INTEGRANTES:

Karol Hernndez
Cristina Lpez
Luz Maza
Bryan Melgar
Leonardo Tuza

Especiacin de biodisponibilidad
de yodo y bromo en algas
comestibles por
HPLC-ICP-MS

INTRODUCCIN

El yodo y el bromo son elementos distribuidos de manera desigual en el suelo, agua y en la atmosfera, y
se los puede encontrar tanto en elevadas concentraciones como en bajas concentraciones.
Algas Acumulacin de oligoelementos son los elementos qumicos, presentes en seres vivos
ausencia y exceso son perjudiciales.
Retencin polisacrido y protenas acumulacin de elementos esenciales como txicos.
Yodo Afecta la salud a travs de la glndula tiroides hipo e hipertiroidismo, bocio, problemas de
embarazo
Hipotiroidismo no produce suficiente hormona tiroidea en la sangre
Hipertiroidismo exceso de produccin y secrecin de hormonas tiroidea.
Bocio aumento de tamao de la glndula tiroides

Bromo uso teraputico , agente antiepilptico forma de bromato

Fraccin Biodisponible para los seres humanos fraccin de un determinado nutriente circulacin
sistmica

MATERIALES Y MTODOS
INSTRUMENTACIN
Determinacin total de Bromo y Yodo
Columna de intercambio
aninico de 250mm x 4mm

Digestin alcalina
Laboratorio de
microondas con tubos
cerrados

Mortero de gata

pH- metro

Procedimiento in vitro
Dilisis

REACTIVOS
Solucin estndar de
Bromo y Yodo

1000 ppm

TMAH

25% en H2O - MeOH

Enzimas digestivas:
Pancreatina
Pepsina
Sales biliares
HCl

37%

NH4NO3

97%

NaHCO3

99,8%

TeCl2
Y(NO3)3
HNO3

10% (v/v)

MUESTRAS DE ALGAS
ALGAS ROJAS

ALGAS PARDAS

KOMBU

DULSE
WAKAME

NORI

JUDIA DE MAR

ALGAS VERDES

LECHUGA
DE MAR

SPIRULINA

OTRAS ALGAS

LECHUGA DE
MAR FURBELOWS

AGAR - AGAR

DIGESTIN IN VITRO
Se aade 20 ml de agua
ultra pura y se deja
reposar por 15 min

Se ajusta el pH a 2 con
la adicin de:
HCl 6M
0,15 g de solucin al 6%
(m/v) de pepsina y HCl
6M

Los matraces se
incuban a 37C con una
plataforma agitadora a
150 rpm durante 120
min

Se colocan en bao de
hielo para detener el
proceso de digestin
enzimtico

Se aade 5 ml de una
solucin intestinal al 4%
(p/v) de pancreatina y
otra solucin al 2,5%
(m/v) de sales biliares
disueltas en NaHCO3
0,1 M

Se colocan los tubos de

membrana de dilisis
con un pH de 7,5
ajustado con HCl

El dializado y la
fraccin residual no
dializada se transfieren
a viales de polietileno y
se pesan

Se mantienen los viales

a
-20C antes de las
mediciones

Se pulveriza 0,5 g de
algas en un Erlenmeyer
de 100 ml (3 veces).
Se simula la digestin
con enzimas: pepsina y
pancreatina

DIGESTIN ALCALINA ASISTIDA POR MICROONDAS

Pesar 0,1 g
de las
muestras
de algas
en polvo

Colocar en los
tubos de tefln
del
microondas,
con adicin de
5 ml de agua
ultrapura y 5
ml de TMAH al
25%.

Los tubos se
taparon y se
sometieron a
irradiacin
por
microondas.

Tiempo de 10 minutos para

el
aumento
de
la
temperatura de 20 a 200C y
una etapa final en 200 C
durante 5 min

Dejar enfriar por

30 min

los extractos
las muestras
transfirieron
tubos cnicos
centrifugacin
25ml.

de
se
a
de
de

Fueron
centrifugados
durante 10
min a 3000
rpm.

