ENZIMAS

Dra.EMMA GUERRERO HURTADO

DEFINICION

Son catalizadores biolgicos de

naturaleza proteica sintetizados por las
clulas que pueden actuar fuera de ellas
acelerando la velocidad de las reacciones
llevndolas rpidamente a su posicin de
equilibrio

IMPORTANCIA

Mantienen la Homeostasia: Regulacion

Catalizan procesos metablicos que detoxifican el

organismo

Durante estados patolgicos, para seguir el curso de

una enfermedad

En enfermedades congnitas

Produccin de frmacos

ENZIMAS COMO FRMACOS

Naclens enzimas
principio activo Subtilisina. digiere los depsitos de
protena adheridos a la superficie de la lente
procedentes del metabolismo corneal y de la lgrima.
Mecanismo

bioqumico: hidrlisis de enlaces

peptdicos del depsito de protena adherida que al
quedar fragmentada se dispersa solubiliza en la
solucin.

ENZIMAS SERICAS

DIAGNOSTICO

Aspartato Transaminasa

Infarto del miocardio

Alanina aminotransferasa

Hepatitis viral

Amilasa

Pancreatitis aguda

Ceruloplasmina
Degeneracin hepatolenticular
(Enfermedad de Wilson)
Creatinfosfoquinasa
miocardio

Transtornos

musculares

Fosfatasa Acida

Carcinoma Metastsico de la Prstata

Fosfatasa Alcalina

Enf. Oseas, trastornos hepticos obstructivos

Y Glutamil transpeptidasa

Enfermedades hepticas

Lactato deshidrogenasa

Infarto de miocardio

infarto

de

DISTRIBUCION-FUNCIONES

PROPIEDADES
1.

Eficiencia cataltica: con nmeros de recambio del

orden de 108 s-1-10 12 s-1 (numeros de moles de S transformados por mol de
enzima por segundo)

Especificidad
E. de reaccin :100% de rendimiento
Ahorra E
No productos txicos
2.

Especificidad: para el sustrato

E. Stereoqumica: actan sobre un esteroismero
del sustrato ejm:
D aminocido oxidasa

Especificidad Absoluta:

COOCH
CH
COOFumarato
(trans-)

H2O

COOHO CH
CH2
COOL-Malato

Enzima:
Fumarato hidratasa

Especificidad Baja:

R CO O R' + H2O

R COOH + HO R'
Esterasa

Las carboxilesterasas hidrolizan todo tipo de steres, independientemente de la naturaleza de R o R

3. Disminuyen la Energa de Activacin

Energa libre de
activacin para llevar
todas la molculas
de una sustancia a
una T determinada
al estado de
activacin

MODELO COMPARATIVO DE LA DISMINUCIN DE LA ENERGA

DE ACTIVACIN POR LA ACCIN DE LA ENZIMA.

Enzima

Substrato

1) La reaccin no se
produce pues hace
falta una energa de
activacin para que
transcurra
espontneamente.
2) La enzima disminuye
o elimina la energa de
activacin necesaria y
la reaccin transcurre
espontneamente.
Producto

Energa libre de activacin para

llevar todas la molculas de una
sustancia a una T determinada
al estado de activacin

Descomposicin de H2O2
sin catalizador
Con catalizador inorgnico (platino)
con un enzima especfico (catalasa).

Ea Kcal/mol.
18
12
6

El platino acelera la reaccin 20.000 veces, mientras que la catalasa la acelera

370.000 veces.

4.

Transforman diferentes Clases de Energa

5.

No alteran el equilibrio de una reaccin:

10-6 /seg
A

B
10-8/seg

k=B =10-6 =100

A 10-8

HAYA O NO HAYA ENZIMA

6.

Actividad Sujeta a Regulacin

REGULACION ALOSTERICA

REGULACION HORMONAL
EFECTO DE LA MODIFICACIN COVALENTE

7.

A partir de 1982, se sabe que no todas las enzimas son

protenas; existen molculas de RNA con actividad
cataltica, llamadas ribozimas

8.

