UNIVERSIDADE ESTADUAL DO CEAR

CENTRO DE CINCIAS DA SADE

INSTITUTO SUPERIOR DE CINCIAS BIOMDICAS
CURSO DE ESPECIALIZAO EM FISIOLOGIA HUMANA

ANLISE DA HISTOPATOLOGIA PULMONAR DE CAMUNDONGOS EXPOSTOS

A PARTCULAS TOTAIS SUSPENSAS PROVENIENTES DA COMBUSTO DA
BIOMASSA RESIDUAL DO BENEFICIAMENTO DA CASTANHA DE CAJU

AUTOR: GARDILENE MONTEIRO

ORIENTADOR: PROF. ME. DANIEL SILVEIRA SERRA
COORDENADOR DO LABORATRIO LBR: FRANCISCO SALES VILA CAVALCANTE

1. INTRODUO

Resduos slidos
Casca da castanha de caju (CCC).
Efluentes lquidos
Lquido da castanha de caju (LCC).
A CCC
produz energia trmica e eltrica.
Combusto
Promove a liberao de grande quantidade de gases.
Os principais gases liberados so: o dixido de carbono, monxido de carbono,
metano, oznio, xidos de nitrognio, dixido de enxofre, hidrocarbonetos
policclicos aromticos e compostos orgnicos volteis.
(LEWN et al.,
2004)

As consequncias agudas e crnicas podem ocorrer tanto em indivduos

previamente saudveis ou em pacientes com doena pr-existente, como a asma.
(CAVALCANTE, 2015)

 Para avaliar os danos que os gases liberados pela combusto da CCC podem
desencadear na funo pulmonar de animais, necessrio a realizao de ensaios
biolgicos a fim de quantificar as possveis leses ocasionadas na mecnica
respiratria.
Cavalcante (2015, p. 1)
Nesse sentido, o presente trabalho buscar investigar a influncia do PTS
(partculas totais suspensas) advindos da combusto da CCC, atravs da anlise de
seus efeitos a sade humana, por meio de experimentao animal em camundongos
sadios e induzidos asma, possibilitando o estudo histopatolgico e
consequentemente da capacidade pulmonar em ambos os grupos. A fim de
preenchermos as possveis lacunas ociosas na literatura e proporcionar a criao de
padres de qualidade e segurana para os indivduos que constantemente so
expostos a estes gases.

2. OBJETIVOS

GERAL
Analisar a histopatologia do tecido pulmonar de camundongos sadios e asmticos
submetidos exposio de PTS provenientes da combusto da CCC.

ESPECFICOS
Analisar a morfometria diante dos efeitos da exposio de PTS provenientes da
combusto de CCC em camundongos sadios e asmticos.
Investigar as alteraes histolgicas, por meio da morfometria pulmonar,
celularidade e ndice de broncoconstrio.
Analisar os efeitos dos poluentes provenientes da combusto da CCC em
camundongos sadio e asmticos.
Induzir camundongos a asma para observao da capacidade pulmonar diante dos
efeitos de CCC.

3. JUSTIFICATIVA E OBJETO
Face a grande comercializao da castanha de caju e a utilizao da CCC como
biocombustvel, torna-se necessrio estudos que objetivam avaliar os efeitos dos
gases produzidos pela combusto dessa biomassa residual.
O presente trabalho busca analisar os efeitos da exposio de PTS provenientes
da combusto da CCC, analisando os provveis impactos desse material
particulado no parnquima pulmonar, mediante a anlise histopatolgica do
tecido pulmonar de camundongos sadios e asmticos submetidos a exposio de
PTS provenientes da combusto da CCC.

4. METODOLOGIA
ANIMAIS
Todos os protocolos experimentais envolvendo o uso de animais sero encaminhados
para aprovao do Comit de tica para Uso em Animais (CEUA) da Universidade
Estadual do Cear (UECE).
Sero utilizados camundongos, linhagem Balb/C, do sexo feminino, com massa
corporal 205 g, provenientes do biotrio da Universidade Estadual do Cear
(UECE).

