UNIVERSIDAD NACIONAL

DEL SANTA

Membranas biolgicas y transporte:

Composicin y arquitectura de
membranas. Dinmica de
membranas. Transporte de
solutos. Tipos de transporte
Esteban V. Horna Bances

Objetivo
Describir

la estructura y composicin
de las membranas celulares y los
diferentes fenmenos de transporte
de solutos a travs de ellas

Membranas biolgicas

Definen el lmite externo que regulan el trfico molecular a travs de ste

Organizan secuencias complejas de reacciones y son centrales de la
conservacin de energa y la comunicacin clula a clula.
Son flexibles, autosellables y selectivamente permeables a solutos polares
La flexibilidad permite cambios de forma necesarios para acompaar el
crecimiento celular y movimiento
La capacidad para escindirse y volver a sellarse permite la exocitosis o la
endocitosis
La permeabilidad selectiva permite retener ciertos compuestos y iones
dentro de la clulas y dentro de sus compartimentos
Los transportadores en la membrana celular mueven especficos solutos
orgnicos y iones inorgnicos a travs de la membrana
Los receptores detectan seales extracelulares y disparan seales
moleculares en la clula
Las molculas de adhesin mantienen juntan a las clulas vecinas
Dentro de las clula las membranas organizan procesos celulares como la
sntesis de lpidos, ciertas protenas y las transducciones de energa en las
mitocondrias y cloroplastos.
Al ser tan delgada es bsicamente bidimensional, lo que colisiones
intermoleculares ms probables

Caractersticas comunes de
membranas biolgicas

Son estructuras en forma de capa, del grosor de 2 molculas, el grosor de la

mayora de membranas es entre 6nm y 10 nm
Consisten mayormente de lpidos y protenas: tambin contienen
carbohidratos
Los lpidos de membrana son molculas relativamente pequeas con partes
hidroflicos y hidrofbicos. Estos lpidos forman espontneamente capas
bimoleculares cerradas en medio acuoso. Estas bicapas lipdicas son barreras
al flujo de molculas polares
Las protenas sirven como bombas, canales, receptores, transductores de
energa y enzimas
Son ensamblajes no covalentes
Son asimtricas: las 2 caras de la membrana difieren una de otra
Son estructuras fluidas; son molculas lipdicas que difunden rpidamente en
la membrana plasmtica como lo hacen las protenas que se encuentran
ancladas por interacciones especficas. Las membranas plasmticas pueden
considerarse como soluciones bidimensionales de protenas y lpidos
orientados
La mayora de membranas celulares son elctricamente polarizadas, de tal
manera que su interior es negativo ( ~-60 mV). Los potenciales de membrana
tienen rol principal en transporte, conversin de energa y excitabilidad

Membrana celular
Todas las membranas
muestran una apariencia
caracterstica trilaminar
Cuando un eritrocito es teido
con tetrxido de osmio y se ve
al microscopio electrnico, la
membrana plasmtica
aparece como una estructura
trilaminar, 5 a 8 nm de grosor
La imagen trilaminar consiste
de 2 capas electrnicamente
densa ( osmio ligado a las
superficies de la membrana
separadas por una regin
central menos densa, lo que
en un inicio recibi el nombre
de unidad de membrana

Bicapa
de
mem
brana

Composicin y arquitectura
de membranas

Las proporciones de protena y lpidos varan con el tipo de membrana y

refleja la diversidad de sus roles
Para estudiar la composicin de membrana, la primera tarea es aislar la
membrana seleccionada. Cuando clulas eucariticas se someten a accin
mecnica, sus membranas plasmticas se estiraban y fragmentaban
liberando componentes citoplasmticos y organelos rodeados por
membrana.
Los fragmentos de membrana y organelos intactos pueden aislarse por
tcnicas de centrifugacin
Los anlisis qumicos de membranas de fuentes diversas revelan
propiedades comunes: cada reino, cada especie, cada tejido o cada tipo
celular tienen un grupo caracterstico de lpidos (membrana plasmtica es
rica en colesterol y no tiene cardiolipina, en la membrana mitocondrial de
hepatocito es al revs
La composicin de protenas de membrana de diferentes fuentes varan
an ms ampliamente que la de lpidos, reflejando especializacin
funcional; en las clulas abastonadas de la retina de los vertebrados, mas
del 90% de la protena de la membrana es la glicoprotena rodopsina, etc
Algunas protenas de membrana estn covalentemente adheridas a uno o
mas lpidos que les sirven como anclas que mantienen las protenas en la
membrana

Principales componentes de
membrana plasmtica de diversos
organismos
Origen

Componentes (% por peso)

