APLICACIONES DE LA

HPLC
High-pressure liquid chromatography

La HPLC tiene un campo de aplicacin

muy numeroso debido a las siguientes
razones:
Su sensibilidad
Su fcil adaptacin a las determinaciones cuantitativas exactas
Su eficiencia en la separacin de especies no voltiles o termolbiles
(especies que se alteran con facilidad por la accin del calor)

PRNCIPALES APLICACIONES

Campos de Aplicacin de HPLC

Frmacos: Antibiticos, sedantes esteroides, analgsicos
Bioqumica: Aminocidos, protenas, carbohidratos, lpidos
Productos de alimentacin: Edulcorantes artificiales, antioxidantes, aflatoxinas, aditivos
Productos de la industria qumica: Aromticos condensados, tensoactivos, propulsores, colorantes
Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB
Qumica forense: Drogas, venenos, alcohol en sangre, narcticos
Medicina clnica: cidos biliares, metabolitos de drogas, extractos de orina, estrgenos.
Algunas aplicaciones importantes de la HPLC preparativa
Separacin y purificacin de metabolitos
Separacin y purificacin de los metabolitos de las drogas procedentes de muestras de orina
Purificacin y separacin de enantimeros
Purificacin de compuestos naturales
Purificacin y caracterizacin de enzimas y protenas

Separacin por HPLC

Se puede observar la
separacin de una mezcla
compuesta por fenol, 3fenil propanol,
acetofenona, p-clorofenol
y p-nitrotolueno.
En el cromatograma solo
se observan 4 picos
(deberan ser 5), esto se
debe a un solapamiento
de los picos de la
acetofenona y el pclorofenol, esto se puede
ver pues los tiempo de
retencin son muy
parecidos

Investigacin acerca de
la potencia de 4
antibiticos, en
distintas
concentraciones.
High-pressure liquid chromatography analysis of
antibiotic susceptibility disks.
R B Hagel, E H Waysek, W M Cort
Antimicrob Agents Chemother. 1979 September; 16(3):
372377.
PMCID:
PMC352863

Estudio realizado por 12 laboratorios a nivel mundial

para la determinacin de -caroteno en Suplementos y
materias primas mediante HPLC

Doce laboratorios que representan a los laboratorios comerciales,

industriales y gubernamentales en 4 pases acordaron participar en

el estudio en colaboracin, que se llev a cabo utilizando una
tcnica de muestra ciega.A cada laboratorio se le pidi ensayar con
3 muestras de prctica para asegurar que el personal de laboratorio
entendieran todo el procedimiento antes de continuar con el estudio
en colaboracin.Se pidi a todos los laboratorios proporcionar
cromatogramas con los resultados para ayudar a la comparacin
final.

Cromatogramas de algunos
laboratorios participantes

Como se puede observar a cada laboratorio se le asign una muestra de control (A)
y una muestra problema (B) (diferente a cada uno), al final a simple vista podemos
comparar los cromatogramas y determinar el tiempo de retencin del -caroteno y
su concentracin.

Determination of -Carotene in Supplements and Raw Materials by Reversed-Phase High

Pressure Liquid Chromatography:Collaborative Study
John Szpylka, Jonathan W. DeVries, S. Bhandari, M.H. Bui, D. Ji, E. Konings, R. Lewis, P. Maas,
H. Parish, B. Post, J. Schierle, D. Sullivan, A. Taylor, J. Wang, G. Ware, D. Woollard, T. Wu
J AOAC Int. Author manuscript; available in PMC 2009 March 18.
Published in final edited form as: J AOAC Int. 2005; 88(5): 12791291.
PMCID:
PMC2657295