GRUPOS EXPERIMENTAIS
Sal/Sal (n=8);
Sal/PTS (n=8);
OVA/PTS (n=8).

PROTOCOLO DE INDUO DE ASMA CRNICA

A dose da sensibilizao
subcutnea ser de 20 g de
OVA, diluda em 200 L de
DPBS (Dulbeccos phospate
buffered saline).
A dose do desafio intranasal
ser de 40 g de OVA, diluda
em 50 L de DPBS.

ANLISE DAS PARTCULAS

Coleta do PTS provenientes da combusto da casca da castanha de caju
a - computador para aquisio de dados, b- Fieldlooger sistema para monitoramento e controle de dados, c - Queimador de
biomassa, d - Termopares para acompanhamento das temperaturas, e - Chamin, f f - Sistema para aquisio dos Fluxos de
ar e GLP, g Filtro em fibra de vidro, h - Cmara para atmosfera de coleta, i - Fluxmetro acompanha o fluxo de coleta, j Bomba SKC para controle de Fluxo.

Preparao das suspenes aquosa de PTS

Esquema para preparao da soluo do material particulado.

Fonte: o autor

Instilao intranasal

Os animais sero sedados com sevofluorano.

A instilao provocar um reflexo de apnia seguido por inspirao profunda que conduz o lquido
para dentro do pulmo.
Instilaes contendo 15 g de PTS em 30 L de gua destilada.
Anlise histopatolgica do tecido pulmonar
Os animais sero sacrificados por ensanguinamento.
Fixao e preparo das laminas para microscopia ptica
O pulmo direito ser retirado para analise histolgica sendo ento profundindo com soluo Millonig
modificada durante aproximadamente um minuto.
Depois da fixao, o material ser processado como de rotina para estudo histolgico e emblocado em
parafina, obtendo-se, ento, cortes histologicos com 4 mm de espessura.
As laminas contendo os cortes pulmonares sero coradas com HE e analisadas por microscopia optica
(Axioplan, Zeiss, Oberkochen, Alemanha), segundo seus aspectos qualitativos e quantitativos.

Anlise Qualitativa
Toda a superfcie da lmina ser observada com todas as estruturas
pulmonares representadas, em aumento de 100x.

Anlise Quantitativa

Reticulo com 100 pontos e 50 linhas

utilizado para anlise histolgica.

As lminas sero coradas com HE, e sero

analisadas por meio da tcnica convencional
de contagem de pontos (point-couting) .
Sero avaliados dez campos aleatrios e no coincidentes.
Morfometria,
Dimetro alveolar mdio,
Celularidade,
ndice
de broncoconstrio.
(GUNDERSEN et al., 1988; WEIBEL, 1990; WEIBEL; KISTLER; SCHERLE, 1966),

Fonte: o autor

Morfometria Alveolar
Aumento de 400x.
Ser quantificada a frao de rea ocupada por:
Alvolos normais;
Alvolos colapsados;
Alvolos hiperinsuflados.

Fonte: o autor
(WEIBEL, 1990).

Anlise do dimetro alveolar mdio

Aumento de 400x.
Nmeros de septos alveolares cortados
pelos interceptos.

Fonte: o autor

Celularidade
Aumento de 1000x.
Para quantificao da celularidade total;
Nmero de clulas polimorfonucleares (PMN);
Mononucleares (MN) no tecido pulmonar.

ndice de Broncoconstrio
O dimetro interno das vias areas ser computado, contando-se o nmero de pontos que
caram na luz das vias areas e aqueles que caram no msculo liso da via area e
epitlio.

Fonte: o autor

5 ATIVIDADES, CRONOGRAMA E ORAMENTO

ORAMENTO: Material e equipamentos fornecidos pela instituio.

REFERNCIAS

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Obrigada!
A compaixo para com os animais das mais nobres virtudes da natureza
humana.
(Charles Darwin)