Estudo Cintico da Produo de

Etanol

Curva de calibrao verificao da biomasa

Produo de etanol
C6H12O6 2C2H5OH + 2CO2 +
energia

Consumo de acar

Microrganismo utilizado: Sacharomyces cerevisiae

Microrganismo + meio de cultura = determinam o

tipo de substncias produzidas

As leveduras promovem fermentao alcolica

Medida espectrofotomtrica obtida a partir

de espectrofotmetro (590 nm)

Finalidade: avaliar quantidades

Soluo de concentrao conhecida

0,1
M

0,2
M

0,3
M

0,4
M

0,5
M

Equao da reta
Y = a + bx
De acordo com a lei
de Lambert e Beer
A=xbxC

Preparo da soluo de concentrao

conhecida:
Pesar 1,5 g de levedura e diluir em 20mL de
gua destilada
Pegar 1 mL dessa soluo e adicionar 9 mL de
gua destilada (1:10)
Adicionar aos 10 mL obtidos 90 mL de gua
destilada (1:100)

1. Concentrao inicial da levedura

1,5 g de levedura
X

20 mL
1 mL

X = 0,075 g/mL
2. Concentrao final (na diluio 1:100)
0,075 g/mL x 1,0 mL = C2 x 100mL
C2 = 0,00075 g/mL

C2 = 0,75 g/L

Leitura da absorbncia das cinco diluies

Ponto

gua
(mL)

Soluo de
levedura

4,5

0,5

3,5

1,5

2,5

2,5

1,5

3,5

ABS

Concentra
o

Preparar as diluies em tubos de ensaio

Agitar e retirar alquota de 1 mL para ler
absorbncia no espectrofotmetro

Obtidos os valores de ABS, calcular a concentrao de

levedura em cada ponto a partir da frmula C1 x V1 =
C2 x V2

Ex.: Ponto 1

gua (mL)

Soluo de
levedura

Concentra
o

4,5

0,5

0,075 g/L

C1 x V1 = C2 x V2

0,75g/mL x 0,5mL = C2 x 5mL

C2 = 0,075g/L

Fazer o mesmo para os demais pontos e plotar dados

para a obteno da curva

Clicar em
cima da reta
com boto
direito e
escolher
adicionar
linha de
tendncia

Meio de cultura:
Sacarose;
Sulfato de amnio;
Nutrientes essenciais para o
Sulfato de zinco;
crescimento do m.o.
Sulfato de mangans;
(o meio j est pronto na
Fosfato monobsico de potssio
garrafa PET e o
pH j foi
ajustado para 4,5)

Preparo do Inculo:

- Suspender o fermento (levedura da cerveja) em 200 mL

do meio de cultura.

Depois de suspender a levedura no meio de

cultura:
Proceder a desgaseificao do meio atravs da
AGITAO VIGOROSA da garrafa para liberao de
CUIDA
DO!!!
CO2
Pesar o conjunto (garrafa PET +inculo+ meio
desgaseificado) e anotar na planilha de resultados
Retirar 1ml para determinao da Biomassa
Pesar o conjunto novamente
Fazer esta determinao no tempo inicial, e a cada 30
minutos at completar 3 horas e meia de experimento

Tempo
(min)
0
30
60
90
120
150
180
210

Peso antes
de retirar
alquota (g)

Peso depois
de retirar
alquota (g)

Dilui
o

Absorbnc
ia

Acar consumido

C6H12O6 2 C2H5OH + 2CO2 + energia

1 mol C6H12O6 2 mol CO2
180g
88g
Acar consumido(g) = (180/88) *perda de peso do
experimento
(O CO2
liberado)

Para concentrao de Biomassa

Utiliza-se a equao obtida na curva de calibrao

Ex: Y = 0,8797 X + 0,0623
ABS
Concentrao da Biomassa em g/L
OBS: multiplicar pelo fator de diluio!
Ex : se X = 0,556 e se sua diluio foi de 1:100,
ento X = 0,556*100 = 55,6 g/L