INMUNOCRO

MATOGRAFA
Alicia E. Nez Llanos
10100025

INMUNOCROMATROGRAFA
La

inmunocromatografa es un tipo de prueba de

interaccin primaria que se utiliza en ensayos
sencillos y de lectura rpida.
Se basa en la migracin de una muestra a travs
de una membrana de nitrocelulosa por accin
capilar.
En esta prueba uno de los componentes est
marcado con nanopartculas coloreadas, por
ejemplo con metales pesados (oro o selenio
coloidal, generando bandas de color rosa o azul
respectivamente).

La reaccin se lleva a cabo sobre una tira de un

material poroso (por ejemplo, nitrocelulosa). En
las tiras reactivas se pueden distinguir 5 zonas:
1. Zona de siembra de la muestra
2. Zona del conjugado
3. Zona de deteccin
4. Zona de control
5. Regin absorbente

ZONA DEL CONJUGADO

Formado por un anticuerpo especfico (marcado con oro
coloidal) contra uno de los eptopos del antgeno a detectar y
un reactivo de deteccin.
ZONA DE CAPTURA
Formada por un segundo anticuerpo especfico (inmovilizado en el
papel cromatogrfico) contra otro eptopo del antgeno.
ZONA DE CONTROL
Formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de
deteccin.

PROCEDIMIENTO
La muestra con el Ag a analizar se coloca en la zona de siembra, y
fluye por capilaridad hasta la zona del conjugado, en donde el Ac
especfico marcado (conjugado) se encuentra inmovilizado.

Al pasar la muestra solubiliza al conjugado, y en caso de haber Ag en la

muestra forma inmunocomplejos, estos siguen migrando lateralmente
hasta la zona de deteccin, en la cual se hallan fijados a la membrana
Acs especficos contra otro epitope del Ag, de manera que los
inmunocomplejos son fijados en esta zona de deteccin, formando una
banda coloreada, rosa o azul dependiendo del metal utilizado en el
conjugado.
La muestra fluye por capilaridad hasta la zona de control. Aqu el
exceso de conjugado es capturado por un Ac anti-conjugado,
formndose una banda coloreada tanto si el Ag est presente en
la muestra como si no lo est.
Finalmente el resto de la muestra es absorbida en la regin
absorbente.

LECTURA DE RESULTADOS
POSITIVO.- solo aparece la
lnea control.

NEGATIVO.- Aparecen ambas

lneas control y prueba.
INVALIDO.- No aparece
ninguna de las dos lneas
solo aparece la lnea de
prueba.
Lnea de control (C): La lnea debe aparecer siempre sin importar la presencia de anticuerpos
Ehrlichia canis. Si no aparece esta lnea, debe considerar la prueba como no vlida. Y deber
ser repetida.
Lnea de prueba (T): La presencia de anticuerpos Ehrlichia canis determina la presentacin de
la lnea de prueba.

VENTAJAS / DESVENTAJAS

Buena
sensibilidad
Mayor rapidez y
fcil
interpretacin.
No requiere de
reactivos .
Se utilizan
pequeos
volmenes de
muestra.

Baja especificidad.
Son cualitativos, se
informan como
"negativo" o "positivo" y
los resultados deben
confirmarse por otra
metodologa.
El costo de las tiras
reactivas y los
accesorios pueden ser
elevados.

APLICACIN
TEST DE EMBARAZO.- detectar la
gonadotrofina corinica.
TEST DE TROPONINA I.
TEST SOBRE EL VIH.
MEDICINA VETERINARIA.- detectar
antgenos (Virus de la leucemia felina,
parvo y rotavirus, parsitos y bacterias) o
anticuerpos (anticuerpos anti- virus de la
leucemia felina).