Laboratorio N 5

ESPECTROSCOPA DE
ABSORCIN MOLECULAR

Introduccin
METODOS ESPECTROSCPICOS
Son Mtodos analticos que utilizan tcnicas instrumentales en la cuales
se genera una seal de tipo ptico cuyo fundamento esta basado en
la interaccin de la energa (REM) con el analito, para as obtener su
concentracion.
Fenmenos que pueden ocurrir al interaccionar energa con la materia:
ABSORCIN

DISPERSIN

DIFRACCIN

EMISIN

de la radiacin electromagntica

Los mtodos espectroscpicos son consideradas uno de los mtodos

mejores y mas utilizados para la determinacin tanto cualitativa como
cuantitativa.

ULTRAVIOLETA-VISIBLE

Mtodos Espectroscpicos
METODOS DE ABSORCION

M h M *

Absorcin
Es el proceso en el cual la radiacin
electromagntica es transferida a los
tomos, iones, o molculas de la
muestra causando la transicin o salto
de estas partculas desde un estado
basal a un estado excitado.

LEY DE LAMBERTBEER
Medida de la
Absorbancia y
Transmitancia

ABSORBANCI
A

A Cl
POTENCIA HAZ
INCIDIDO

En funcin de
longitud de onda

POTENCIA HAZ
TRANSMITIDO

Coeficiente de extincin
o de absortividad

Instrumentacin

Espectrofotmetro de absorcin molecular

COMPONENTES BSICOS DE EQUIPO DE ABS. MOLECULAR

ESQUEMA DE EQUIPO DE ABS. MOLECULAR

Espectro de Absorcin Molecular

ESPECTROS DE ABSORCIN MOLECULAR
IDENTIFICACIN
DE ESPECIES

ABS.

INFORMACIN
CUANTITATIVA

A Cl

CONC.

Cuantificacin en anlisis por absorcin

*ESPECTRO DE ABSORCON

En el espectro de
absorcin, cual es la
longitud de onda que
debo elegir?

Al mximo de absorcin
a determinada longitud
de onda, se le denomina
longitud de onda
analtica

RECIPIENTE: Consiste en una cubeta que permite

el paso de REM sin absorberla o desviarla.

CUBETAS

ABSORCIN MNIMA A LA LONGITUD DE ONDA DE TRABAJO

1.
2.
3.

Vidrio ordinario o slice (VIS).

Slice fundida o cuarzo (UV).
NaCl, NaI, etc (IR).

A Cl
Ley de Lambert :

A l (C constante)

Ley de Beer :

C ( l constante)

ABSORBANCIA

Relacin entre Absorbancia y

Concentracin

CURVA DE CALIBRADO
SIMPLE

CONCENTRACIN

Cuantificacin en anlisis por absorcin

*CURVA DE CALIBRADO

Y mX b

Y mX b

Se le determina la absorbancia
a la longitud de onda analtica
a una serie de solucin de
concentracin exactamente
conocida.
(*)Regresin lineal.

A (l)C b

Cuantificacin en anlisis por absorcin

*INTERPOLACON DE LA MUERTA PROBLEMA

A
Abs
mp

A4
A3
A2
A1

Abs M.P - b
----------------m

= Conc M.P

x
x
x

C1 C2 C3 C4

C
Concentracin mp

Se interpola en la recta
previamente realizada con los
estndares.

Cuantificacin en anlisis por absorcin

*ADICION ESTANDAR

Mtodo de cuantificacin que se realiza cuando la muestra puede

presentar interferentes que absorban a la misma longitud de onda que
nuestro analito.
Se utiliza para disminuir efecto de matriz.
A la muestra problema se le adiciona
cantidades crecientes de patrn a
determinar y se determina su absorbancia
a la longitud de onda analtica

A
A2
A1
A0 x

x
x

Y mX b

C0

C1 C2

b
y 0 ; X
m

Laboratorio 5
Espectroscopa de absorcin molecular

Determinacin

de permanganato (MnO4-)

Curva de calibracin
Adicin patrn

1) Obtener el Espectro de Absorcin

Determinacin de longitud de onda analtica

Realizar barrido ente 500-600nm

500

600

Realice los clculos necesarios para preparar 50

mL de disolucin 0,01M de KmnO4 a partir de una
disolucin patrn de 0,1M. Tome la alcuota con
pipeta aforada y enrase con agua destilada.

Muestra de 0,01 M 5 alicuotas de distintos ml

y se aforan a 25 ml :

Dilucion:

C1 V1 = C2 V2

Se debe realizar la siguiente tabla:

AFORO
KMnO4 0,01 M
Concentracin
en 25 ml
Absorbancia

 Regresion Lineal y obtenemos y= mx +b

II. Determinar concentracin

muestra problema KmnO4

Analizar si corresponden factores de dilucin y realizar

la siguiente tabla :
AFORO

MP KmnO4

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

Patrn 0,01 M
KmnO4

0,25

0,4

0,55

0,7

Concentracin M
KmnO4
Absorbancia

Adicin Estndar
Adicin patrn

0.8
0.7
0.6

f(x) = 1.53x + 0.32

R = 1

0.5
Abs 0.4
0.3
0.2
0.1
0
0

0.05

0.1

0.15mM
[MnO4-]

0.2

Realizar regresin lineal y as obtener

y=mx+b

0.25

0.3

Cuantificacin por adicin patrn

Adicin patrn

Abs

-0.3

0.8
f(x) = 1.53x +0.7
0.32
0.6
R = 1
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
-0.2
-0.1
0

0.1

0.2

0.3

0.4

[MnO4-] mM

Como en la valoracin del Aforo n1 , no existe volumen de patrn , la

absorbancia obtenida corresponde a la de la muestra problema, por lo
tanto , debemos desarrollar la ecuacin obtenida anteriormente :
Y= mx + b
x y b obtenidos por los grficos
Asi obtenemos la concentracin de la muestra problema * ( factores de
dilucin si es que hay.)

APLICACIONES EN ABSORCIN MOLECULAR

INFORMACIN
CUANTITATIVA

Determinacin
de metales

Determinacin de
sustancias
orgnicas

Determinacin de
sustancias
coloreadas