La mayora son de naturaleza proteica, de estructura

tridimensional globular

9.

pueden ser monomricas u oligomricas

Enzimas monomricas (PM)
Lisozima

14 600

Papana

23 000

tripsina

23 800

Enzimas Oligomricas(S u)
Fosforilasa a

Hexoquinasa

F. difosfatasa

10. Muchas necesitan de un cofactor para ser activas

Cofactores enzimticos

PROPORCIONAN
GRUPOS ACTIVOS

COFACTORES
COORDINAN CON
EL S Y LA E

PARTICIPAN
EN LA REACCIN

COENZIMAS

FUNCIN EN EL
MECANISMO

NAD

Cosustrato

FAD
TPP
PLP
Biocitina
THF
CoA
Coenzima B12
A. Lipoico

G. Prosttico
G. Prosttico
G. Prosttico
G. Prosttico
Cosustrato
Cosustrato
G. Prosttico
G. Prosttico

NOMENCLATURA:
Nombre sistemtico:
ATP: glucosafosfotransferasa E.C.2.7.1.2.

Nombre trivial: hexoquinasa

E.C.2.7.1.2.

2: transferasa
7: fosfotransferasa
1: el aceptor es un grupo OH
2: es un OH de la D-glucosa el que acepta el
grupo fosfato.

CLASIFICACIN DE ENZIMAS

Clases
1. xido-reductasas
2. Transferasas
3. Hidrolasas
4. Liasas
5. Isomerasas
6. Ligasas

Clase 1: OXIDORREDUCTASAS
Catalizan reacciones de transferencia de hidrgeno (H) o
electrones (e-) de un sustrato a otro
AH2 + B

Ared + Box

A + BH2

Aox + Bred

Clase 2: TRANSFERASAS
Catalizan la transferencia de un grupo qumico (distinto del
hidrgeno) de un sustrato a otro:

A-B +

A + C-B

Clase 3: HIDROLASAS
Catalizan reacciones de hidrlisis

3.1.-.- Esterasas (carboxilesterasas,

fosfoesterasas, sulfoesterasas)
3.2.-.- Glicosidasas
3.3.-.- ter hidrolasas
3.4.-.- Pptido hidrolasas
3.5.-.- Acil anhdrido hidrolasas

clase 4: Liasas
Remueven o aaden los elementos del agua amoniaco CO2

A-B

A + B

Ejm adicin de agua a un doble enlace:

COOCH
CH
COOFumarato
(trans-)

H2O

COOHO CH
CH2
COOL-Malato

Clase 5: ISOMERASAS
Catalizan la interconversin de ismeros:

Interconversin
aldosa-cetosa

H
OH

OH
H

interconversiones a nivel de C

H
H

Clase 6: LIGASAS
Catalizan la unin de dos sustratos con hidrlisis
simultnea de un nucletido trifosfato
A + B + XTP

A-B + XDP + Pi

Centro activo
Comprende.
un

sitio de unin formado por los

aminocidos que estn en contacto
directo con el sustrato y
un

sitio cataltico, formado por

aminocidos directamente implicados
el mecanismo de la reaccin

los
en

CENTRO ACTIVO
Sitio de unin: da la especificidad a la enzima

Sitio
cataltico

EL MODELO LLAVE-CERRADURA

Substrato y enzima se acoplan de forma estereospecfica, de la

misma manera que una llave se ajusta a su cerradura.

MODELO DEL AJUSTE INDUCIDO

Tanto la enzima como el substrato sufren una alteracin en

su estructura por el hecho fsico de la unin

La teora del Ajuste Inducido se ampla en la actualidad

definiendo la accin enzimtica como:

Estabilizacin del Estado de Transicin

Segn lo cual, el Centro Activo ES COMPLEMENTARIO

al estado de transicin.

