MICORRIZAS

Los hongos micorrizicos

arbusculares(HMAs)
interactan
simbiticamente con el
80% de las familias de
plantas terrestres con
las cuales son capaces
de formar Micorrizas
Arbusculares
(MA),
encontrndose en casi
todos los ecosistemas
terrestres.

clasifi
cacin

Los hongos MA pertenecen al phylum

Glomeromycota (ShuBler et al, 2001) son poco
conocidos por la mayora de las personas, pero
de gran importancia para los ecosistemas
terrestres.

El termino micorriza (del griego Mike= hongo,

rrhiza = raz) hace referencia a la asociacin
simbitica entre races de plantas y hongos,
es llamada mutualista porque tanto los
hongos como la planta hospedera se
benefician. El hongo simbionte recibe
carbohidratos de la planta ya que el es
incapaz de realizar fotosntesis y, a cambio,
brinda a la planta varios beneficios reflejados
en su crecimiento.

Los hongos m icorrizogenicos arbusculares(H M A)

se clasifi
can en nueve fam ilias

Las micorrizas puede ser de tres

tipos:
ectomicorriza
,
entendomicorrizas
y
endomicorrizas. Este ultimo se
encuentra la mas abundante de
todas, la micorriza arbuscular se
presenta en diferentes biomas y
latitudes.

TAXO N O M IA

Los hongos producen esporas o

clamidosporas que
son clulas reproductoras producidas
asexualmente,
que permiten la dispersin y supervivencia
por largo
tiempo en condiciones adversas

La produccin de esporas de estos hongos

puede ser individualmente en el suelo , en el
interior de las races de la planta hospedera, o
formando densas masas no estructuradas o
bien en esporocarpios en o cerca de la
superficie del suelo

En su mayora, las
esporas son de forma
globosa (esfrica) pero
algunas
especies
tienen
esporas
ovaladas u oblongas;
de ellas se desprende
una
hifa
de
sustentacin que en
conjunto
dan
la
apariencia de un globo
con su hilo colgando .
Las esporas son de diferentes colores: blancas,
amarillas, pardas, magenta, etc. y su tamao puede
variar de 20 a 50 m, y en las ms grandes de 200 a
1000 m . Son multinucleadas, contienen gotas de
lpidos y otros contenidos los cuales varan en color y al
romperse la espora en un porta objetos se observa su
arreglo en gotas pequeas o grandes, lo cual puede ser
una ayuda en la identificacin del hongo

Las paredes de las esporas estn

formadas por una o mas laminas, que
varan
en
grosor,
estructura,
apariencia
caractersticas
que
tambin ayudan a identificar la
especie.
Pueden
ser
lisas
o
presentar
ornamentacin en forma de espinas,
papilas o reticulaciones, entre otras.

Sus hifas son multinucleadas,

cenocticas
(no hay paredes, membranas o
septos que separen los ncleos),
aunque pueden septarse
en condiciones ambientales adversas,
por ejemplo deficiencia de agua.

Los HMA son capaces de crecer dentro de las

races
sin
causar
sntomas
de
una
enfermedad, el hongo coloniza las races con
sus hifas, formando arbusculos con los cuales
mantiene un intercambio bioqumico con la
planta.

La red de hifas producidas

por los HMA en el suelo
durante su asociacin con
la planta husped, provee
una mayor superficie de
absorcin que los pelos
radiculares y, por lo tanto,
aumenta
significativamente
la
captacin
de
iones
relativamente inmviles,
tales como
fosfato,
cobre
Se les
llama
y zinc. arbusculares ya que en
las clulas corticales
de la races, sus hifas
forman estructuras que
parecen tener forma de
arbolitos microscpicos

. se ha demostrado
que
las
plantas
micorrizadas
tienen
mayor tolerancia a
metales
txicos,
patgenos de la raz,
sequa,
altas
temperaturas,
salinidad,
pH
desfavorable del suelo
y
al
choque
por
trasplante que sufren
las
plantas
no
micorrizadas

importancia ecolgica.
El papel de los HMA es fundamental para los
ecosistemas
debido
a
que
promueven
un
reciclamiento de la energa , y por lo tanto influye en
el mantenimiento de la diversidad vegetal al evitar
competencia por recursos.

