Biologia (Microbiologia) 2007

2a Aula Terica

Crescimento dos Microrganismos

19/03/07

Assuntos discutidos na ultima aula

Introduo a Microbiologia
Breve Historia da Microbiologia
Os microrganismos
Grandes reas de estudo da Microbiologia

Microrganismos e o ambiente

Sumario da aula

Crescimento microbiano
Mtodos de esterilizao
Meios de cultivo dos microrganismos
Mtodos de inoculao dos microrganismos

Crescimento microbiano

Crescimento celular - aumento coordenado de todos os

constituintes celulares.
Aumento do tamanho de uma clula
Aumento do numero de clulas

Crescimento microbiano - associado ao crescimento de uma

populao de clulas de um dado microrganismo, ou seja, com o
aumento do nmero de clulas da populao
Fisso binria
Gemulao

Tempo de gerao ou de duplicao - o intervalo de tempo

necessrio para que uma clula se duplique ( 10 20min ou ate
Hrs, muitos orgs 1-3h)
Dependente de factores genticos e nutricionais

Crescimento microbiano
O tempo de gerao - calculado na fase exponencial

N=No*2n

Onde
N= nmero final de clulas,
No= nmero inicial de clulas,
n= nmero de geraes

n= log(N) - log(No)/0.301 e g = t/n

g= tempo de gerao,
t= tempo de crescimento

Curva de crescimento padro

Lat

Curva de crescimento padro

A - Fase de latencia
Adaptao ao meio ambiente
No ha multiplicao de clulas bacterianas
Aumento de tamanho e da actividade metablica

B - Fase logartmica ou de crescimento exponencial

Clulas plenamente adaptadas
Aumento do numero de indivduos na populao
Taxa de crescimento constante

C - Fase estacionaria
Inicio de escassez dos nutrientes e aumento de produtos txicos
Equilbrio entre a multiplicao e a morte (no h um crescimento
lquido da populao)
Taxa de crescimento nula

D - Fase de declnio
Esgotamento dos nutrientes excesso de metabolitos acumulados
Taxa de crescimento negativa

Factores ambientais vs crescimento

microbiano
Condies fsicas e qumicas do ambiente influem
positivamente ou negativamente de acordo com o
microrganismo em questo
Temperatura
pH
Oxignio
gua
Presso osmtica
Outros factores

Factores ambientais vs crescimento

microbiano
Temperatura

Factores ambientais vs crescimento

microbiano
De acordo com ptimo de temperatura

Factores ambientais vs crescimento

microbiano
pH
Os ambientes naturais tem uma faixa de pH de 5 a 9
Bactrias - faixa entre 7, com algumas acidfilas
(Thiobacillus de 0,5 a 6,0 com ptimo entre 2 e 3,5) e
outras alcaliflicas (Bacillus e Archaea)
Fungos - tendem a ser mais acidfilos que as bactrias
(pH <5)

Oxignio
Aerbios
Anaerbios facultativos
Anaerbios estritos

Factores ambientais vs crescimento

microbiano
gua - essencial a qualquer microrganismo
Presso osmtica
organismos que requerem altas concentraes de sais para
seu desenvolvimento

Factores adicionais: Fonte luminosa para

fototrficos autotrficos. Presso atmosfrica, para
aqueles que vivem em profundidades.

Mtodos de esterilizao
Formas de eliminao ou remoo dos microrganismos indesejados

Mtodos de esterilizao mais comuns

Calor seco

Estufa
Aparelho especial
Aquecedor e Ventilador

Material de vidro (termoresistente)

Temperatura e tempo necessrio de exposio

Mtodos de esterilizao mais comuns

Calor seco

Aquecimento por rubro vermelho

Uso de lamparinas e bicos de busen
Ansas,fios de platina, pinas, facas

Esterilizao pela chama

Uso de lamparinas e bicos de bunsen
Bisturis, agulhas, boca de tubos, tampes de algodo, laminas e lamelas
Sem atingir a rubescncia

Bico de Bunsen

Mtodos de esterilizao mais comuns

Calor hmido
Autoclave

Vapor em altas presses

Meios de cultura e material cirrgico
Recipiente apropriado (carga)
Autoclave convencional durante 30 minutos uma
temperatura de 121C a 132C.

Mtodos de esterilizao mais comuns

Calor hmido
Banho Maria
Material a esterilizar no entra em contacto com a agua

Pasteurizao
Feito em banho maria durante dias consecutivos
Produtos sensveis que no podem perder qualidade
fsica/qumica
Temperaturas < 100 c

Tindalizacao
Exposio intermitente a 100C do material a esterilizar
Durante trs dias por aproximadamente 90 minutos
1 Morte das formas vegetativas e depois reprodutivas

Mtodos de esterilizao mais comuns

Radiao
Raios Gama Cobalto 60C.
Alterao da composio molecular das clulas ionizao
Altamente penetrante
Peas cromadas e artigos termosensveis

Luz Ultravioleta
Fraco poder de penetrao
til para matar microrganismos na superfcie
Morte por mataces causadas ao nvel do DNA

Mtodos de esterilizao mais comuns

Mtodos qumicos
Utilizam-se cidos e bases
lcoois
O etanol 95% e o hipocloreto de sdio so
substancias muito usadas na esterilizao
qumica
Indicado para artigos sensveis ao calor
Objectos contaminados antes de serem
preparados para esterilizao
Esterilizao da superfcie de trabalho, bem
como dos instrumentos

Meios de cultivo dos Microrganismos

Estudar as propriedades de um determinado
microrganismo
Isolamento do microrganismo
Cultivo em meio de cultura, com a finalidade de
produzir uma cultura pura

Meios de cultivo dos Microrganismos

Meio de cultura sistema artificial constitudo de
uma mistura de nutrientes necessrios para o
crescimento dos microrganismos

Carbohidratos
Sais minerais
Vitaminas
Agua

Factores que influenciam na escolha do meio

Origem do material a ser analisado
Espcie que se imagina estar presente na amostra
As necessidades nutricionais do microrganismo

Meios de cultivo dos Microrganismos

Diferentes meios de cultivo

Meios de cultivo dos Microrganismos

Meios de cultivo comumente usados nos nossos
Laboratrios Microbiologia/Fitopatologia
PDA (Potato Dextrose Agar) e NA (Nutriente Agar)
Composio dos meios NA e PDA

Inoculao dos Microrganismos

Mtodo de estrias
C/ ana ou agulha inocula-se o material fazendo estrias
na superfcie do meio.

Inoculao dos Microrganismos

Mtodo de estrias
Uma placa de Petri contendo meio de cultura slido
aps ter sido riscada com uma ansa de inoculao
contendo Escherichia coli

Inoculao dos Microrganismos

Tcnica de diluio
Diluio sucessiva da soluo original da amostra
(inoculo) em gua destilada estril ou soro fisiolgico
Faz-se inoculao de cada amostra diluda
Isolar um tipo de microrganismo predominante em uma
cultura mista