Professional Documents
Culture Documents
VALIDACIN DE MTODOS
MICROBIOLGICOS
Mtodos
cualitativos
Mtodos
cuantitat
ivos
Exactitud
Presicin
Especificidad
Lmite de deteccin
Lmite de cuantificacin
Linealidad
Intervalo operativo
Robustez
Repetibilidad
Tolerancia
Parmetros de la validacin
USP XXXVI.2013
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
Recuento de
de
microorganismos
totales
Sensibilidad
Repetibilidad +
Precisin
intermedia
Especificidad
Lmite de
cuantificacin
Inclusividad
Rango
Recuento de
microorganismos en
medio
selectivo/diferencial
Repetibilidad +
Precisin intermedia
Lmite de
cuantificacin
Rango
Incertidumbre de Incertidumbre de la
Exclusividad
International Standard ISO. Draft EN ISO/CD
16140-1. 2011.
la medicin
medicin
Microbiology of food and animal feeding stuffs - Method
validation - Part 1: Terminology of method.
Robustez
Sensibilidad
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
Mtodos
cualitativos
Parmetros de la
validacin
Mtodos
cuantitativos
alternat
ivo
nuevo
alternati
vo
nuevo
Campo de aplicacin
Especificidad
Sensibilidad
Exactitud
Exactitud relativa
Repetibilidad
Lmite de deteccin
Lmite
determinacin
Conformidad
estadstica
de
X
X
X
X
Tasa
de los falsos
Guide pour la validation de mthodes dessais microbiologiques
et lvaluation
de leur incertitude de mesure dans
X
X
les
domaines
de
la
microbiologie
alimentaire
et
de
lenvironnement.
Document
N
328.fw Edition fvrier 2006, rv.
positivos
01. Dpartement fdral de lconomie DFE. Secrtariat dEtat lconomie SECO. Service daccrditation suisse
SAS
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
International Standard ISO. Draft EN ISO/CD 16140-1. 2011. Microbiology of food and animal feeding stuffs Method validation - Part 1: Terminology of method.
Gua para la validacin de mtodos microbiolgicos. Organismo Argentino de Acreditacin. DC-LE-08. 2011.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
International Standard ISO. Draft EN ISO/CD 16140-1. 2011. Microbiology of food and animal feeding stuffs Method validation - Part 1: Terminology of method.
Gua para la validacin de mtodos microbiolgicos. Organismo Argentino de Acreditacin. DC-LE-08. 2011.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
International Standard ISO. Draft EN ISO/CD 16140-1. 2011. Microbiology of food and animal feeding stuffs Method validation - Part 1: Terminology of method.
Gua para la validacin de mtodos microbiolgicos. Organismo Argentino de Acreditacin. DC-LE-08. 2011.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
International Standard ISO. Draft EN ISO/CD 16140-1. 2011. Microbiology of food and animal feeding stuffs Method validation - Part 1: Terminology of method.
Gua para la validacin de mtodos microbiolgicos. Organismo Argentino de Acreditacin. DC-LE-08. 2011.
USP XXXVI. 2013.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
VALIDACIN
PRIMARIA:
tiene
por
objetivo
evaluar
o
mejorar
el
desempeo
del
mtodo
en
el
laboratorio.
Los resultados de diferentes analistas
y laboratorios se comparan entre s o
con los valores de referencia asignados.
Nmero limitado de muestras en una
matriz bien definida.
Puede permitir la evaluacin de la
robustez del mtodo, la claridad de los
procedimientos escritos y la posibilidad
de uso ms amplio.
Method Validation of U.S. Environmental Protection Agency Microbiological Methods of Analysis. EPA Forum on
Environmental Measurements (FEM) Microbiology Action Team. FEM Document Number 2009-01 October 7, 2009.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
VALIDACIN
objetivos:
SECUNDARIA:
tiene
por
con
el
Method Validation of U.S. Environmental Protection Agency Microbiological Methods of Analysis. EPA Forum on
Environmental Measurements (FEM) Microbiology Action Team. FEM Document Number 2009-01 October 7, 2009.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
ROTOCOLO DE VALIDACIN
Captulo
Contenido
Ttulo
Objetivo
Campo de
aplicacin
Mtodo de
ensayo
Equipamiento
Personal
Materiales
Materiales a emplear
Reactivos y
medios
Muestras
Desarrollo de la
validacin
Resultados
Registros, tablas
Anlisis
Rodrguez Martnez C. 2010. Validacin
de mtodos
microbiolgicos
alternativos.
Curso pre-evento. XV Convencin
Anlisis
a Cuba.
aplicar
para cada
parmetro
Cientfica
de
Ingeniera
y
Arquitectura.