Tipo de
esterol

Otros lpidos

Protena

Fosfolpido

Esterol

Cubierta de
mielina
humana

30

30

19

Colesterol

Galactolpidos
,
plasmalgeno
s

Hgado de
ratn

45

27

25

Colesterol

---

Hoja de
maz

47

26

Estosterol

Galactolpidos

Levadura

52

Ergosterol

Triacilglicerole
s, esteres
esterilo

Parameciu
m

56

40

Estigmastero
l

---

E. coli

75

25

----

---

Composicin y funcin

La especializacin funcional se ve
reflejada en la composicin de
lpidos: El colesterol es prominente
en membrana plasmtica, pero
casi indetectable en la membrana
mitocondrial. La cardiolipina es un
componente dominante en la
membrana mitocondrial pero no en
la plasmtica. La fosfatidilserina, el
fosfatidil inositol y el fosfatidil
glicerol son componentes menores
de la mayora de membranas, pero
sirven funciones crticas;
fosfstifilinositol y derivados son
importantes en transduccin de
seales disparadas por hormonas.
Los esfinfolpidos, fosfatidil colina y
fosfatidil etanol amina se
presentan en proporciones
variadas. Los glucolpidos que son
importantes en membranas de
plantas est+an casi ausentes en
las clulas animales

El mosaico fludo
Estudios de la composicin qumica y estudios de microscopa as como estudios de la
permeabilidad y mocin de protenas individuales y molculas lipdicas dentro de
membranas llevaron al desarrollo del modelo de mosaico fluido para las membranas
biolgicas: Fosfolpidos forman una bicapa, con sus regiones bipolares dirigidas al
interior y los grupos polares hacia el medio acuoso. Las protenas estn embebidas en
esta bicapa, mantenidas por interacciones hidrofbicas entre los lpidos de membrana
y zonas hidrofbicas de protenas. La orientacin de las protenas es asimtrica. Protenas
y lpidos forman mosaico fluido que cambia constantemente, no tiene mayormente
estructuras covalentes

Elementos estructurales de
las membranas: Micelas

Glicerofosfolpidos, esfingolpidos y
esteroles son virtualmente insolubles
en agua. Forman agregados lipdicos
microscpicos
Las interacciones hidrofbicas entre
las molculas lipdicas proveen las
fuerzas termodinmicas directrices
para la formacin y mantenimiento de
estas estructuras
Dependiendo de las condiciones
particulares y la naturaleza de los
lpidos, se pueden formar 3 tipos
distintos de agregados: las micelas, las
bicapas y los liposomas
Las micelas son estructuras esfricas
que contienen de unas pocas docenas
a unos pocos miles de molculas
anfipticas, se ordenan con sus
regiones hidrofbicas hacia el interior,
donde el agua es excluda y sus grupos
hidroflicos en contacto con el agua; se
favorece cuando el rea de la cabeza
del grupo es mayor que la cadena acilo
lateral, como en los cidos grasos,
lisofosfolpidos (fosfolpidos que

Elementos estructurales de
las membranas: Bicapas

La bicapa se forma cuando 2

monocapas de lpidos forman
una lmina bidimensional,
que ocurre cuando el rea de
la seccin cruzada de las
cabezas y las cadenas
laterales acilos son similares
como en gliderofosfolpidos y
esfingolpidos. Como las
regions en los bordes
interactan con el agua, la
bicapa es relativamente
inestable y forma
espontneamente un tercer
tipo de agregado, al plegarse
en s para formar una esfera
hueca o vescula, el liposoma

Representaciones de una
bicapa en 2 modelos
Las membranas biolgicas se construyen de bicapas lipdicas de ujn
grosor de 3 nm con protenas que se extienden para cada lado. La
ncleo o corazn hidrocarbonado de la membrana hecho de los CH2 y
CH3 de los acilos grasos que son tan no polares como los decanos

Elementos estructurales de
las membranas: Liposomas

El liposoma, al fomarse
pierde las regiones
hidrofbicas en contacto con
el agua, alcanzando la
mxima estabilidad, estas
vesculas encierran agua
creando un compartimento
acuoso . Es probable que los
precursores de los primeros
seres vivientes se hayan
parecido a los liposomas, con
su contenido acuoso
segregado del resto del
mundo por una cubierta
hidrofbica
Los liposomas hechos en
laboratorio son
esencialmente impermeables
a los solutos polares, como lo
son las membranas
biolgicas

Diagrama de un liposoma o vescula de

lpido , y
Preparacin de un liposoma conteniendo
glicina, la glicina libre se elimina por
filtracin en gel

Protenas de membrana

Las protenas de membrana pueden dividirse en 2 grupos:

las protenas integrales y las perifricas.
Las protenas de membrana estn asociadas muy
firmemente a la membrana, removible solo con agentes
que interfieren con interacciones hidrofbicas como
detergentes, solventes orgnicos o desnaturalizantes.
Las protenas perifricas asociadas con la membrana a
travs de interacciones electrostticas y enlaces de
hidrgeno con los dominios de las protenas integrales y los
grupos polares de los lpidos de membrana. Pueden
liberarse por tratamientos suaves que interfieren con las
interacciones electrostticas o rompen los enlaces de
hidrgeno, para lo que suele usarse el carbonato a pH alto.
Las protenas perifricas pueden servir como reguladores
de las enzimas ligadas a membrana o pueden limitar la
movilidad de las protenas integrales anclndolas a las
estructuras intracelulares

Los lpidos estn asimtricamente distribuidos entre las dos monocapas, aunque
esta no es absoluta. En la membrana plasmtica del eritrocito los lpidos
contienen colina (fosfatidilcolina y esfingomielina) se encuentran en la parte
externa (extracelular o exoplsmica, mientras que la fosfatidilserina,
fosfatidiletanolamina y los fosfatidilinositoles se encuentran en la zona interna
(citoplasmtica). Los cambios de esta orientacin tienen consecuencias
biolgicas; por ejemplo, cuando la fosfatidilserina de la plaqueta se mueve al
exterior sta puede formar el cogulo.