Importancia econmica.
Las plantas al asociarse con los HMA, adquieren
ventajas para un establecimiento exitoso, mayor
supervivencia y aumento de produccin , lo cual es de
gran importancia sobre todo en cultivos de productos
bsicos para la alimentacin.

Estos hongos, han sido utilizados en la

agricultura, como bioinoculantes ya que
favorecen la absorcin de nutrimentos,
adems brindan proteccin a la planta
contra organismos patgenos.

Aislamiento y seleccin de esporas

1.-Se toma 100 g de muestras de suelo
la zona de la rizosfera de las plantas
presentes, de 0 a 40 cm de profundidad,
que se guardan en bolsas plsticas a 4oC
hasta el momento que se vaya a utilizar.

1. 1.-Colocar 100 g de la muestra de

suelo en un vaso de precipitado y
suspender en, al menos, 500 ml de
agua.

5. Coloque el material retenido en el

tamiz de 45 m en una vaso de

precipitados con una pequea cantidad
de agua; despus transfiera este
material a un tubo de centrfuga que
contenga un gradiente de sacarosa de
2060%.

4. Coloque el material retenido en el tamiz de

710 m en una caja de Petri grande y observe
bajo el microscopio de diseccin para
observar esporas grandes (esporas de
Gigaspora y Scutellospora) y esporocarpos.

2. Agitar hasta que las esporas

queden suspendidas y dejar
reposar 30 segundos.

3.
Pasar
la
suspensin
repetidamente a travs de dos
tamices anidados con abertura de
malla de 710 m y 45 m

6.-Centrifugue
a
2,000 rpm durante
60 segundos.

7. Vace el sobrenadante
en el tamiz de 45 m y
lave con agua corriente
para quitar el exceso de
sacarosa.

8.-El contenido del tamiz se recogi

en
envases
de
vidrio
y
posteriormente se agreg poco a
poco en cajas Petri cuadriculadas de
aproximadamente 1,25 cm entre
lneas, para hacer el conteo de
esporas. Bajo el microscopio colecte
las esporas en un vidrio de reloj
limpio.

Identificacin de especies y montaje de

preparaciones
Las caractersticas taxonmicas importantes que pueden observarse bajo el
microscopio de diseccin son tamao de las esporas, color, forma, presencia de hifa
de sostn, de clulas suspensoras y del sculo esporfero (raramente observado en
esporas recolectadas directamente del campo). En el microscopio compuesto pueden
observarse algunas caractersticas taxonmicas importantes como son la presencia y
tipo de ornamentacin sobre la pared de la espora, reaccin al Melzer, nmero de
paredes germinales y grosor de la pared de la espora. Las esporas necesitan montarse
en lquidos de montar permanentes como son el PVLG (alcohol polivnilico
lactoglicerol) y PVLG mezclado con reactivo de Melzer.

1. En un porta objetos, colocar una

gota de PVLG y una gota de la
solucin de PVLG + Melzer

2. Colocar las esporas al centro de

cada gota usando un pinza fina o una
micropipeta (en este caso, tenga
cuidado de no agregar demasiada
agua).

3. Con una aguja de diseccin,

mezcle las esporas en la solucin
de PVLG y de PVLG + Solucin
de Melzer y deje secar la
superficie de la gota por lo menos
cinco minutos.

4. Coloque suavemente un cubre

objeto sobre la gota de PVLG y
otro cubreobjetos sobre la gota
de PVLG + Solucin de Melzer

6. Etiquetar las preparaciones

incluyendo nmero de muestra,
gnero y especie (si
se conoce), y fecha.

