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NUCLEICOS
ACIDOS NUCLEICOS
SON POLMEROS CONSTITUDOS
POR LA UNIN MEDIANTE
ENLACES QUMICOS DE
UNIDADES MENORES LLAMADAS
NUCLETIDOS
SON COMPUESTOS DE ELEVADO
PESO MOLECULAR , ES DECIR
MACROMOLCULAS
Me parece que va a
emerger una completa
familia de estas nuclenas
que contienen fsforo que
quiz merezca igual
consideracin que las
protenas
Componentes de un nucletido:
RNA
DNA
(RNA)
(DNA)
ENLACE b
GLUCOSDICO
Rosalind Franklin
Maurice Wilkins
El RNA: ribonucletidos
CITOPLASMA
Traduccin
Exportacin
Manchas
oscuras en la
Esclertica
(Ocronosis)
Beadle y Tatum (1940): Resucitaron la idea de que los genes controlaban la produccin
de protenas. Experimento de mutantes genticos en Neurospora.
SINOPSIS DE LA TRANSCRIPCIN
35pb.
9pb.
15pb.
Sntesis de RNA
1. vinculacin de la polimerasa con el DNA
molde: Promotor (determina cul de las dos
cadenas del DNA se transcribe, y sitio). El
promotor para el reconocimiento necesita de
factores transcripcionales
2. Movimiento de la polimerasa hacia el
extremo 5 terminal y ensamblaje de una
cadena complementaria de RNA, por
incorporacin de nucletidos
3. la polimerasa incorpora alrededor de 20 a
50 nucletidos por segundo
Entre 73 y 92 nucletidos
Aparte de A,U,G,C, tiene bases raras:
Seudouridina(), Ribotimidina (T), mI
(metilinosina), Inosina (I), dimetilguanosina
(me2G),Dihidrouridina (D), metilguanosina
(meG.
Poseen secuencias de nucletidos en un
segmento de la molcula que son
complementarias de secuencias localizadas
en otras partes de la molcula.
A causa de secuencias complemntarias
todos los RNA tienen la posibilidad de
plegarse para formar estructura que semeja
una hoja de trebol
El aminocido siempre se fija en la adenina
en el extremo 3
Las bases raras se encuentran en las asas,
interrumpen formacin de puentes de
hidrgeno y sirven de sitio de
reconocimiento para diferentes protenas
La parte del RNAt que participa en la
interaccin con el RNAm se denomina
anticodn, localizado en el asa media de la
molcula. Dicha asa se compone
invariablemente de siete nucletidos y los
tres mediales forman el anticodn.
Los aa. se unen al RNAt por accipn de la
sintetasa de aminoacil RNAt
SINTESIS DE PROTENAS
1.
2.
3.
4.
5.
Mtodos de
identificacin
ELECTROFORESIS EN GELES
O2
DNA
Fuente de
poder
Micrograph of Agarose
small
large
Fuente de
poder
ELECTROFORESIS EN GELES
Fuente de poder
Buffer de corrida:
Buffer de carga:
Equipo de Electroforesis
Fuente de poder
Tapa
Cables elctricos
Bandeja
Peines para el gel
DNA
buffer
Lugar de inicio
Ctodo
(negativo)
nodo
(positivo)
Migracin
del ADN
Nota: El azul de
bromofenol migra
aproximadamente a la
misma velocidad que
una molcula de ADN
de 300 pb.
Azul de bromofenol
+
2,000
1,650
1,000
850
650
500
400
300
200
100
Tcnicas BLOTTING
Blotting technique
Professor Sir Edwin Southern
Southern Blot
Northern Blot
Western blot
Southern Blotting
2. La mezcla compleja de
fragmentos es colocado el
gel de electroforesis para
la separacin de
fragmentos de acuerdo a
su tamao.
probe).
La sonda hibridiza al fragmento de restriccin
complementario.
Southern Blotting
Southern Blotting
Fusin
95C
Hibridizacin
50-60C
Extensin de
La cadena
75C
2do Ciclo
95C
50 - 60C
75C
Primer Ciclo
Si repetimos el ciclo, tendremos cuatro copias
Mltiples ciclos darn un incremento exponencial en el nmero de copias
Taq Thermus aquaticus, Pwo Pyrococcus woesei, Pfu Pyrococcus furiosus, Tli Thermococcus
littoralis)