BIOTRANSFORMACION DE COMPUESTOS

AROMTICOS DE LA GASOLINA EN
MEZCLAS MULTICOMPONENTES

El objetivo principal de este estudio fue evaluar el impacto de

las interacciones del sustrato en las tasas de
biotransformacin y potenciales de mineralizacin de
monoaromticos gasolina y ter terc-butil ter (MTBE),
compuestos que suelen coexistir en las plumas
contaminantes de las aguas subterrneas.Un cultivo mixto
se deriva de material del acufero contaminado con gasolina
utilizando tolueno como el sustrato de enriquecimiento. Dos
cultivos puros, Rhodococcus sp.RR1 y RR2, fueron aisladas
de la cultura mixta.Los tres cultivos de tolueno-cultivadas,
se mostr a biotransformar todos los seis compuestos BTEX
(benceno, tolueno, etilbenceno, o-xileno, m-xileno y p-xileno),
tanto individualmente como en mezclas, en un amplio
intervalo de concentraciones.El cultivo mixto se muestra
para degradar todos los compuestos BTEX a 14 CO 2,
mientras que los dos aislamientos mineralizada BTE (m-/p-)

Los estudios para evaluar las interacciones

sustrato causadas por la presencia concurrente de
mltiples compuestos BTEX durante su
biodegradacin revelaron un nmero de patrones,
incluyendo la inhibicin competitiva y
metabolismo. El etilbenceno fue demostrado
inhibir significativamente la degradacin de BTX
en mezclas.MTBE no era biodegradado por
cualquiera de las tres culturas tolueno-crecido a
lo largo de un intervalo de concentraciones de
MTBE.Por otra parte, la presencia de MTBE a
concentraciones de 2 a 100 mg / L no tuvo ningn
efecto sobre las tasas de biotransformacin BTEX.

Materiales y Mtodos: El cultivo se enriquece

utilizando tolueno como nica fuente de carbono y
energa y se cultiv en un reactor de flujo continuo a 35
C, Esta temperatura fue demostrado experimentalmente
para mejorar la actividad microbiana y optimizar las
tasas de degradacin de BTEX, fueron cultivadas en
tolueno estanca a los gases de Tefln -sellado de vidrio
de 250-ml botellas, Las clulas se recogieron durante la
exponencialfase de crecimiento por centrifugacin y se
resuspendieron en
Berkeley sales minerales medios. Un 1 a 2 ml de la
muestra de la suspensin de clulas madre se utiliza
para inocular frascos experimentales que conducen a
densidades de cultivo en las botellas del 35 a 250 mg / L

Para el cultivo mixto, la clula

inculos consisti en una muestra de 10 a 20 ml de la
reactor de flujo continuo que conduce a densidades de
cultivo en las botellas de entre 140 y 310 mg / L
Las muestras de cultivo
desde el reactor de flujo continuo se purgaron con
nitrgeno a una velocidad de flujo de 4 l / min durante 5
min para eliminar el tolueno residual. Densidades
Cultura en cada una de las botellas experimentales se
midieron por duplicado como la diferencia entre los
pesos de la muestra despus de secar a 105 C durante
8 h seguido por la combustin a 550 C durante 30
min.

Experimental y Analtica
Procedimientos: estudios se llevaron a cabo en 250 ml botellas de vidrio
transparente que contiene 100 ml de BMSM y seis perlas de vidrio
(dimetro = 5 mm) para favorecer la mezcla. Las botellas fueron sellado
con Tefln forrado Mininert vlvulas, ) y se incubaron a 35 C con
agitacin a 150 rpm. Desaparicin de compuestos aromticos se control
por anlisis de espacio de cabeza utilizando un cromatgrafo de gases
equipado con un detector de ionizacin de llama como se ha descrito
previamente, Mineralizacin estudios se llevaron a cabo en botellas
como los descritos anteriormente, utilizando marcado con 14C BTEX
compuestos. Controles estriles que contienen compuestos BTEX, pero no
las clulas, se utilizan para supervisar abiticos las prdidas de
compuestos aromticos. Para evaluar la mineralizacin de un
componente especfico dentro de una BTEX mezcla, slo se aadi una
sustancia qumica radiomarcado ala mezcla de seis componentes.
Despus del cultivo de la inoculacin, las botellas se incubaron a 35 C
con agitacin a 150 rpm durante 48 a 60 h despus de lo cual el
experimento
se termin con la adicin de 0,3 ml de 6,15 N NaOH. El procedimiento
para el anlisis de 14C se modific

Se realizaron tres mediciones diferentes para cada botella: una

muestra se retir del reactor, se aadi a 10 ml de cctel de centelleo.
Despus el sedimento de clulas se descart, 0,5 a 2 g de Ba (NO3) 2
se aadieron a la solucin sobrenadante en un
vial y se mezcl a 150 rpm durante 30 min. El material en partculas
fraccin que consiste en el precipitado era Ba14CO3 capturado en un
filtro de membrana de 0,2 micras usando vaco
filtracin. El filtro se lav dos veces con agua desionizada agua y se
coloca en un vial de centelleo que contiene 10 ml de cctel de
centelleo a ensayar para la radiactividad
. En todos los experimentos, el total
recuperacin del radiomarcador fue mayor que 92%. Controles
estriles que contienen radiomarcado, BTEX pero no las clulas se
utilizan para controlar las prdidas de abiticos
compuestos voltiles de las botellas selladas. Experimentos fueron
bien repetir varias veces para validar resultados, o se realizaron con
duplicado o triplicado botellas. Se calcul el error experimental como
la gama de muestras por duplicado o como la desviacin estndar
de muestras por triplicado.

GRACIAS