Protenas de membrana
Las protenas de membrana se
diferencian operacionalmente por las
condiciones requeridas para
liberarlas de la membrana. Muchas
son liberadas con cambios de pH o
fuerza inica, eliminacin de Ca2+,
por un agente quelante o adicin de
rea o carbonato.
Las protenas integrales son
extractables con detergentes que
rompen las interacciones
hidrofbicas, para formar acmulos
alrededor de las protenas. Otras
como las adheridas a lpidos de
membrana son liberadas como el
glucosil fosfatidil inositol puede
liberarse por accin de una
fosfolipasa C

Protena de membrana de
eritrocito

Se observa que la glucoporina tiene un

dominio hidroflico, conteniendo todos
los azcares, en la superficie externa,
y otro dominio hidrofbico en la
membrana
Cada hexgono rojo representa un
tetrasacrido(conteniendo 2 Neu5Ac
(c. Silico), Gal y GalNAc ligados a
Ser o Thr. Los hexgonos azules
representan cadenas de oligosacridos
ligados a Asn. Un segmento de 75 a 93
residuos forma un segmento -hlice
que atravieza la membrana. Los
segmentos de 64 a 74 tienen residuos
hidrofbicos y probablemente
penetran la membrana de la manera
que se muestra aqu

Interacciones

Las membranas integrales estn

adheridas a la membrana por
interacciones hidrofbicas entre
los lpidos de membrana y los
dominios hidrofbicos de la
protena. Algunas protenas
tienen una sola secuencia
hidrofbica en el medio o en el
extremo carboxilo o amino. Otras
tienen mltiples secuencias
hidrofbicas, cuando la
conformacin proteica es lo
suficientemente grande para
expandirse en la membrana.
En la grfica se muestra las
categoras existentes de
relaciones espaciales de los
dominios proteicos. Tipo I y II
tienen una sola hlice
transmembranosa. Tipo III tiene
mltiples secuencias. Tipo IV
consta de diferentes polipptidos
ensamblados para formar un
canal. Tipo V tiene protenas
ligadas covalentemente a lpidos
de membrana. Tipo Vi tiene tanto
hlices como lpidos anclas en
membrana

Bacterioirrodopsina

Bacteriorrodopsin
a que es una
bomba de
protones dirigida
por la luz se
encuentra
densamente
empacada en
arreglos regulares
en la membrana
prra de
Halobacterium
salinarum, y
muestra una sola
cadena que se
pliega 7 -hlices
hidrofbicas, cada
una de las cuales
atravieza la
membrana, el
pigmento que
absorbe luz
retinal est
enterrado en la
membrana en
contacto con
varias de los
segmentos
helicoidales

Centro de reaccin
fotosinttico
El centro de reaccin
fotosinttico de una
bacteria prpura fue la
primera estructura de
protena de membrana
resuelta por cristalografa
Est construida bajo los
mismos principios que la
bacteriorrodopsina.
Posee 4 subunidades, 3 de
los cuales contienen
segmentos - helicoidales,
con cadenas hidrofbicas
orientadas hacia los lpidos
de membrana. Su
arquitectura es inversa a la
de la mayora de protenas
solubles en agua, las cuales
tienen sus AAs hidrofbicos
enterrados en su interior y
los hidroflicos hacia el
exterior

Topologa de membrana

La determinacin de la estructura tridimensional de una membrana proteica o

su topologa es ms difcil que su secuenciamiento; se conocen miles de
secuencias para membranas proteicas, pero relativamente muy pocas
estructuras tridimensionales se han establecido por cristalografa o
espectroscopa NMR.
La presencia de secuencias enteras de mas de 50 AAs hidrofbicos se toma
como evidencia de que estas secuencias atraviezan la bicapa lipdica, actuando
como anclas hidrofbicas o formando canales transmembranosos. La aplicacin
de esta lgica ha llevado a la conclusin de que 10 a 20% de las protenas son
protenas integrales de membrana
Varios mtodos simples de analizar secuencias de AAs dan predicciones
razonablemente certeras de la estructura secundaria para protenas
transmembranosas. La polaridad relativa de cada AA se ha determinado
experimentalmente midiendo el cambio de energa libre que acompaa el
movimiento de cada cadena lateral de AA de un solvente hidrofbico a agua,
este cambio de energa libre va de muy exergnico para AAs cargados o
polares a muy endergnico para AAs con cadenas laterales aromticas o
alifticas. La hidrofobicidad neta de una secuencia de AAs se estima sumando
las energas libres de transferencia para los AAs en la secuencia, lo que da un
ndice de hidropata para esa regin, el cual es una escala combinando la
hidrofobicidad e hidrofilicidad de los grupos R, que puede usarse para medir la
tendencia de un AA para buscar un ambiente acuoso (valores negativos) o un
ambiente hidrofbico (valores +).