5. Usando una aguja de

diseccin, rompa cada espora
individualmente
bajo
el
microscopio de diseccin. Este
paso es importante para
exponer las paredes germinales
y sus capas.

8.-Despus de este tiempo, se procedi a analizar

las preparaciones con ayuda del sistema AxioVision
de Carl Zeiss y se clasificaron de acuerdo con sus
caractersticas
morfolgicas:
forma,
color,
contenido, unin hifa y tipos de paredes o grupos
de paredes, considerando adems el tipo y la
distribucin de las ornamentaciones.
El color de las esporas se obtuvo con ayuda de la
carta de color del INVAM (23). Para la identificacin
de las especies, se emple el manual de Schenck y
Prez, la coleccin fotogrfica del departamento de
Biofertilizantes del IES de esporas de hongos
Glomales, as como la pgina Web del INVAM )y
las descripciones originales de las especies
publicadas en la literatura especializada, mediante
el mtodo propuesto por Herrera (25, 26). Se
tomaron imgenes
de los distintos tipos de
esporas aisladas con el sistema AxioVision de Carl
Zeiss.

7. Guardar las preparaciones

a
temperatura
ambiente
durante cinco das y luego
incubar a 40-60C, durante
dos das para endurecer el
medio de montaje.

Dos
das

Cinco
das

ALGUNOS RESULTADOS
OBTENIDOS CON ESTA TECNICA

Por sus caractersticas morfolgicas, se han identificado

Hongos Micorrizos
Arbusculares agrupados segn su homogeneidad respecto a la forma, el color, la
apariencia de la pared externa, el tamao de la espora y la presencia, forma y coloracin
de la conexin hifa, as como la reaccin con el reactivo de Melzer, que se describe a
continuacin algunos de ellos, mostrando las imgenes de las distintas esporas de los
HMA nativos aislados, as como el gnero y la especie a la que pertenece cada una de
ellas. Sin embargo este solo es un resumen de los muchos con el que se han
identificado.

Gnero: Acaulospora
Especie: Acaulosporakoskei-like
Color: Pardo rojizo
Tamao: (m) 120-240
Forma: Globosa,subglobosa
Paredes: Compuesto por tres
capas

Gnero: Acaulospora
Especie: Acaulosporamellea-like
Color: Amarillo naranja
Tamao: (m) 90-140
Forma: Globosa,subglobosa
Paredes: Tres capas

Gnero: Gigaspora
Especie: Gigaspora sp.
Color: Hialino
Tamao: (m) 160-200
Forma: Globosa,subglobosa
Paredes: Consta de tres capas

Gnero: Acaulospora
Especie: Acaulosporaspinosa
Color: Pardo rojizo
Tamao: (m) 120-140
Forma: Globosa,subglobosa
Paredes: Dos capas,el exterior
contina con la pared del cuello de
la matriz del sculo

Gnero: Glomus
Especie: Glomus sp8
Color: Rojo
Tamao: (m) 60-100
Forma: Globosa,subglobosa,
elptica
Paredes: Consta de tres capas

Gnero: Glomus
Especie: Glomusambisporum
Color: Pardo rojizo
Tamao: (m) 60-100
Forma: Globosa
Paredes: Consta de tres capas

Gnero: Glomus
Especie: Glomusmosseae-like
Color: Pardo claro
Tamao: (m) 100-260
Forma: Globosa,subglobosa
Paredes: Consta de tres capas

Gnero: Glomus
Especie: Glomus sinuosum
Color: Rojo
Tamao: (m) 200-360
Forma: Elptica, organizadasen una
capa a partir de unplexo central
Paredes: Una capa

Gnero: Glomus
Especie: Glomusviscosum-like
Color: Hialino
Tamao: (m) 50-120
Forma: Globosa,subglobosa
Paredes: Consta de trescapas