INTRODUCCIN A LA

ESPECTROMETRA

Objetivos
1) Se describir la absorcin de la
radiacin por parte de las molculas y
su relacin con la estructura molecular
2) Se presentarn clculos cuantitativos que
relacionan la cantidad de radiacin
absorbida con la concentracin del
analito absorbente, y
3) se
describir
la
instrumentacin
necesaria para hacer las mediciones.

1. Interaccin de la radiacin
electromagntica con la materia
En los mtodos espectromtricos, la
muestra en solucin absorbe radiacin
electromagntica procedente de una
fuente adecuada, y la cantidad
absorbida
se
relaciona
con
la
concentracin del analito en la
La espectrometra se basa en la
solucin.

absorcin
analito.

de

fotones

por

el

EL ESPECTRO
ELECTROMAGNTICO
La radiacin electromagntica es una forma de
energa radiante que se propaga en forma de ondas
transversales. Su vibracin es perpendicular a la
direccin de su propagacin, lo cual imparte un
movimiento ondulatorio a la radiacin, como se
muestra en la figura 1.
Figura
1.
Campos
elctricos y
Magnticos
perpendiculares
entre
respecto a la direccin
De propagacin.

La onda se describe ya sea en trminos de su:

longitud de onda: distancia que ocupa un ciclo
completo
Frecuencia: Cantidad de ciclos que pasan por un
punto fijo por unidad de tiempo.
Nmero de onda: Recproco de la longitud de
onda, y es la cantidad de
La ondas
longitudque
de onda,
hay la
en una
el nmero
longitud unitaria, o sea la frecuencia
distancia ypor
ciclo.
de
onda
interrelacionan.

se

Figura 2. Movimiento ondulatorio de la radiacin electromagntica.

La relacin entre longitud de onda y

frecuencia es:

La longitud de onda de la radiacin

electromagntica vara desde algunos
angstroms hasta varios metros. Las
unidades que se usan para describir la
longitud de onda son las siguientes:

La radiacin electromagntica posee

cierta cantidad de energa. La energa
de una unidad de radiacin, llamada
fotn, se relaciona con la frecuencia
mediante la ecuacin:

Las diversas regiones del

espectro

CMO ABSORBE RADIACIN LA

MATERIA?
En la tabla 1 se resumen los colores aproximados correspondientes a
diferentes longitudes de onda en la regin visible del espectro. Por
ejemplo, una solucin de permanganato de potasio absorbe luz en la
regin verde del espectro con un mximo de absorcin a los 525 nm, y la
solucin es morada.

Tabla 1

Hay
tres procesos bsicos mediante los

cuales una molcula puede absorber

radiacin: todos consisten en elevar la
energa interna de la molcula a un valor
mayor y el aumento de energa es igual a
la energa de la radiacin absorbida ().
transicin rotacional: molcula gira
en torno a varios ejes, teniendo la
energa de rotacin niveles definidos,
por lo que la molcula puede absorber
radiacin y ascender a un mayor nivel
de energa de rotacin o rotacional

 Transicin vibracional: los tomos

o grupos de tomos dentro de una
molcula vibran entre s, y la energa
de esta vibracin posee tambin
niveles definidos cuantizados; en ese
caso, la molcula puede absorber
una cantidad discreta de energa y
ascender a un nivel ms alto de
energa de vibracin

 Transicin
electrnica:
Los
electrones de una molcula pueden
ascender a una energa electrnica
mayor.

2. Clculos cuantitativos
La fraccin de radiacin que absorbe
una solucin de un analito se puede
relacionar cuantitativamente con su
concentracin. A continuacin se
presentarn los clculos para una sola
especie, y para mezclas de especies
absorbentes.

LEY DE BEER: RELACIN ENTRE LA

CANTIDAD DE RADIACIN
ABSORBIDA Y LA CONCENTRACIN

Absorcin de la radiacin. P0 =
Potencia de la radiacin incidente,
P = Potencia de la radiacin
transmitida, c=concentracin,
b = distancia recorrida por la
radiacin

donde k es una constante, y T se denomina transmitancia, fraccin de la

energa radiante
transmitida. Expresando la ecuacin anterior en forma logartmica se
llega a:

ley similar rige la dependencia entre

T y la concentracin c:

en la que k es una nueva constante, y

entonces

Al combinar estas dos leyes se obtiene

la ley de Beer, que describe la
dependencia de T respecto de la
trayectoria recorrida a travs de la
muestra y la concentracin:
Donde a es una constante que resulta de la
combinacin de k y k, y

Es ms conveniente omitir el signo

negativo del lado derecho de la
ecuacin y definir un trmino nuevo,
absorbancia:

donde A es la absorbancia. sta es la

forma comn de la ley de Beer. Ntese
que la absorbancia es la directamente
proporcional a la concentracin.

El porcentaje de transmitancia se
define como

La ecuacin anterior se puede

reacomodar. Como T = %T/100,

Tambin se puede expresar:

En los libros y publicaciones se encuentran muchos

smbolos y trminos relacionados con la ley de Beer.
Aqu se muestran algunos.
Tabla 2

La
longitud de trayectoria b (ancho de la
celda) en la ecuacin (*) se expresa en
centmetros, y la concentracin c en gramos
por litro. A la constante a se le llama
absortividad, y depende de la longitud de
onda y de la naturaleza del material
absorbente. En un espectro de absorcin, la
absorbencia vara con la longitud de onda en
proporcin directa de a (con b y c
constantes). El producto de la absortividad
por el peso molecular de la sustancia
absorbente se llama absortividad molar .
Entonces,

EJEMPLOS
1. Se determina que una muestra en
una celda de 1 cm, en un
espectrmetro, transmite 80% de la
luz a cierta longitud de onda. Si la
absortividad de esta sustancia, a
esta longitud de onda, es 2.0, cul
es la concentracin de la sustancia?

2. Una solucin contiene 1 mg de

hierro (como complejo de tiocianato)
en 100 mL, y se observa que transmite
70%
de
la
luz
incidente,
en
comparacin con un testigo o blanco
apropiado. a) Cul es la absorbencia
de la solucin a esta longitud de onda?
b) Qu fraccin de luz transmitira
una solucin cuatro veces ms
concentrada en hierro?

3. Las aminas, RNH2, reaccionan con el

cido pcrico para formar picratos de

amina, que absorben fuertemente a
359nm ( Se disolvieron 0.1155 g de una
amina desconocida en agua, y se diluy
a 100mL. De esta solucin se diluye una
alcuota de 1mL a 250mL, para su
medicin. Si esta solucin final tiene una
absorbencia de 0.454 a 359nm con una
celda de 1 cm, cul es el peso frmula
de la amina? Cul sera una frmula
probable?