BACTERIFAGOS COMO INMUNGENOS

FAGOS FILAMENTOSOS COMO INMUNGENOS

En 1988, de la Cruz y colaboradores propusieron el empleo de los

fagos filamentosos como inmungenos. Para ello inmunizaron
conejos y ratones con fagos filamentosos en los que insertaron
pptidos derivados de la protena del circumesporozoito del parsito
de la malaria humana Plasmodium falciparum en una de las
protenas de la cpsida viral, la protena III (PIII).

Tres aos mas tarde, Greenwood y colaboradores obtuvieron una

fuerte respuesta de anticuerpos en conejos contra estos mismos
pptidos de malaria expresados en fagos filamentosos, pero
fusionados al extremo amino terminal de la protena VIII (PVIII) del
fago. Esta protena es la mayoritaria de la cpsida viral, tiene 50
residuos
aminoacdicos
y
en
cada
bacterifago
hay
aproximadamente 2700 copias de ella que forman una envoltura
alargada en cuyo interior se encuentra el ADN viral.

INDUCCIN DE RESPUESTA INMUNE FUNCIONAL CONTRA

PPTIDOS EXPRESADOS EN FAGOS FILAMENTOSOS
La inmunizacin con pptidos expuestos en fagos filamentosos
posibilita la generacin de anticuerpos contra la estructura
peptdica que se expone. En muchos casos los anticuerpos
generados no se limitan a reconocer en inmunoensayos el pptido
empleado en la inmunizacin, tambin es posible la generacin de
anticuerpos capaces de reconocer el antgeno original.

Los primeros resultados los brindaron Minenkova y colaboradores

cuando al inmunizar conejos con fagos filamentosos que exponan
en el extremo amino terminal de PVIII un determinante antignico de
la protena p17 gag del virus de la inmunodeficiencia humana,
encontraron que las IgG purificadas del suero de los conejos
inmunizados reconocieron en inmunoensayos a la protena p17 y su
precursor p55.

Tambin se demostr en varios trabajos que mimtopos del

antgeno de superficie del virus de la hepatitis B fueron capaces
de generar anticuerpos que reconocieron al antgeno original.

Phalipon y su grupo de colaboradores inmunizaron animales

con mimotopos de un antgeno no proteico, el determinante O
del lipopolisacrido (LPS) de Shigella flexneri, y encontraron
que los anticuerpos generados no slo reconocieron al LPS
purificado, sino adems a la bacteria.

INFLUENCIA
DE
LA
EXPOSICIN
EN
FAGOS
FILAMENTOSOS
SOBRE
LAS
PROPIEDADES
ANTIGNICAS E INMUNOLGICAS DEL PPTIDO
EXPUESTO.
Las propiedades de unin del pptido pueden estar
influenciadas por el ambiente particular o contexto fgico
en que ste se encuentra al ser expuesto en fagos. Estas
propiedades del pptido pueden variar si se le separa de ese
contexto.

Un ejemplo de afectacin de las propiedades antignicas de

un pptido al ser separado del fago que lo expone se brinda
en el trabajo llevado a cabo por Jensen-Jarolim y
colaboradores en 1998, donde se demostr que mimotopos
seleccionados despus de dos bibliotecas de pptidos,
lineales y cclicos, expuestos en fagos, con anticuerpos
monoclonales dirigidos contra, Bet v 1, el alergeno principal
del polen del abedul, fueron capaces de inhibir la unin de
los anticuerpos anti-Bet v 1 al alergeno tanto recombinante
como natural, mientras que estos mismos pptidos, pero
sintticos, no fueron efectivos en el bloqueo de la
interaccin de Bet v 1 con los anticuerpos.

INFLUENCIA DE LA CONFORMACIN
DEL PPTIDO EXPUESTO SOBRE LA
CALIDAD DE LA REPUESTA INMUNE
GENERADA
Zhong y colaboradores comunicaron la construccin de una biblioteca
expuesta en fagos formada por restricciones conformacionales,
impuestas al azar, a un epitopo de Chlamydia trachomatis, el cual no
haba sido capaz de generar anticuerpos que reconocieran al antgeno
original. La biblioteca construida fue pesquisada con un anticuerpo
monoclonal que reconoca al antgeno original solo en su conformacin
natural. Los fagos seleccionados, al ser empleados como
inmungenos, indujeron la produccin de anticuerpos que
reconocieron al patgeno.

VAS DE INMUNIZACIN
En los trabajos anteriormente analizados, la inmunizacin con
fagos filamentosos se llev a cabo por va parenteral, en el
caso de ratones por va intraperitoneal y en el caso de conejos
por va subcutnea subescapular. Estas vas han sido efectivas
para la induccin de anticuerpos contra mimotopos de
diferentes antgenos en distintos modelos animales.

PERSPECTIVAS DE EMPLEO DE
LOS FAGOS COMO
INMUNGENOS EN HUMANOS
La experiencia prctica acumulada en la inmunizacin de
animales de experimentacin con pptidos expuestos en fagos
filamentosos indica que no hay registros de efectos txicos, lo
cual permitira el empleo de los fagos filamentosos como
vehculos para la presentacin de epitopos en la fabricacin
de vacunas. El empleo en humanos de los bacteriofagos en
general ha estado limitado a la terapia de infecciones
bacterianas.

La exploracin de la posible inmunizacin de humanos con

bacteriofagos por va oral es particularmente importante al ser
esta una va menos agresiva que la parenteral, adems de que
estimula la generacin de respuesta inmune en las mucosas.
Esto es importante en el diseo de vacunas para combatir
enfermedades en humanos, donde la superficie total de
mucosas calculada es de 400 m2 y es la principal puerta de
entrada para la mayora de los patgenos.