ISPJAE.
estadstico
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
FASE I
Por el laboratorio
organizador
FASE II
Inter-laboratorio
De 5, 8 a 15
laboratorios con
resultados vlidos
International Standard ISO 16140. 2003. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Protocol for the validation
of alternative method.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
MATRICES
Sin
contamina
cin
Naturalme
nte
contamina
das
Procesados (estresados):
por desecacin
por calor
por pH
por bajas temperaturas
por aw
Artificialmente
contaminadas
Prioridad en el tipo:
1. Artificialmente
contaminadas por
mezcla
2. Artificialmente
contaminadas por
inoculacin
3. Materiales
certificados
Rodrguez Martnez C. 2010. Validacin de mtodos microbiolgicos alternativos. Curso pre-evento. XV Convencin
Cientfica de Ingeniera y Arquitectura. ISPJAE. Cuba.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
ESTUDIO NO
PAREADO
(MUESTRAS NO
CASADAS, DATOS
NO PAREADOS)
Ambos mtodos no
tienen un primer
paso comn
International Standard ISO. Draft EN ISO/CD 16140-1. 2011. Microbiology of food and animal feeding stuffs Method validation - Part 1: Terminology of method.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
Idealmente:
10
muestra
s
positivas
5 niveles,
mnimo:
10
muestra
s
negativa
pero
como
s
Niveles:
1. Ausen
cia
2. Bajo
3. Medio
4. Alto
International Standard ISO. Draft EN ISSOCD 16140-2. 2011. Microbiology of food and animal feeding stuffs Protocol
for the validation of alternative method Part 2: Protocol for the validation of alternative (proprietary) methods
against a reference method.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
VP + VN
(VP + FP + VN +
FN)
International Standard ISO. Draft EN ISO/CD 16140-1. 2011. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Method
validation - Part 1: Terminology of method.
International Standard ISO. Draft EN ISO/CD 16140-2. 2011. Microbiology of food and animal feeding stuffs
Protocol for the validation of alternative method Part 2: Protocol for the validation of alternative (proprietary)
methods against a reference method.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
International Standard ISO. Draft EN ISO/CD 16140-1. 2011. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Method
validation - Part 1: Terminology of method.
International Standard ISO. Draft EN ISO/CD 16140-2. 2011. Microbiology of food and animal feeding stuffs
Protocol for the validation of alternative method Part 2: Protocol for the validation of alternative (proprietary)
methods against a reference method.
Gua para la validacin de mtodos microbiolgicos. Organismo Argentino de Acreditacin. DC-LE-08. 2011.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
NDICE KAPPA
Los resultados de los ensayos cualitativos son
analizados para comprobar la concordancia.
a=2x
((VP x VN) (FN x FP))
[(VP + FP ) x (FP+VN)] + [(VP + FN) x (FN + VN
International Standard ISO. Draft EN ISO/CD 16140-1. 2011. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Method
validation - Part 1: Terminology of method.
International Standard ISO. Draft EN ISO/CD 16140-2. 2011. Microbiology of food and animal feeding stuffs
Protocol for the validation of alternative method Part 2: Protocol for the validation of alternative (proprietary)
methods against a reference method.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
de
Y=PD +
ND
PERFIL
DE
EXACTITUD.
ESTUDIO
DE
PERFIL
DE
EXACTITUD.
ESTUDIO
DE
COMPARACIN DE MTODOS
COMPARACIN
DEtipos
MTODOS
i nmero de
de muestras (1 i 6)
j nmero de rplicas (1 j 4)
Xi log del resultado del mtodo de referencia
Zi log del resultado del mtodo alternativo
Para cada muestra las mediciones se
ejecutan bajo condiciones de repetibilidad.
Se asume distribucin normal de los
resultados.
Intervalo de aceptabilidad
c1
c2
cn
2 c1 ln
c2 ln
.... cn ln
c ln
R1
R2
Rn
c
R
Volumen de
muestra
Recuento 1,
UFC/ placa
Recuento 2,
UFC/ placa
Recuento 3,
UFC/ placa
Volumen
relativo Vri
0,2 ml
46
45
46
0,1 ml
16
16
16
0,2 ml
44
44
44
0,1 ml
18
18
18
0,2 ml
45
46
46
0,1 ml
16
16
16
0,2 ml
45
45
45
0,1 ml
18
18
18
Rodrguez Martnez C. 2010. Validacin de mtodos microbiolgicos alternativos. Curso pre-evento. XV Convencin
Cientfica de Ingeniera y Arquitectura. ISPJAE. Cuba.
Documento propiedad del autor. Prohibida su reproduccin por cualquier medio para fines distintos a la imparticin de este curso sin la aprobacin de su autor por escrito.
OTROS PARMETROS
Reproducibilidad
Repetibilidad
Sesgos
Rango
Proporcionalidad
Robustez
Rudeza
Selectividad Real
Selectividad aparente