Mordente

Soluo lcool-Acetona (1:1)

1 min.: Corante

Descolorao Completa:

Safranina ( fucsina)

15 a 30 seg.: Contracorante (Colorao

Vermelha)

Morfologia Celular Bacteriana

Estrutura e Colorao

Morfologia Celular Bacteriana

Estrutura e Colorao

COLORAO ZIEHLNEELSEN

COLORAO ZIEHLNEELSEN

um mtodo para pesquisa de Bacilos lcool

cido Resistentes ( BAAR) ( bacilo da
tuberculose, bacilo de Hansen e micobactrias
atpicas).
Se coram inicialmente pela carbofucsina e
resistem a uma colorao por lcool-cido.
Apenas um grupo de bactria que possuem
uma parede celular constituda de lipdeos em
grande concentrao, cidos graxos de cadeia
longa, que confere a clula a caracterstica de
lcool resistncia.

COLORAO ZIEHLNEELSEN

COLETA DO MATERIAL
COLORAO ZIEHL-NEELSEN

1- Coletar a amostra, antes da antibioticoterapia.

2- Obter, de preferncia o primeiro escarro da manha
antes da ingesto de alimentos.
3- Orientar o paciente para escovar os dentes com gua
(no utilizar pasta dental) e enxaguar a boca varias
vezes, inclusive com gargarejos.
4- Respirar fundo, umas oito ou dez vezes, e tossir
profundamente, recolhendo o material no frasco de
coleta estril.
5- Quando o material produzido for escasso, coletar
amostra aps nebulizao.
6- Enviar ao laboratrio o mais breve possvel.

Tcnica:
1)
2)
3)

4)
5)
6)
7)
8)
9)

Colocar a amostra na Lmina com um aplicador de madeira.

Escolher a partcula mais densa ou uma mistura da
amostra. Deixar secar temperatura ambiente.
Cobrir a lmina com fuccina.
Com uma chama, aquecer a lmina pela sua parte interior
at emitir vapores. Repetir duas vezes at o corante
estriar.Aguardar 5 minutos no deixando o corante ferver
nem secar.
Lavar a lmina com gua corrente, suavemente.
Descorar a lmina com uma soluo de lcool-cido
clordrico, at no sair mais corante.
Lavar a lmina novamente com gua corrente.
Cobrir o esfregao com azul de metileno de Loeffler surante
30 segundos.
Lavar a lmina em gua corrente.
Deixar secar e observar ao microscpio, com a objetiva de
imerso.

FIM!