INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS

BIOLGICAS
LAB. DE MICOLOGA GENERAL Y MDICA

CONSERVACIN DE HONGOS.

Mantenimiento y viabilidad de hongos.

Para evitar la degeneracin y el envejecimiento de las cepas es

necesario preservarlas y retarda los cambios degenerativos que

ocurren en las clulas .
Cambios degenerativos:
1. Carencia o agotamiento de los nutrientes en el medio de cultivo.
2. Acumulacin de secreciones txicas propias del metabolismo del
hongo; alteracin del pH en el medio (acidez o alcalinidad).
3. Disminucin en la concentracin de .
4. Y la consecuente acumulacin de .

Entre los diversos procedimientos de conservacin utilizados para

hongos, se destacan.
1.

Cultivo seriados (mtodos a corto plazo).

2.

Bajo aceite mineral. (mtodos a corto plazo).

3.

Conservacin de esporas en tierra, arena o silica gel y desecacin.

4.

Cepas liofilizadas (mtodo para la conservacin a largo plazo).

5.

Congelacin en nitrgeno liquido. (mtodo para la conservacin a largo plazo).

6.

En agua destilada (mtodos a corto plazo).

Mtodos para la conservacin a largo plazo.

Son los mejores porque en ellos se paraliza el crecimiento de las

clulas microbianas, pero estas no han muerto.
Los mtodos de conservacin pertenecientes a este grupo son dos:
Criocongelacin.
Liofilizacin.

Liofilizacin.
Es un mtodo para la preservacin de bacterias, hongos, levaduras y virus.
El principio bsico para hongos del proceso es congelar la suspensin conidial
y remover el agua por sublimacin mediante vaco.
Para liofilizar se utilizan comnmente dos
mtodos:
pre-congelamiento
la centrifugacin.
Se utilizan crioprotectores para mejor
estabilidad y vialidad. Periodo de
vialidad es de 23 aos.

Partes de un liofilizador.

Criocongelacin.
Los
esporas
pueden
ser
preservados de -5 a 20C por
1 a 2 aos por congelacin en
cultivos en caldo o en suspensiones
celulares.
Para los procesos de profunda
congelacin
requieren
crioprotectores como el glicerol o
dimetil sulfxido (DMSO), cuando
son almacenados a -70C o en
nitrgeno lquido de -156 a -196C.

Mtodos a corto plazo.

Son mtodos que ayudan al mantenimiento de las cepas,
generalmente donde se requiere la cepa activa.
Cultivo seriado.
Consiste en resembrar el microorganismo cada cierto tiempo en
un medio adecuado; se utiliza agar inclinado ya que en medio
slido se detectan mejor los contaminantes que en medio
lquido.
Este mtodo es vlido por cortos perodos de tiempo (de
una semana a 15 das).

Los inconvenientes que

presenta son:
1.

Incremento de la posibilidad de
mutacin
con
cada
transferencia, con prdida de
las
caractersticas
del
organismo.

2.

Alto riesgo de contaminacin.

3.

Alteraciones en el medio de
cultivo, durante la estada en
fro, en la cual se produce una
desecacin gradual del mismo.

Conservacin por suspensin en agua

destilada.

Fue descrito originalmente por

Castellani en 1939, es un mtodo
alternativo muy utilizado y que da
altos porcentajes de viabilidad en
especies
de
basidiomicetos,
ascomicetos y hongos mitospricos.
Alcanzando viabilidades entre dos y
siete aos.

Conservacin con aceite mineral.

Principio del mtodo.
Este mtodo consiste en
recubrir con aceite mineral
estril un cultivo que se
encuentre
en
condiciones
ptimas de crecimiento micelial
y esporulacin.
Algunas especies de Aspergillus
y Penicillium han permanecido
viables por 40 aos.

Perodo de sobrevivencia: 12 a
30 meses.

Otros mtodos de conservacin.

En este grupos se engloban mtodos no empleados

habitualmente, pero a los que es necesario recurrir a la
hora de conservar grupos de que no resisten bien la
liofilizacin o la congelacin.
Estos mtodos se basan en la paralizacin del crecimiento
por eliminacin del agua disponible para las cepas.

Desecacin.
Es un mtodo de conservacin que reduce
drsticamente el metabolismo.
Sin embargo, no todos los microorganismos
sobreviven a este mtodo de secado, por lo que
se hace necesario aadir agentes protectores
(leche descremada, glutamato sdico al 10%).
Una vez seco es importante mantener el
producto sellado para evitar el contacto con el
aire ya que son higroscpicos.

Conservacin en suelo.
Es una tcnica usada en laboratorios
industriales, para el mantenimiento
de cultivos de importancia comercial.
Consiste en esterilizar y secar el
suelo, el cul, se utiliza como medio
absorbente para una pequea
cantidad de inoculo; preserva
Penicillium sp, Fusarium sp,.

Fig 1 Macroconidios y Microconidios

fusiformes en F. oxysporum. Tincin Azul
Lactofenol 10x

Fig. 2 Conidiforo y conidios de Penicillium

expansum. Tincion Azul Lactofenol. 10x

BIBLIOGRAFIA .
7-Marzo-2014 5:28hr

http://www.javeriana.edu.co/biblos/tes

is/ciencias/tesis260.pdf

POR SU ATENCION GRACIAS.