EN EL ESTADO DE TRANSICIN LAS INTERACCIONES

ENTRE LA ENZIMA Y EL SUSTRATO SON PTIMAS

FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD

DE LAS ENZIMAS
Efecto De La Temperatura

37

Efecto del pH
1. Sobre la fijacin del substrato al
centro activo:
- Grupos disociables de la
enzima
- Grupos disociables del
substrato
2. Sobre la transformacin cataltica
del substrato
3. Sobre la estructura de la protena
enzimtica

Los enzimas poseen grupos

qumicos
ionizables
(carboxilos -COOH; amino
-NH2; tiol -SH; imidazol, etc.) .

Segn el pH del medio, estos

grupos pueden tener carga
elctrica

Como la conformacin de las

protenas depende, en parte,
de sus cargas elctricas,
habr un pH en el cual la
conformacin ser la ms
adecuada para la actividad
cataltica Este es el llamado
pH ptimo.

Efecto del pH

NH
-

COO

H3N

Arg

NH

CH2

CH

CH2
COO+

H3N

Lys
CH

Succinato y
centro activo de SDH
pH 7

NH
COOH

H 3N

NH

CH2

CH

CH2
COOH
+

H3N
CH

Succinato y
centro activo de SDH,
pH 2

NH
C
COO-

H 2N

NH

CH2

CH

CH2
COOH 2N
CH
Succinato y
centro activo de SDH,
pH 13

Efecto la concentracin de sustrato

Los centros activos de las molculas de enzima estn llenos de sustrato

Efecto del tiempo de incubacin

Producto formado

TI

Efecto de la concentracin de enzima

(E)

 Presencia de inhibidores

ZIMOGENOS

se sintetizan como protenas precursoras sin actividad

enzimtica..

Para activarse, sufren un ataque hidroltico que origina la

liberacin de uno o varios pptidos.

El resto de la molcula proteica adopta la conformacin y

las propiedades del enzima activo.

Ej.:
quimotripsina, que se sintetiza en forma de
quimotripsingeno

ZIMOGENOS

se sintetizan como pro-enzimas.

Se activan por hidrolisis, liberndose
uno o varios pptidos.
El resto de la molcula proteica
adopta
la
conformacin
y
propiedades del enzima activo.

* Activacin del Pepsingeno

- El pepsingeno es una protena de masa molecular 40 kDa que se

autohidroliza (Desdobla) al bajar el pH (2), eliminndose un
naturaleza bsica de 44 AAs del extremo N-terminal.

pptido de

SISTEMAS MULTIENZIMTICOS
Varias enzimas diferentes cuyas acciones se complementan.

ENZIMAS MULTIFUNCIONALES
Presentan varios sitios catalticos
distintos en una misma cadena
polipeptdica.

APLICACIONES CLINICAS
FUNDAMENTO
la medicin de actividades enzimticas en plasma se basa en
que los cambios en los niveles de enzimas plasmticas
reflejan cambios que han tenido lugar en un tejido u rgano
especfico, tras una agresin en forma de cualquier proceso
patolgico.

La proporcin variable de diferentes enzimas de tejido a

tejido, combinado con un estudio de la cintica de aparicin y
desaparicin de determinadas enzimas en el plasma, permite
un diagnstico de la implicancia de un rgano

TIPOS DE ENZIMAS PLASMTICAS

E.P. Especificas del plasma

De mayor concentracin circulante con un

papel

funcional en ste

incluyen trombina, plasmina y lipoprotena lipasa.

Generalmente sintetizadas en hgado, pero tambin se

encuentran en la sangre en concentraciones equivalentes
o mayores que en los tejidos.

E.P.Inespecficas

sin funcin conocida en la sangre

Presentes normalmente a niveles muy bajos

tienen su origen en la destruccin rutinaria normal de los

eritrocitos, leucocitos y otras clulas

son ms importantes en las enfermedades de tejidos y

rganos.

Incluyen :

Enzimas exocrinas
amilasa pancretica, lipasa, fosfatasa alcalina y
fosfatasa cida prosttica
Difunden en forma pasiva al plasma.

Enzimas intracelulares
normalmente ausentes de la circulacin.

