Dra.

Alicia Pomata Gunsett

2014

Qu es el Genoma Humano?
Human Genome
Project
25000 genes en 44
XX/XY

Clula humana

Ncleo

Cromosomas

Una Muestra del Genoma Humano

Centrmero

Cromosoma 5

Genes: Guardianes del Cdigo

Sitio de inicio

Sitios de empalme

Sitio de detencin

Promotor Exn 1 Intrn Exn 2 Intrn Exn 3

Extremo de 5

Extremo de 3
Exn 1 Exn 2 Exn 3
ARNm

Regiones No Codificadas

Regulacin de la
expresin gentica y
otras simplemente
actan como
espaciadores
Gen 1

Protena 1
Regin no codificada
Protena 2

Gen 2
Exn
Intrn no
codificado

Region no codificada

Replicaci
n

DOGMA
CENTRAL DE
LA BIOLOGA
MOLECULAR

Procesado de ARN Antes de la Traduccin

ADN

Exn

Intrn

Exn

Intrn

Exn

Transcripcin

ARNm primario
Procesado
ARNm maduro
Traduccin
Protena

Genes para ARNm para Protenas

Ribosoma
Ncleo de
la clula
Cadena de
protena
creciente
ARNm

Protena
nica
C
G
G
A

ARNm

G
C
C
U

G
C
C
T

Seccin del
gen activado.

El Cdigo de Tripletes
Un codn est compuesto de 3 nucletidos de ARNm
64 codones en total

El codn (AUG) 61 codones codifican a

codifica a la
20 aminocidos
metionina y
(cdigo redundante)
empieza la
traduccin de
todas las protenas

AUG

Metionina

GCA

Alanina

3 codones detienen
la traduccin de
protenas

UAA

UAG

UGA

El Instituto Nacional de Cncer admiti

que la biologa de los ms de 100
tipos de cncer ha demostrado ser
mucho ms compleja de lo que se
crea.
Otis Brawley, de la Sociedad Americana
del Cncer, dice: Un tumor es ms
inteligente que 100 brillantes
cientficos del cncer.

Carcinognesis es un proceso que

consta de mltiples fases producidas
por daos genticos y epigenticos que
son inducidos por un carcingeno en
clulas susceptibles las cuales
adquieren una ventaja de crecimiento
selectivo y sufren expansin clonal
como resultado de la activacin de
proto-oncogenes y/o inactivacin de
genes supresores de tumores.
(Cancer Res. 51, suppl 18:5023s-5044s. Sep. 15,1991)

Dos mecanismos por los cuales los genes pueden alterarse:

GENTICO donde se producen alteraciones estructurales del genoma por

cambios en la disposicin de los propios genes o de sus bases, como ser las
mutaciones, translocaciones o deleciones.

EPIGENTICO en acciones moleculares por alteraciones de las enzimas o de

los sustratos de las mismas, tal el caso de la metilacin de las bases.
Susceptibilidad al cncer: Citocromo p 450 mono-oxigenasa; Glutatin-transferasa
y Acetil-transferasa.

EL CANCER ES UNA ENFERMEDAD GENOMICA

La Epigentica implica un
cambio de la clula o de su
estado de expresin gnica
en respuesta al medio
ambiente, y que no se debe
inmediatamente a una
alteracin del ADN genmico.

Las clulas responden al estrs mediante cambios

epigenticos
Por hipermetilacin (desactivacin) de los genes
supresores de tumores implicados en la paralizacin del
ciclo celular, la apoptosis y la reparacin del ADN.
Por hipometilacin (activacin) de los proto-oncogenes
asociados con la actividad persistente de proliferacin; y
la desmetilacin del genoma, la activacin del ADN se
repite y provoca la inestabilidad del genoma.