Aminocido

Tipo de R

ndice de hidropata

Glicina

No polar, aliftico

-0,4

Alanina

No polar, aliftico

1,8

Prolina

No polar, aliftico

1,6

Valina

No polar, aliftico

4,2

Leucina

No polar, aliftico

3,8

Isoleucina

No polar, aliftico

4,5

Metionina

No polar, aliftico

1,9

Fenilalanina

Aromtico

2,8

Tirosina

Aromtico

-1,3

Triptofano

Aromtico

-0,9

Serina

Polar no cargado

-0,8

Treonina

Polar no cargado

-0,7

Cistena

Polar no cargado

2,5

Asparragina

Polar no cargado

-3,5

Glutamina

Polar no cargado

-3,5

Lisina

Cargado positivamente

-3,9

Histidina

Cargado positivamente

-3,2

Arginina

Cargado positivamente

-4,5

Aspartato

Cargado negativamente

-3,5

Glutamato

Cargado negativamente

-3,5

Clculo de potencial de membrana

para segmentos que se extienden
en membrana

El investigador calcula el ndice de hidropata para

segmentos sucesivos (ventanas) de un tamao dado, de 7 a
20 AAs.
Para una ventana de 1 a 7 AAs, 2 a 8, 3 a 9, etc., se plotean
considerando los AAs en el medio.
Una regin con ms de 20 AAs con alto ndice de hicropata
se presume sea un segmento transmembranoso.
Cuando se escanean de esta manera protenas de
membrana de estructura tridimensional conocida se
encuentra una correspondencia altamente razonable entre
los segmentos predichos y los segmentos que se extienden
en la membrana.
El anlisis de la hidropata predice una sola hlice
hidrofbica para la glucoporina y 7 segmentos
transmembrana para la bacteriorrodopsina de acuerdo con
estudios experimentales.

El anlisis ded hidroxipata predice una sola cadena helicoidal

hidrofbica para la glucoporina

El anlisis de hidropata predice siete segmentos

transmembranosos para la bacteriorrodopsina

Otras consideraciones

Una caracterstica importante de muchas protenas

transmembranosas es que en la interfase entre lpidos y agua se
encuentran AAs como Tyr y Trp, cuyas cadenas laterales parecen
funcionar como anclas. En la figura se muestran diferentes
protenas de membrana, en las que la Tyr es naranja y el Trp es
rojo

Canal de K+

Maltoporina

Membrana exterior
OmpX
Fosfolipasa A

Fosfoporina E

Algunas protenas contienen

uno o mas lpidos
covalentemente ligados de
varios tipos: cidos grasos de
cadena larga, isoprenoides,
esteroides o derivados
glucosilados de
fosfatidilinositol, GPI.
Estos lpidos proveen una ancla
hidrofbica que se inserta en la
bicapa lipdica y mantiene la
protena en la superficie de la
membrana. Muchas protenas
tienen mas de una molcula
lipdica.
Esta asociacin es ms dbil
que para las membranas
integrales y en algunos casos
reversible.
Ms all de servir de ancla, los
lpidos pueden tener un rol
especfico, como la de dirigir la
protena a su localizacin

Dinmica de membrana
Estado paracristalino (gel)

La base de la flexibilidad de la membrana

se basa en las interacciones no covalentes
entre los lpidos de la membrana.
La estructura y flexibilidad de la bicapa
depende de la T y los tipos de lpidos
presentes: A relativamente bajas Ts los
lpidos forman una fase gel semislida, es
paracristalina y el movimiento est
limitado. A relativamente altas Ts est en
un estado lquido desordenado o estado
fludo, con cadenas hidrocarbonadas en
movimiento constante por rotacin acerca
de enlaces C-C en las cadenas laterales de
los lpidos; el interior es ms fluido que
slido y la bicapa parece un mar de
constante movimiento. A Ts intermedias
los lpidos existen en un estado lquido
ordenado donde el movimiento de las
cadenas laterales es menor, pero se tiene
movimientos laterales en el plano de la
membrana, lo que puede observarse en
liposomas construidos de un solo lpido,
pero las membranas biolgicas contienen
muchos lpidos con una variedad de
cadenas de cidos grasos y no tienen
cambios bruscos de fase con la T.

Estado fluido

Calor produce
movimiento trmico
de cadenas laterales
(transicin gelfluido)

A Ts en el rango fisiolgico (20-40C), cidos grasos de cadena larga (16:0

y 18:0) empacan bien en un arreglo lquido ordenado, pero las ondas en
cidos grasos insaturados interfieren con este empaque favoreciendo el
estado lquido desordenado. Los cidos grasos de cadena ms corta
El contenido de esteroles es otro factor determinante del estado lipdico,
reduciendo la libertad de movimiento de cidos grasos adyacentes por su
estructura rgida. La presencia de esteroles reduce la la fluidez en el
corazn de la membrana favoreciendo el estado de lquido ordenado en e
incrementa el espesor de la capa lpdica.
Las clulas regulan su composicin lipdica para tener una fluidez continua
de membrana bajo diversas condiciones de crecimiento, p.e., las bacterias
sintetizan mas cidos grasos insaturados cuando cultivadas a bajas
temperaturas que cuando cultivadas a temperaturas ms altas; como
consecuencia de ello van a tener aproximadamente el mismo grado de
fluidez