ALTERACIONES DE LA CONCENTRACIN ENZIMTICA EN

SUERO.
Aumento de la actividad enzimtica

(a). Incremento patolgico de la permeabilidad

de membrana
(b). Muerte y destruccin celular
(c). Induccin enzimtica
(d). Proliferacin celular
El ejercicio intenso tambin da por resultado la liberacin de
cantidades importantes de enzimas musculares: CPK, GOT,
GPT, LDH, aldolasa.

ALTERACIONES DE LA CONCENTRACIN ENZIMTICA

EN SUERO,

Disminucin de la actividad enzimtica

(a). Intoxicaciones
(b). Enfermedades crnicas
(c). Alteraciones del estado nutritivo

ISOENZIMAS

Enzimas que catalizan la misma reaccin, pero que

se desplazan de forma diferente en electroforesis.

El mecanismo de formacin supone el ordenamiento

de subunidades que provienen de dos loci*
genticos diferentes en distintas combinaciones
para formar la enzima polimrica activa.

Creatn fosfo quinasa o CPK

Dmero con dos tipos de subunidades: M y B.

En cerebro, desde el punto de vista electrofortico son

del mismo tipo B.

En el msculo esqueltico, ambas son del tipo M.

Despus de una lesin al cerebro o al msculo la CQ es

liberada a la sangre, pero no del hgado
CH3
N

HN

CH2 COOH

NH2
Creatina

ATP

CH3

ADP

N
HN

CH2 CO

NH2

O
O

P
O-

Creatin fosfato

O-

+
MM

La CK se presenta en forma de tres

isoenzimas
especficas de tejido:
- Forma MM (msculo esqueltico)
- Forma MB (msculo miocrdico)
- Forma BB (cerebro)

MB
BB

La isoenzima MB es un marcador
precoz de infarto de miocardio. Un nivel
muy elevado es mal pronstico

Segn la electroforesis:
CPK1 (BB) "rpida
CPK2 (MB) "intermedia"
CPK3 (MM) "lenta".

La CPK2 no debe superar el 6% de la

CPK total. Su valor normal varia con el
mtodo usado y oscila entre 10-50
UI/Lt. a 30C.

LACTATO DESHIDROGENASA
LDH
Enzima tetramrica que contiene solo dos subunidades distintas:
H del corazn y M del msculo.

Estas dos subunidades se combinan de cinco formas diferentes:

LDH1

HHHH Miocardio y eritrocito

LDH2

HHHM

Miocardio y eritrocito

LDH3

HHMM

Cerebro y rion

LDH4

HMMM

Hgado y msculo esqueltico

LDH5

MMMM

Msculo esqueltico

En suero normal la concentracion

oscila
entre
100-200
UI/L
distribuida
de
la
siguiente
manera:
LDH1

HHHH

20-40%

LDH2

HHHM

25-45%

LDH3

HHMM

10-25%

LDH4

HMMM

0-12%

LDH5

MMMM

0-12%

Anlisis densitomtrico del gel

Normalmente,
la actividad
de la
isoenzima
LDH2 es
mayor que la
de la LDH1

orig
en

Diagrama
electrofortico

CPK SE ELEVA RAPIDO PERO BREVEMENTE

6-18 h
618

HIDROXIBUTIRICO DESHIDROGENASA AUMENTA

LENTAMENTE, PERO PERSISTE EN MS TIEMPO,
MIENTRAS QUE LDH LO HACE EN MENOR MEDIDA.

Despus 6-18h
del infarto se
libera CPK2 a la
sangre
la
liberacin
de
LDH se retrasa
1-2 das.;
la actividad de la
LDH1 supera a
LDH2
en
el
mismo
momento en que
los niveles de
CPK2 , vuelven
a la lnea de
base
(48-60
horas).