Cambios Epigenticos:

Promotor de
metilacin

Deaminacin
espontnea

Exn 1

Absorcin de UV
aumentada

Enlance carcinognico
aumentado

Exn 2

Silenciamiento de
genes de reparacin

Inestabilidad
microsatlite

G
A
mutaciones

C
T
mutaciones

CC
TT
mutaciones

G
T
mutaciones

CAMBIOS GENTICOS

Translocacin
Mutacines
Insercin
Amplificacin
Delecin
Duplicacin o prdida total
de un cromosoma (aneuploida)

Mutaciones

Una mutacin es un cambio en la secuencia normal de pares de

bases

comnmente usada para definir los cambios en

la secuencia del ADN que alteran la funcin de
la protena

Mutaciones Puntuales

ADN
Normal

Mutacin de
aminocido

Insercin de cambio en
marco de lectura

Supresin de cambio
en marco de lectura

Mutacin terminadora

ARNm

Mutaciones del Marco de Lectura

FRAMESHIT

Normal
ARNt
Protena
Metionina

Lisina

Fenilalanina

Glicina

Cambio en marco
de lectura
ARNt
Protena
Metionina

Lisina

Leucina

Alanina

Alanina

Leucina

Glutamina

Mutaciones del Sitio de Empalme

ADN Exn 1 Intrn Exn 2 Intrn

ARNm
alterado

Exn 1

Exn 3

Exn 2 Exn 3

ADN Exn 1 Intrn Exn 2 Intrn

ARNm
alterado

Exn 1 Exn 3

Exn 3

Mutaciones Reguladoras

Expresin normal
Protena Her2

Sobreexpresin
Protena Her2

ARN
mensajero

Cromosoma 17
Gen Her2

Amplificacin del gen Her2

SNPs: Variantes Genticos Que Ocurren Frecuentemente

polimorfismos

La mayora de la poblacin Por lo menos un 1 % de la poblacin

GaC

Sitio SNP
Secuencia
comn

Secuencia
variante

Protena funcional

Protena funcional

Supresiones o Inserciones Grandes

Teido del cromosoma SKY: cncer de mama

Los cromosomas SKY

normales no son
multicolores.
Los cromosomas en el
cncer de mama aparecen
con multicolores debido a
que ellos han
intercambiado material
gentico.

Ejemplo: Translocacin de Genes BcrAbl

9

9
(q+)

Ph
22
bcr

(22q)
bcr-abl

abl
Protena de
fusin con
actividad
tirosina
quinasa

Mutaciones: Somtica
y de Lnea Germinal

Mutaciones somticas
Ocurren en los tejidos no de
lnea germinal
Son no heredables

Mutaciones de lnea germinal

Presente en vulo o
espermatozoide
Son heredables
Causa sndrome familiar
de cncer

No heredable

Mutacin somtica
(p.ej., seno)

Mutacin en
Todas las clulas
vulo o
afectadas en la
espermatozoide
progenie

cncer espordico

cncer hereditario

Los Tumores Son Clonales

Clula normal

Primera
mutacin
Segunda
mutacin
Tercera
mutacin
Cuarta o
posterior
mutacin

Clulas malignas

Clon

Mutaciones Somticas

Clula normal de
pulmn

Clula normal
de islote
Muchos aos ms tarde

Clula cncerosa
de pulmn

Clula diabtica de
islote

La Carcinognesis se divide en etapas:

1. Iniciacin
2. Promocin
3. Progresin

iniciador

promotor
CNCER

CNCER

NO CNCER

10 billones a 100 billones

Resulta de una alteracin gentica

irreversible, probablemente a partir de
una o ms mutaciones simples,
transversiones, transiciones y/o
pequeas supresiones de ADN

El compuesto qumico implicado en

este proceso se le denomina agente
iniciador o carcingeno incompleto.
Las clulas iniciadas tienen un dao
gentico permanente sostenido el cual
es transmitido a su progenie.

El dao celular inducido por un

carcingeno no debe ser tan severo
que incapacite a la clula para replicar
su ADN y llevar a cabo la divisin
celular.

Despus de una ronda de replicacin,

el dao en el ADN se "fija" y por lo
tanto es permanente.

Las clula iniciadas no son neoplsicas

pero tienen un riesgo mayor de
volverse neoplsicas bajo
circunstancias apropiadas.

