Tcnicas

Espectroscpicas

GLEIDY MALLMA VILCA

Introducci
n

Las tcnicas espectroscpicas utilizan la

medida de los efectos que produce la interaccin de
las radiaciones electromagnticas con la materia
Miden la radiacin absorbida , emitida , transmitida ,
dispersada o reflejada con
diferentes mtodos.

RADIACIN ELECTROMAGNETICA
Las radiaciones electromagnticas son
un conjunto de corpsculos, los fotones,
que llevan asociada una onda.

Radiaciones Electromagnticas

Longitud de onda

(nm)

Ciclo

E=h

Frecuencia
(Ciclos/s)
(Hz)

= C/

E= h x C/

TCNICAS ESPECTROSCPICAS

Ley de Lambert- Beer

Absorbancia

En funcin de la concentracin
de la muestra

A= cl

ESPECTROFOTO
METRIA

Espectrofometra

Espectro
spectrum Imagen,
fenmeno, vista.

foto

photo Luz

metra

metron Medida,
instrumento

Instrumento que se utilizan para medir la absorcin

de luz por las disoluciones.

Tipos de
espectrofotmet
ro

computadora

computadora

Componentes del
espectrofotmetr
o

Fuentes
Las lmparas incandescentes y los lseres son los tipos de
fuentes de luz que se emplean en los espectrofotmetros. La
fuente de luz que ms se ha utilizado para las medidas en la
regin visible del espectro (360-950 nm) ha sido la lmpara de
wolframio

Lmpara de
deuterio e
hidrgeno.
Para las medidas en la
regin ultravioleta (220360 nm), se utilizan las
lmparas de descarga de
hidrgeno o de deuterio.

Selectores de longitud de onda

Es la parte ms importante del equipo, determinando en gran parte su
calidad. Son dispositivos que filtran el espectro producido por la fuente,
dejando "pasar" slo radiaciones en un rango de longitud de onda
determinada.

REFRACCIN

Cubetas
Es un pequeo tubo de seccin
circular o cuadrada, sellado en un
extremo, fabricado en plstico,
vidrio o cuarzo y diseado para
mantener las muestras durante los
experimentos de espectroscopia.
Las cubetas deben ser tan claras o
transparentes como sea posible, sin
impurezas que puedan afectar a
una lectura espectroscpica.

Detector
Convierte la energa radiante en una seal elctrica.

Muestra

Funcionamiento

INTERFERENCIAS EN LAS DETERMINACIONES

ESPECTROSCPICAS
Interferencias estticas
Las
producen
sustancias
presentes en el espcimen que
no
experimentan
variacin
durante la reaccin analtica. Los
ejemplos ms tpicos de estas
interferencias en los laboratorios
clnicos son la ictericia, la lipemia
y la hemlisis.

Interferencias
cinticas
Sustancias presentes
en el
espcimen que reaccionan
con algn componente de
la mezcla de reaccin. La
importancia relativa de la
contribucin
de
esas
sustancias depende del
tiempo de reaccin y de la
concentracin
de
las
mismas.

MEDIDA DE SUSTRATOS POR MTODOS DE

ABSORCIN MOLECULAR
MTODOS DE PUNTO
FINAL
Se incuba la muestra y el reactivo
durante un tiempo determinado y a
una temperatura determinada para
que se complete totalmente la
reaccin, de tal forma que la sustancia
que buscamos debe consumirse
totalmente. Si no fuera as y quedase
parte de la sustancia sin consumir, al
medir
el
producto,
estaramos
midiendo menos cantidad de la que
realmente hay. Por lo tanto se mide al
final de un tiempo fijo de incubacin.

MTODOS CINTICOS

En ellos se mide la velocidad de la reaccin mediante la medida de la

variacin de la Absorbancia en el tiempo y esto se relaciona con la
concentracin. Es una medicin continua, a diferencia de la del punto
final, se mide en tiempos regulares. Se puede medir la cantidad de
sustrato no transformado la cantidad de producto formado

linealidad
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin

TURBIDIMETRIA
Y NEFELOMETRIA

TURBIDIMETRA
Mide el descenso de la
luz transmitida a travs
de la disolucin
particulada a
consecuencia de su
dispersin por las
partculass

Turbidimetra:
Medicin de la disminucin de la luz
transmitida a travs de una solucin.

Aplicaciones
Monitoreo del
crecimiento de
cultivos bacterianos

Contenido de
macromolculas

La determinacin de
aminocidos, vitaminas y
antibiticos.

Control de calidad
de agua, bebidas y
productos
alimenticios

Reacciones de
precipitacin

Nefelometra

Correlacin entre turbidez y solidos suspendidos

solucin

light scatter

source of light

NEFELOMETRA

detector

Monitorea la luz reflejada por las partculas y no

a la disminucin a causa de la turbidez

APLICACIONES