Transaminasas

En clnica se determinan las siguientes:

EC 2.6.1.1, Aspartato aminotransferasa

(AST, GOT)
EC 2.6.1.2, Alanina aminotransferasa
(ALT, GPT)

Aspartato aminotransferasa, EC 2.6.1.1 (AST, GOT)

COO-

COO+

H3N CH

C O
+

CH2
-

COO

Aspartato

CH2
CH2
COO-

-Cetoglutarato

COOC O
CH2
COOOxalacetato

COO+

H3N CH

CH2
CH2
COOGlutamato

Aparece en citosol y mitocondrias

tejidos metablicamente muy activos.

de

Su nivel se eleva en el suero ante

Alanina aminotransferasa, EC 2.6.1.2 (ALT, GPT)

COO-

COO+

H3N CH
CH3
Alanina

C O
+

CH2
CH2
COO-

-Cetoglutarato

COOC O
CH3
Piruvato

COO+

H3N CH
CH2
CH2
COOGlutamato

Enzima citoslica, de elevada concentracin en el parnquima

heptico. Se considera casi especfica de lesin heptica.

Fosfatasa cida, EC 3.1.3.2

O
R O P O- + H 2 O
O-

O
R OH + HO P OO-

Hidroliza fosfomonosteres con baja especificidad. Presenta

varias isoenzimas, una de las cuales (Fosfatasa cida prosttica)
es un marcador muy fiable del cncer de prstata y que se
emplea en el diagnstico precoz del mismo.

Fosfotasa Acida o Fac

Normalmente con valores inferiores a 1,5

Bodansky. En unidades interacionales, la
fosfatasa cida total no debe sobrepasar las
11 mU/ml y la "prosttica", 4 mU/ml.

El
hecho
de
que
las
cifras
sean
sensiblemente iguales en la mujer y
e hombre nos habla a favor de que,
fisiolgicamente, el origen de esta fosfatasa
no es la de prstata, sino del hgado y bazo
probablemente.

Patolgica mente:
El hallazgo de cifras
fosfatasa acida suele
sinnimo de carcinoma
metastatizado

elevadas de
darse como
de prstata

los nodulos prostticos malignos, ,

incluso algunos casos de hipertrofia
prosttica benigna o de prostatitis, la
liberan con valores ms discretos.

En enfermedades seas de otro

origen
pueden
registrarse
elevaciones de la fosfatasa cida:

hiperparatiroidismo
primario
y
metstasis
carcinomatosas
de
diversas procedencias

En la enfermedad de Gaucher y en
la de Niemann-Pick.

En embolia pulmonar y en otras

lisis
plaquetarias
(trombosis,
trombocitopenia por destruccin,
no por aplasia).

En hemopatias malignas: leucemias

mieloides o linfoides o crnicas, en
anemia
megaloblstica,
anemia
hemoltica, policitemia etc.

Fosfatasa alcalina, EC 3.1.3.1

O
R O P O- + H 2 O

O
R OH + HO P O-

O-

O-

Hidroliza con baja especificidad fosfomonosteres,

a un pH alto No se conoce con certeza cul es su
funcin metablica.
Aparece en gran cantidad de tejidos.

Es varias veces ms alta en

nios y adolescentes, alcanzando
las actividades
del adulto aproximadamente a los
25 aos.
Los valores son ligeramente
mayores en
hombres que en mujeres hasta
los ltimos aos de vida. En los
hombres adultos,
los lmites superiores del
intervalo
de
referencia
no
cambian con la edad, mientras
que en las mujeres los lmites
superiores del intervalo de
referencia aumentan con la
menopausia.

Efectos de la edad y el sexo sobre los lmites de referencia superiores para

fosfatasa alcalina

La fosfatasa alcalina presenta varias isoenzimas:

- sea
- Heptica
- Intestinal
- Placentaria

Las ms importantes son las dos primeras. Se Pueden

Distinguir por su termoestabilidad, la sea ms
termolbil.
sea: Propia del tejido seo en crecimiento y de
enfermedades que cursan con neoformacin sea
Heptica: Propia de las clulas del rbol biliar: se eleva
en las colestasis (obstrucciones biliares) asociada a
partculas de elevado peso molecular

La cifra media normal es de 1,5 a 5 U

Bodansky.