El proceso de promocin involucra la

produccin y el mantenimiento de una
proliferacin celular sostenida

Esta proliferacin incluye una

combinacin de replicacin celular
incrementada y una muerte celular
disminuida (falla en la prdida
apopttica celular).

Dependiente de la presencia continua

del estmulo promotor: el crecimiento
no es autnomo durante esta fase.

Aunque los promotores no son

mutagnicos, mutaciones adicionales
pueden llegar a ocurrir porque las clulas
en rpida divisin son genticamente
inestables y porque algunos promotores
promueven la produccin de radicales
libres e inician dao celular oxidativo.

Lo anterior puede daar el ADN y las

enzimas que participan en la replicacin y
reparacin del ADN.

Alteracin en el aparato Mittico

Trastorno en la funcin de los telmeros,
Hipometilacin del ADN,
Recombinacin, amplificacin y transposicin
gnica.

Puede ocurrir
espontneamente
debido a la
inestabilidad
cariotipica o
puede ser
acelerado por la
exposicin de
elementos
genotxicos

Protooncogenes

Genes supresores
tumorales

Genes normales que participan en

Genes normales que bloqu
algn aspecto de la proliferacinel ciclo celular
celular. Al mutarse, se activan en
forma anormal ONCOGEN

Daos del ADN

Reparacin daos

Crecimiento Celular Normal: El Ciclo

Celular

Se muestran 2 pares homlogos

G1 (crecimiento celular)

M (mitosis)
Oncogenes

G2

Genes
supresores
de tumor

Genes
reparadores
de ADN
S (sntesis)

Incapacidad para Reparar

Agente Que Causa Dao

Rayos X
Luz UV
Rayos X
Radicales
Hidrocarburos
Agentes
de oxgeno
policclicos antitumorales
aromticos (cis-Pt, MMC)
Agentes
alquilantes
Reacciones
espontneas
G
G

Errores de
replicacin

T
C
T
T

Uracilo
(6-4)PP
Sitio
CPD
absico
aducido
B-oxoguanina voluminoso
Ruptura de
cadena individual

Consecuencias

Arresto de
ciclo
celular
(transiente
)

C
T

Cruzamiento
A-G
ligado
mal apareamiento
intracadena
T-C
Ruptura de mal apareamiento
la doble
Insercin
cadena

Inhibicin de:
Transcripcin
Replicacin
Replicacin
de cromosoma

Apoptosis
(muerte
de la
clula)

Supresin

Reparacin Reparacin de Reparacin

Reparacin de
de escisin
escisin
de
mal
de base
nucletida
recombinacin apareamiento
(BER)
(NER)
(HR, EJ)

Proceso de Reparacin

Mutaciones
Aberraciones
cromosmicas

Cncer
Envejecimiento

Enfermedad
congnita

CARACTERSTICAS DE LA CLULA TUMORAL

(FENOTIPO MALIGNO)

Proliferacin descontrolada (aumentada) e

indefinida
Ciclo celular
Oncogenes
Genes supresores tumorales
Envejecimiento celular
Supervivencia prolongada (Evade el proceso de
apoptosis)
Invade territorios vecinos y forma colonias
(metstasis)
Induce y mantiene la angiognesis
Evade el sistema inmunitario

2 clases de genes vinculados con el cncer

PROTOONCOGENES: Alteran de forma positiva el crecimiento

y proliferacin de las clulas

GENES ONCOSUPRESORES: Alteran de forma negativa el

crecimiento y proliferacin de las clulas

Gen anormal o activado que procede de la mutacin o

activacin de un gen normal llamado protooncogen (genes
reguladores)

Responsables de la transformacin de una clula normal

en una maligna que desarrollar un determinado tipo de
cncer

60 oncogenes en diferentes cromosomas del genoma

La activacin de un protooncogen y su
transformacin a un oncogn se produce por
mutaciones ocasionadas por:

CAUSAS FSICAS.- Radiaciones ionizantes

CAUSAS QUMICAS.- Carcingenos
CAUSAS BIOLGICAS.- Virus oncognicos
CAUSAS HEREDITARIAS.- Mutaciones transmitidas a
lo largo de generaciones o por fallo en alguno de los
mecanismos de reparacin del ADN.