El sobrenadante se
transfiri a matraces
volumtricos de 50 ml

Se realiz para evaluar

las muestras dializadas
y
no
dializadas
obtenidas por mtodo
in vitro.

El residuo slido se
enjuag con agua, y se
centrifug de nuevo

Los enjuagues de agua

se combinaron con el
sobrenadante.

Cada muestra de las

algas se trat tres
veces, y dos eran
blancos de reactivo.

Los
extractos
se
filtraron a travs de
una malla de acetato
de celulosa con un
dimetro de poro de
0,45 um.

DETERMINACIN DE BROMO Y YODO POR ICP-MS

Tecnologa
de
celda de colisin

Los extractos de
TMAH
fueron
previamente
diluidas

Estndares
telurio (125Te) 2
ppm para yodo, e
Itrio (89Y) 2 ppb
para bromo.

Flujo de H2 de 80
ml/min
para
reducir el Ar 38 y
40 e H1 en
relacin m/z

La exactitud del
mtodo
se
evalu mediante
el anlisis del
NIES09 (Sargazos) por
triplicado.

MEDICIONES DEL HPLC- ICP-MS

El intercambio aninico
permiti la resolucin de
cuatro especies de yodo
(yoduro, yodato, MIT y DIT)

La velocidad de flujo se
increment a 1,5 ml min-1
dentro de 1 min, y finalmente
se mantuvo a 1,5 ml min-1
durante 8 min.

Fase mvil que contiene

nitrato de amonio 175 mM y
15% v/V de metanol a pH
3,8.

la elucin rpida de yoduro

se da en tiempos de
retencin de 14,6 0,4 min.

La elucin es isocrtica:
primeros 8 minutos fue 0,5
ml min-1 para mejorar la
resolucin de las especies
yodato, MIT y DIT.

La salida de la columna fue

directamente conectada al
nebulizador

tecnologa de celda de
colisin relacin H2 / He en
4,5 ml min-1, Telurio e itrio
(estndares internos) se
mezclaron continuamente el
eluato cromatogrfico con un
flujo externo de 0,4 ml min -1

DETERMINACIN DE GRASAS, PROTENAS, CARBOHIDRATOS

Y FIBRA DIETTICA

Contenido de grasa en
las muestras de algas
comestibles se evalu
mediante una extraccin
con disolvente con ter
de petrleo

El contenido de
protena se evalu
mediante la
determinacin de
nitrgeno

el contenido de
hidratos de carbono
en algas comestibles
fueron cuantificados
por
espectrofotometra.

Cromatograma Wakame de abundancia de bromo

RESULTADOS
Cromatograma Wakame de abundancia de yodo

Biodisponibilidad de yodo

Biodisponibilidad de bromo

Influencia de los principales constituyentes de los alimentos en yodo y bromo en especies

biodisponibles

Biodisponibilidad de yodo y bromo se reduce al igual que el aumento del contenido de

protena en las algas marinas
Correlacin positiva entre los carbohidratos y la dieta fibra con yodo se podra atribuir a
la alta proporcin de la fibra diettica en el alga marina
Biodisponibilidad de yodo aumenta cuando el nivel de hidratos de carbono y fibra
diettica en las muestras es ms alto.

CONCLUSIONES
Yoduro fue la principal especie de yodo que se encuentran en
dializados de las algas marinas, que van desde 33 hasta 100%
del yodo total.
La fraccin de bromo ms moderada dializabilizada va desde
proporciones (de 9 a 40%), el bromuro fue las principales
especies de bromo que se encuentran en los dializados de las
algas marinas, y la proporcin era de entre 82 y 100% del
bromo total biodisponible.
Se encontraron altos niveles de protena en las algas marinas
para reducir la biodisponibilidad de yodo y bromo.