Aumenta
en
los
perodos
crecimiento y reparacin sea

Durante el embarazo aumenta la

fosfatasemia hasta valores 3 veces
superiores
al
final
del
primer
trimestre normalizndose luego de las
6 semanas del parto

puede persistir un ligero aumento

durante todo el perodo de lactancia.

de

Aumentos patolgicos:

Ictericia obstructiva, que determinan

elevaciones
notables
de
forma
caracterstica por su constancia, dato
de valor diferencial frente a la
parenqumatosa.

En neoplasias de las vas bilares, de

modo constante y marcado en el
ampuloma, puede faltar ictericia o ser
intermitente,

Een la obstruccin intraheptica por

cirrosis biliar primaria.

En
hiperparatiroidismo
primario
(enfermedad de ReckIing-Hausen), donde
los valores alcanzados son superiores, a
veces, a 50 o 60 U Bodansky.

En la enfermedad de Paget u ostetis

deformante,
donde
la
fosfatasemia
alcanza valores mximos, hasta 200 U
Bodansky.

En distintas neoplasias seas: en el

carcinoma osteolitico metastsico y en
casos con metstasis hepticas

En el cncer de prstata con metstasis

seas,
aunque
aqu
predomina
especialmente
la
elevacin
de
la
fosfatasa acida.

En algunos casos de mieloma mltiple.

En raquitismo, con ligeros aumentos en

los casos leves y mucho mayores (60 U
Bodansky o ms) en las formas graves.

En otros procesos seos tales como

fracturas en cicatrizacin o en sfilis sea
suelen haber aumentos discretos.

Factores que afectan la actividad de fosfatasa alcalina adems de la lesin

heptica.

Disminucin
fosfatemia

de

la

En hipo fosfatasia.
En hipotiroidismo infantil, con o
sin cretinismo.
En
escorbuto, excepto en la
calcificacin de hemorragias.
En enfermedad celiaca.
En acondroplasia

g-Glutamil transferasa, EC 2.3.2.2 (GGT)

GSH + aa

-Glu-aa + Cys-Gly

Tiene un importante papel en el transporte de aas

a travs de membranas.
Aparece, como la fosfatasa alcalina, en
obstrucciones biliares asociada a fracciones de
alto peso molecular.
Es una enzima inducible, y su concentracin en
suero Aumenta con xenobiticos (alcohol, drogas,
etc.)

Efectos de la edad y el sexo sobre el lmite de referencia superior para g-Glutamil

Transferasa (GGT). El lmite de referencia superior para hombres entre 25-35 aos
de edad es establecido como 1.0 unidades de valor relativo. Los lmites de
referencia superiores de GGT aumentan a lo largo de la vida, con el efecto ms
marcado en las mujeres que en los hombres.

Factores que afectan la gGT aparte de la lesin heptica

Amilasa

Existen dos isoenzimas de la amilasa: la

"P" o pancretica, que pasa ms
fcilmente a la orina y la "S" o salival,
ms rpida en la electroforesis.

Normalmente existe una proporcin de

las isoenzimas P (40%) y S (60%).

Aumentos DE AMILASEMIA :
En pancreatitis agudas como hallazgo
caracterstico, excepto en los casos de
necrosis fulminante, que no permiten
la elevacin de la amilasemia.

En pancreatitis secundarias a hepatitis

agudas por virus, lo cual tiene valor
para diagnosticar esta complicacin.

En lcera gstrica penetrante en

pncreas.
con
aumentos
mucho
menores que en pancreatitis aguda.

En
distintos
procesos
abdominales
parapancreticos:
gastritis,
lcera
duodenal perforada, peritonitis, etc., hay
discretas elevaciones de amilasemia.

En traumatismos pancreticos y en
obstruccin del conducto pancretico o del
esfnter de Oddi por litiasis o carcinoma.

En la parotiditis, sobre todo si es bilateral,

generalmente entre el 5 y 7 da de
enfermedad. A veces, el aumento se
exagera por participacin pancretica.

La
litiasis
salival
con
obstruccin
determina tambin hiperamilasemia.