Los mecanismos por los que un protooncogen

puede ser transformado en un oncogn son:
CUANTITATIVOS: Insercin de un promotor viral,

translocacin o reordenacin cromosmica,

amplificacin e hipometilacin .
CUALITATIVOS: Mutacin puntual, delecin del material

gentico.

MUTACIN PUNTUAL: Sustitucin de una base nitrogenada

en el ADN de un gen, puede producir un cambio en el
aminocido identificado por el codn que presenta la
mutacin.
Cambio estructural en la protena sintetizada
Oncogn ras: modifica un codn que convierte glicina

en valina
Puntos donde ser produce la mutacin.- Crecimiento
celular
Mutacin impide la conversin de la forma activa a
inactiva
Alteracin en el control de la proliferacin celular.

Delecin del material gentico: Prdida de material

gentico que activa a un oncogn. La prdida puede ser:
Secuencia inhibitoria de un protooncogen, provoca:

aobreexpresin de oncogn
Oncogn quede cerca de la secuencia promotora,

provocando su sobreexpresin
Prdida de un gen supresor tumoral, con activacin de

un oncogn.

Crecimiento Celular Anormal: Oncogenes

Genes
normales
(regulan el
crecimiento
celular)

N
C
E
R

1a. mutacin
(conduce a
divisin celular
acelerada)

N
C
E
R

Protooncogen a oncogen

ONCOGEN

CNCER

H-RAS

Cncer de colon, pulmn y pncreas

K-RAS

Leucemia mieloide aguda, cncer de tiroides y

melanoma

B-RAF

Cncer de tiroides y melanoma

L-MYC

Cncer de pulmn

NEU

Neuroblastoma, Cncer de mama

N-MYC

Neuroblastoma

RET

Cncer de tiroides

SRC

Cncer de colon

v-fos

Osteosarcoma

V-jun

Sarcoma

abl

Leucemia mieloide crnica

erb-B

Carcinoma espinocelular

Protenas codificadas por los oncogenes: Factores de

crecimiento, receptores de factores de crecimiento,
receptores hormonales y segundos mensajeros.

Mutaciones en Genes Supresores de Tumor

Genes supresores de tumor

N
C
E
R

Genes normales
(regulan el
crecimiento
celular)
Genes supresores de tumor

Oncogen activo

1a. mutacin
(portador
susceptible)
Sin frenos!
2a. mutacin o
prdida
(conduce al
cncer)
Sin frenos!

N
C
E
R

N
C
E
R

N
C
E
R

Oncogen activo

Hiptesis de los Golpes Dobles

Sin cncer

Mutacin de lnea germinal

Mutacin somtica

Cncer

Si el primer golpe es
una mutacin de lnea
germinal, la segunda
mutacin somtica
tiene ms probabilidad
de permitir el
cncer

Gen que reduce la probabilidad de que una clula en un

organismo multicelular se transforme en una clula
cancergena.

Clulas normales: inhiben proliferacin celular excesiva

Mutacin o delecin: Aumenta riesgo de cncer

Regulan negativamente el ciclo celular

Gen supresor tumoral alterado = ONCOGEN

Efecto inhibitorio en la regulacin del ciclo celular

Regulan crecimiento, diferenciacin celular y la muerte

celular programada (apoptosis) = Oncogenes

Rb: Fue la primera protena supresora tumoral descubierta

en el retinoblastoma humano

p53: Es un importante gen supresor llamado tambin "el

guardin del genoma".