Movimiento en
membrana

A T fisiolgica ocurre difusin

transmembranal de lpidos o flip-flop
de un lado de la membrana a otra. Este
movimiento requiere que un grupo polar o
cargado deje su ambiente acuoso y pase
al interior hidrofbico, proceso con gran
cambio de energa libre
A veces este movimiento es esencial,
como durante la sntesis de la membrana
plasmtica bacteriana, pues los
fosfolpidos se producen en la superficie
interior de la membrana y deben sufrir
una difusin flip-flop para entrar en la
superficie externa de la bicapa; lo mismo
ocurre en las eucariticas cuando los
lpidos sintetizados en un organelo se
mueve de la parte interna a la externa y
dentro de otros organelos.
Las flipasas son las protenas que facilitan
esta difusin proveyendo una ruta
transmembranal mucho ms favorable
energticamente y mucho ms rpida que
el movimiento no catalizado.

Movimientos en
membrana

Los lpidos tambin pueden moverse lateralmente en la membrana

intercambiando lugares con los lpidos vecinos. Una molcula de lpidos presente
en una de las capas de la membrana de un eritrocito se mueve tan rpidamente
que puede circumnavegarlo completamente en segundos (1 /s)
Este movimiento lateral puede evidenciarse marcando una superficie celular de
alrededor de 5 2. La superficie celular fluoresce debido al marcador, las
molculas de una pequea parte de la membrana se someten a un pulso intenso
de laser y se blanquea, la intensidad de fluorescencia se recupera conforme las
molculas blanqueadas difunden fuera de la regin y molculas no blanqueadas
difunden dentro de ella; la tasa de recuperacin despus del fotoblanqueado
(FRAP) depender de el coeficiente de difusin, este FRAP tambin se usa para
medir difusin de protenas.
Otro mtodo involucra el seguimiento de molculas individuales de lpidos
marcadas en un perodo ms corto de tiempo, estos resultados confirmaron el
movimiento lateral y que este poda ser inhibido

Lpidos y protenas
integrales

La distribucin de lpidos no es al azar. Glucoesfingolpidos (cerebrsidos y

ganglisidos) que tienen cidos grasos de cadenas largas saturadas forman
grupos que excluyen a los glicerofosfolpidos que tienen un cido graso
insaturado y un cido graso saturado ms corto..
Los cidos grasos largos de los esfingolpidos pueden formar asociaciones
mas estables y compactas con los anillos del colesterol.
Los microdominios colesterol-esfingolpidos son mas gruesos y mas
ordenados que los microdominios vecinos de fosfolpidos en la hoja exterior
de la membrana, y son ms difcilmente solubiloizados por detergentes no
inicos. Se comportan como balsas en estado lquido ordenado de
esfingolpidos en un mar de fosfolpidos en estado lquido desordenado.
Estas balsas son ricas en 2 clases de membranas integrales: las ancladas a
la menbrana por 2 cidos grasos saturados covalentemente unidos (2
palmitoilos o un palmitoil y un miristoil) y las protenas ancladas GPI
En la figura se observan las
balsas en un fondo de
fosfolpidos, sobre las balsas se
observan unos picos que son
protenas ligadas a GPI. Notar
que estos picos solo se
encuentran en las balsas. (en
la escala de tiempo que duran
los procesos bioqumicos

Protenas integrales median las

interacciones y adhesin entre las
clulas
La protenas integrales juegan roles diversos algunos llevados a cabo por ciertas
familias como:
1. Las Integrinas, protenas heterodimricas (2 subunidades diferentes y )
ancladas a la membrana por una sola hlice transmembranal hidrofbica en cada
subunidad. Las subunidades se combinan para formar un sitio especfico de unin
para protenas extracelulares como colgeno y fibronectina. Un determinante
comn para unirse a varias parejas de integrinas es la secuencia Arg-Gly-Asp
(RGD). Tambin sirven como receptores y transductores de seales. Regulan
muchos procesos: agregacin de plaquetas en el sitio de una herida, reparacin
de tejido. Actividad de clulas inmunes y la invasin de tejido por tumores
2. Las Caderinas, llevan a cabo interacciones (homoflicas) con caderinas idnticas
en una clula adyacente
3. Las Protenas similares a Inmunoglobulinas pueden llevar a cabo
interacciones homoflicas con sus contrapartes idnticas en otra clula o
heteroflicas con una integrina en una clulla vecina
4. Las Selectinas, tiene dominios extracelulares que en presencia de Ca 2+ se unen
a polisacridos especficos en la superficie de una clula adyacente. Est
presentes primariamente en clulas sanguneas y en clulas endoteliales de los
vasos sanguneos, siendo parte esencial del proceso de coagulacin de la sangre.
Las protenas integrales tambin tienen que ver con transportadores y canales
inicos, como receptores para hormonas, neurotrasmisores y factores de
crecimiento. Son centrales en fosforilacin oxidativa y fotosntesis y en el
reconocimiento clula-clula y antgeno-clula en el sietma inmune. Tambin son
importantes en la fusin de membranas que acompaa a la exocitosis,
endocitosis y la entrada de muchos tipod e virus dentro de las clulas
hospedadoras.

