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INVESTIGACIN

SALMONELLA

IDENTIFICACIN
BIOQUMICA

Permite la identificacin genrica de los


cultivos de Salmonella y eliminacin de
cultivos sospechosos falsos

CARACTERISTICAS
El genero Salmonella es de la familia
Enterobacteriaceae , bacilos Gram Negativos,
aerobios y anaerobios facultativos producen
cido a partir de la glucosa.

METODO TSI LIA Y MIO


Se toman 2 colonias aisladas sospechosas y se transfiere a los
tubos:

TSI: siembra en picadura al fondo y estriado en la superficie


LIA: Por picadura al fondo y estriado en superficie
MIO: Por picadura al fondo y estriado en superficie
INCUBAR POR 24h a 35C

RESULTADOS TSI
SUPERFICIE (Rojo=alcalino ; Amarillo=cido)
Superficie roja/fondo amarillo: el microorganismo solamente fermenta la
glucosa. *
Superficie amarilla/fondo amarillo: el microorganismo fermenta glucosa,
lactosa y/o sacarosa.
Superficie roja/fondo rojo: el microorganismo es no fermentador de azcares.
La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el
microorganismo produce gas.
El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce cido
sulfhdrico.*

Las Salmonella dan la siguiente reaccin sobre TSI:


Alcalina (rojo) en la superficie inclinada.
Acida (amarillo) en el fondo.
Con o sin produccin de SH2: (ennegrecimiento o no del medio)

*Solo fermenta Glucosa

RESULTADOS LIA
1- Decarboxilacin de la lisina:
-Prueba Positiva: Superficie violeta/fondo violeta.
-Prueba Negativa: Superficie violeta/fondo amarillo.
2-Desaminacin de la lisina:
Superficie rojiza/fondo amarillo. Esto sucede con cepas del gnero Proteus,
Providencia y alguna cepas de Morganella spp.
3-Produccin de cido sulfhdrico:
-Prueba positiva: Ennegrecimiento del medio (especialmente en el lmite de la
superficie y fondo)

Las Salmonella dan la siguiente reaccin sobre LIA:


Alcalina (violeta o rojizo) en el fondo del tubo = Lisina
Descarboxilasa positiva
Produccin de H2S (ennegrecimiento del medio)

NOTA
SI SE PRESENTA UN TSI NEGATIVO Y H2S POSITIVO EN LIA:
RETENGA ESTE ULTIMO PARA Salmonella arizonae UTILIZANDO
CALDO MALONATO
GUARDAR CULTIVOS CARACTERISTICOS DE Salmonella PARA
PRUEBAS ADICIONALES (SIM, SIMMONS, CALDO MANITOL, MR-VP)

RESULTADOS MIO
1-Movilidad:
-Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento mas all de la lnea de siembra.
-Resultado negativo: crecimiento solamente en la lnea de siembra.
2-Ornitina decarboxilasa:
-Resultado positivo: color prpura.
-Resultado negativo: color amarillo. A veces se puede desarrollar un color violceo en la superficie del
medio.
3-Prueba del indol:
La prueba de indol se realiza una vez que se ha determinado la movilidad y la prueba de ornitina.
-Resultado positivo: color rojo al agregar el reactivo Kovac.
-Resultado negativo: el color del reactivo Kovac permanece incoloro-amarillento.

Las Salmonella dan la siguiente reaccin sobre MIO:


Puede presentarse:
-Resultado positivo: Turbidez o intensificacin del color (Ornitina
descarboxilasa) y crecimiento mas all de la siembra (movilidad)
-Resultado negativo: crecimiento solamente en la lnea de siembra

INDOL NEGATIVA, SON INMOVILES PERO PRESENTAN


MOVIMIENTO OSCILANTE, POSITIVAS A LA
DESCARBOXILACION DE ORNITINA

CHRISTENSEN MEDIO (UREA


AGAR BASE)
Medio utilizado para diferenciar
microorganismos en base a la actividad
uresica.
Se utiliza para identificar bacterias que
hidrolizan urea, tales como Proteus spp., otras
enterobacterias y estafilococos.

Las Salmonella NO hidrolizan la Urea, Son UREASA NEGATIVA,


presentan el color amarillo

REPORTE DE RESULTADOS
REPORTAR COMO PRESENCIA O AUSENCIA DE Salmonella por
gramo o mL de muestra

En general Salmonella es negativa a las pruebas de: ureasa,


indol, lactosa y sacarosa, oxidasa, xilosa y positiva a las
pruebas de descarboxilacin de lisina y ornitina, glucosa y
catalasa, as como generalmente producen H2S , citrato y TSI
positiva, pero existen variantes atpicas con reacciones positivas a
lactosa o no descarboxilacin de lisina.