BRCA1: Ejemplo de gen supresor de tumores que tiene

relacin con cnceres de mama, ovario, endometrio,
estmago y prstata

Guardin del genoma

Brazo corto del cromosoma 17 (17p13)

Codifica un factor de transcripcin protena nuclear de 53

kDa

Induce la respuesta celular ante el dao del ADN

Detiene el ciclo celular en caso de mutacin

Papel importante en: Apoptosis y control del ciclo celular

p53 defectuoso : permite que clulas anormales

proliferen= CNCER

50% de los tumores humanos contienen mutacin en p53

Fosfoprotena formada por 393 aa. y 3 dominios:

DOMINIO DE ACTIVACIN DE FACTORES DE TRANSCRIPCIN
DOMINIO RECONOCEDOR DE LA SECUENCIA ESPECFICA DEL

AND (CENTRAL)
DOMINIO CARBOXILO TERMINAL (C-)

Detiene el ciclo celular en el punto de control G1/S

Dao en el ADN = Evita su replicacin

Activa protenas de reparacin del ADN, cuando hay dao

o mutacin

Inicio de apoptosis si el dao en el ADN es irreparable

Evita as la proliferacin de las clulas que contienen ADN

anormal

APOPTOSIS
= Muerte celular programada
= Suicidio celular

ocurre durante

Morfognesis
Renovacin tisular
Regulacin del sist.
inmunitario

Termino griego = cada de las hojas de un rbol o de

los ptalos de una flor
Para definir el tipo de muerte
celular programada
genticamente

Mecanismos que la regulan son esenciales para el desarrollo

y mantenimiento de la homeostasia
Las clulas crecen por la expresin de nuevos genes

Inducen seales de muerte

en estadios como la diferenciacin y
respuesta a estmulos determinados

APOPTOSIS
Se desencadena por:

Seales

Fisiolgicas
Exgenos ambientales

Actan sobre receptores de

superficie
= activacin en cascada de
protenas citoplasmticas

Activa nucleolisis
(por endonucleasas)

CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS
DE LA APOPOSIS
Clula apoptotica:
Proceso pasivo
No requiere de sntesis proteica
Causada por perdida de hemostasia
Caracteriza por :
Dao mitocondrial
Rotura de membrana
Lisis celular
Liberacin del contenido al medio
extracelular

Figura 2.2.6.
Apoptosis.
Esquema
comparativo con
necrosis.
Arriba, clula
normal. A la
izquierda, signos
de
necrofanerosis;
a la derecha,
cambios
nucleares de la
apoptosis con
cuerpos
appticos.
Ntese la
conservacin de
organelos en
apoptosis

RECEPTORES DE MEMBRANA CELULAR QUE MEDIAN APOPTOSIS

Ag
que induce apoptosis
(CD95)

FAS o APO-1

Protena transmembrana tipo II glicosilada

Se expresa en tejidos normales y lneas tumorales
Mutaciones en el gen

trastornos linfoproliferativos

(por su incapacidad de producir

apoptosis)
Es miembro de la superfamilia de los FNT (expresado
en linfocitos activados)

FAMILIA DE GENES Bcl-2

Proto-oncoge

Bcl-2 (B cell leukemia/lymphoma 2

genes)
asocia a procesos malignos de cel B

Durante la maduracin de las cel. B

Traslocacion crom.14 en el gen bcl-2

en la expresin de la protena citoplasmtica
Bcl-2
Inhibe apoptosis en
cel.B
supervivencia de la clula
transformada
Posibilidad de que progrese a malignidad

Susceptibilidad al Cncer:
Todava Se Desconoce Mucho

Otras Mutaciones Asociadas Con El

Cncer: Todava Se Desconoce Mucho
Cules Mutaciones
Estn Involucradas?
(cont.)
Clula
cancerosa
Receptor
Endotelio de
vasculatura de tumor
en el pulmn

Diseminacin
Adherencia de
clulas del
tumor

Fijacin como blanco

Endotelio

Penetracin

Extravasacin
Metstasis

Pared capilar
Metstasis del pulmn

Colonizacin

Metstasis del hgado

Mutaciones
Sistema inmunolgico
suprimido
Metstasis del hueso

Inestabilidad

Cromosomas

Supresin Inmune

Un Reto Intimidante

Receptor
HER-2/NEU

Factor de
crecimiento
Gen Her2

Receptor de crecimiento
presente
Alto riesgo de
recada o recidiva
No es buen candidato
para la terapia
convencional
Genes de susceptibilidad
mutados
Marcadores
vasculares
presentes