Cuatro ejemplos de 4 tipos de

membranas integrales que
intervienen en las interacciones
clula-clula

Fusin de membranas

1.
2.
3.

4.
5.

Involucra:
Reconocimiento
Acercamiento de superficies
Ruptura de superficie con
fusin de hojas exteriores
(hemifusin)
Fusin de bicapas para formar
bicapa continua nica
La fusin es disparada en el
tiempo apropiado o en
respuesta a una seal
especfica (endocitosis
mediada por receptores o
secrecin regulada).
Intervienen protenas de
fusin llevando a cabo
reconocimiento especfico y
distorsin local de la bicapa

Entrada de
virus

El virus es rodeado por membrana que

contiene muchas molculas de protena
de hemaglutinacin (HA)
El virus induce la endocitosis que genera
el endosoma, pequea vescula
membranosa de pH 5, a este pH la HA
sufre cambio conformacional exponiendo
una secuencia llamada pptido de
fusin, que permite a la protena
penetrar en la membrana del endosoma.
La HA se curva en s misma juntando sus
extremos, lo que lleva a las 2
membranas a fusionarse.
La HA funciona como trmero.
La fusin implica una hemifusin
intermedia en la que la hoja superior de
la membrana viral se une a la hoja
inferior de la membrana endosmica,
mientras que las otras 2 hojas mantienen
su continuidad.
La fusin completa resulta en la
liberacin de los contenidos virales
dentro del citoplasma celular

Resumen de tipos de
transporte

Cada clula requiere transportar

material dentro y fuera de ella.
Unos pocos compuestos no polares
se disuelven en la membrana y la
cruzan.
Para los polares o cargados se
requiere protenas.
A veces solamente facilita la difusin
de un soluto a favor de su gradiente
de concentracin.
El movimiento contra gradiente de
concentracin o de carga elctrica o
de ambos requiere energa.
La energa proviene directamente de
la hidrlisis de ATP, o mediante el
movimiento de otro soluto a favor de
su gradiente electroqumico con
suficiente energa para llevar otro
soluto contragradiente.
Los iones se pueden mover a travs
de canales formados por protenas o
facilitados por ionforos, que
enmascaran su carga.
Molculas pequeas se mueven
porprotenas como canales
transmembranosos, portadores o

Transporte pasivo

Cuando 2 compartimentos acuosos no tienen la misma concentracin de solutos,

gradiente qumico, y estn separados por una membrana, el soluto se mueve por
difusin simple de la regin de mayor concentracin a la de menor (a). Cuando se
trata de iones hay un gradiente electroqumico, potencial de membrana, Vm
(v o mv), la que ejerce una fuerzaque se opne al movimiento de iones
incrementndo el Vm; la direccin de movimiento depender del gradiente qumico
y del gradiente elctrico, que juntos se definen como gradiente electroqumico o
potencial electroqumico (b)

Difusin
facilitada o
transporte
pasivo
Solutos polares o cargados deben dejar

sus interacciones con el agua,

difundirse 3 nm a travs de solvente
lipdico.
La energa perdida se gana al
abandonar la membrana al otro lado y
se rehidrata.
Hay un estado intermedio de estado de
alta energa y debe salvarse una
barrera de energa de activacin para
alcanzar este estado.
Protenas que aceleran el movimiento
del soluto son los transportadores o
permeasas.
Las permeasas se unen a los sustratos
con especificidad estereoqumica
mediante mltiples interacciones no
covalentes dbiles el G negativo
asociado con estas interacciones
(Gunin) contrabalancea el G positivo
que acompaa la deshidratacin
(Gdeshidratacin), disminuyendo la Gt para
la difusin transmembrana
El resultado es el ,incremento en varios
rdenes de magnitud en la tasa de
pasaje del sustrato

El transportador de glucosa en los eritrocitos (GLUT1) tiene hlices

transmembranosas constan de 3 a 4 AAs. 9 de las 12 hlices contienen 3 o
mas AAs polares o cargados a menudo separados por varios residuos
hidrofbicos

Un diagrama de rueda helicoidal muestra la distribucin de AAs polares y no polares en

la superficie de un segmento helicoidal. La hlice est diagramada como si se observara
a lo largo de su eje desde el extremo amino; los AAs adyacentes estn conectados con
flechas y cada AA es colocado alrededor de la rueda en la posicin que ocupa en la
hlice. Los residuos polares (azul) estn en un lado de la hlice y los hidrofbicos
(amarillo) en la otra, lo que es por definicin una hlice anfiptica(a). La asociacin laldo
a lado de 5 o 6 hlices anfipticas, cada una con su cara polar orientadas hacia una
cavidad central, puede producir un canal transmembranoso alineados con AAs polares y
cargados

Cintica del transporte de glucosa en eritrocitos.- La cintica de la difusin

facilitada es similar a la de una reaccin catalizada enzimticamente; La tasa
inicial de entrada de glucosa en el eritrocito, Vo, depende de la inicial
concentracin de glucosa en el exterior [S]fuera (a). El ploteo de las recprocas
de los datos de (a) dan resultados similares a los de las reacciones
enzimticas

Modelo de
transporte por
GLUT1

El transportador existe en 2 conformaciones T 1

con el sitio ligador expuesto en la superficie
externa y T2 con el sitio ligador expuesto en la
superficie interna.
El transporte ocurre en 4 pasos. (1) glucosa en
la sangre se une a un sitio estereoespecfico en
T1, bajando la energa de activacin para (2) un
cambio conformacional de Sfuera. T1 a Sdentro. T2,
efectuando el pasaje transmembranoso de la
glucosa. (3) La glucosa es liberada de T2 en el
citoplasma, y (4) el transportador retorna a la
conformacin T1, libre para transportar otra
molcula de glucosa
Como no se forman o rompen enlaces qumicos
en la conversin de Sfuera a Sdentro, ni esl S ni el P
son intrnsecamente ms estables y el proceso
de entrada es completamente reversible. Tal
sistema es incapaz de acumular
concentraciones dentro de la clula a
concentraciones por encima del medio
circundante; simplemente alcanza el equilibrio
de glucosa en ambos lados de la membrana
mucho ms rpidamente que en ausencia del
transportador especfico

Intercambiador de CloruroBicarbonato

CO2 de desecho liberado por tejidos

respirando en la sangre entran al
eritrocito donde se convierte en
bicarbonato (HCO3-) por la enzima
anhidrasa carbnica. El HCO3- reentra en
la sangre para transportarlo a los
pulmones, ah reentra en en el eritrocito
y es convertido en CO2, que es
eventualmente liberado en el espacio
pulmonar y exhalado. Este circuito
requiere de un movimiento muy rpido a
travs de la membrana.
El intercambiador clorurobicarbonato o protena
intercambiadora de aniones (E),
incrementa la permeabilidad de la
membrana del eritrocito al HCO3- en mas
de mil veces. Media el movimiento
simultneo de 2 aniones que se mueven
en sentido opuesto, antiport, (HCO3- y
Cl-), sin transferencia neta de carga.
El acoplamiento de los movimientos de
estos aniones es obligatorio, en ausencia
de Cl- el transporte de HCO3- se detiene.
Este es un sistema cotransportador
antiparalelo

Tres clases generales de sistemas de transporte que difieren en el

nmero de solutos transportados y la direccin en la que stos son
transportados. Esta clasificacin no nos dice si requieren energa
(transporte activo) o no requieren de energa

Transporte activo
Tipos de transporte activo: El transporte activo es termodinmicamente
desfavorable y tiene lugar solamente cuando se acopla directa o indirectamente a
un proceso exergnico (absorcin de luz solar, reaccin de oxidorreduccin,
hidrlisis de ATP o flujo de alguna otra molcula a favor de su gradiente de
concentracin). En el transporte activo primario, la energa liberada por la
hidrlisis del ATP dirige el movimiento de soluto contra un gradiente
electroqumico (a).
En el transporte activo
secundario, se ha
establecido por transporte
activo primario un
gradiente de ion X (a
Menudo Na+). El
movimiento de X a favor de
su gradiente electroqumico
provee ahora la energa
para cotransportar un
segundo soluto (S) contra su
gradiente electroqumico
(b).
La cantidad de energa
Necesaria para el transporte
de un soluto contra
gradiente puede calcularse
del gradiente inicial de
concentracin; la ecuacin
general es:
G= G+ RT ln[P]/[S]

Transporte activo

Cuando el transporte de un soluto de una regin con concentracin C1 a

otra donde su concentracin es C2, no se rompen enlaces y G es cero,
Gt (G para transporte) es entonces:
Gt= RT lnC2/C1
Cuando el soluto es un ion, su movimiento sin un contraion acompaante
resulta en la separacin endergnica de sus cargas positivas y negativas,
produciendo un potencial elctrico, tal proceso se dice es electrognico.
El costo energtico de mover un ion depende de un potencial
electroqumico, la suma de los gradientes qumicos y elctricos da:
Gt = RT ln(C2/C1) + Z F
donde Z es la carga del ion, F es la constante de Faraday (96 480 J/V.mol) y es el
potencial elctrico de transmembrana (en voltios)
Las clulas eucariticas tienen tpicamente potenciales elctricos a travs de sus
membranas plasmticas de aprox. 0,05 a 0,1 V (con el interior negativo en relacin al
exterior)
El mecanismo de transporte activo es de gran importancia en biologa. La formacin
de ATP en mitocondrias y cloroplastos ocurre por un mecanismo que es
esencialmente el transporte de iones dirigido por ATP operando en reversa. La
energa hecha disponible por el flujo espontneo de protones a travs de una
membrana se calcula por la ecuacin propuesta anteriormente.
G para el flujo a favor del gradiente electroqumico tiene valor negativo y
Gpara transporte contra un gradiente electroqumico tiene un valor
positivo

ATPasas tipo P
Son transportadores de cationes dirigidos por el ATP que son reversiblemente
fosforilados por ATP como parte del ciclo de transporte; la fosforilacin fuerza un
cambio conformacional que es bsico para mover el catin a travs de la
membrana.
Todas estas ATPasas son similares en la secuencia de AAs, especialmente cerca
del Asp que sufre fosforilacin y todas son sensibles a inhibicin por vanadato.
Estn ampliamente distribuidas en tejidos animales la ATPasa Na+K+(antiporter
para Na+ y K+) y la Ca2+ ATPasa (un uniporter para Ca2+ son ubicuas y mantienen
la composicin
inica
Las
clulas parietales
del del citosol y el medio extracelular.
estmago tienen ATPasa que
bombea H+ y K+ a travs de
la membrana plasmtica,
acidificando el contenido
Estomacal. Las bacterias las
usan para bombear hacia
fuera iones metlicos
txicos tales como Cd2+ y
Cu2+. En plantas vasculares
y mohos como Neurospora
bombean protones fuera de
la clula para crear
diferencias electroqumicas
importantes a travs de la
membrana

ATPasa Na+
K+

En casi todo animal la concentracin de

Na+ es menor en la clula que en el
exterior y la de K+ es mayor. Este
desbalance es mantenido por un
sistema de transporte de la membrana.
La ATPasa Na+K+ descubierta por Jens
Skou, 1957, acopla la hidrlisis del ATP
al movimiento simultneo de Na+ y K+.
Por cada molcula de ATP hidrolizado el
transportador mueve 2 K+ hacia dentro
y 2 Na+ hacia fuera, por lo que se crea
una separacin neta de cargas a travs
de la membrana resultando en un
potencial de transmembrana de -50 a
-70 mV (adentro negativo en relacin
con el exterior)
Se ha ideado un modelo para explicar
el mecanismo de accin: La ATPasa
tiene 2 formas una fosforilada con alta
afinidad por el K+ y baja afinidad por el
Na+; y una forma desfosforilada con
alta afinidad por el Na+ y baja afinidad
por el K+

ATPasa Na K
+

En clulas animales este

transporte activo es
primariamente responsable
estableciendo y manteniendo
las concentraciones
intracelulares de Na+K+ y
generando el potencial
elctrico de transmembrana.
El potencial elctrico es
central para la sealizacin
elctrica en neuronas y el
gradiente de Na+ se usa
para dirigir el cotransporteb
de soluto contragradiente de
solutos en muchos tipos de
clulas.
El rol central de este
transportador se refleja en la
inversin hecha en esta sola
reaccin, aproximadamente
25% del consumo total de
energa de un ser humano en
reposo

Reversibilidad de
ATPasas

Las ATPasas de tipo F

catalizan el paso de
protones a travs de la
membrana dirigidas por
la hidrlisis de ATP, pero
tambin puede catalizar
la sntesis de ATP
(flechas rojas) como flujo
de protones a favor de
su gradiente
electroqumico. Cuando
funciona de esta ltima
manera se llaman ATP
sintetasas
Esta es la reaccin
central en la
fosforilacin oxidativa y
fotofosforilacin. La
gradiente de protones
necesarios es producido
por otros tipos de
bombas de protones
disparadas por oxidacin
de sustratos o luz solar.

Asimilacin de lactosa por

E.coli

La oxidacin de
combustible
promueve el
transporte primario
de protones ,
establece un
gradiente de
protones y
potencial elctrico.
El transporte activo
secundario de
lactosa en la clula
involucra y es
enteramente
dependiente de un
cotransporte de
protones y lactosa
por el
transportador de
lactosa

Transporte de lactosa: Cuando las reacciones de oxidacin metablicas

generadoras de energa son bloqueadas por el cianuro, el transportador de
lactosa permite el equilibrio de lactosa dentro y fuera de la clula va
transporte pasivo. Mutaciones que afectan Glu325 o Arg302 tienen el mismo
efecto

Transporte de glucosa en el intestino: Es cotransportada con Na+ a travs de la

membrana plasmtica dentro de las clulas epiteliales. Se mueve a travs de
la clula a la superficie basal de donde pasa a la sangre va GLUT2, un
transportador pasivo de glucosa. La ATPasa Na+K+ contina bombeando Na+
para mantener el gradiente que permita la asimilacin de glucosa.

Molcula de valinomicina, ionforo que liga K+, en la imagen se observa los

contornos superficiales como malla transparente a travs de una estructura del
pptido y un tomo de K+ (verde). Los tomos de oxgeno (rojo) que ligan al K+ son
parte de una cavidad central hidrofbica. Los AAs hidrofbicos (amarillo) cubren la
superficie externa de la molcula. Debido a que el exterior del complejo
valinomicina-K+ es hidrofbico, ste difunde rpidamente a travs de membranas.
La disipacin del gradiente inico mata a las clulas microbianas convirtindolo en
un antibitico potente

Acetil colina

El aceptor de acetil colina es esencial para el pasaje de una seal

elctrica de una neurona motora a una fibra muscular en la unin
neuromuscular. La acetilcolina liberada por la neurona motora se
difunde unos pocos m a la membrana plasmtica de un miocito
donde se une a un receptor, lo que fuerza un cambio
conformacional en l causando una apertura del canalEl receptor
permite el paso de Na+ Ca2+ y K+ con igual facilidad