BIOTECNOLOGIA FORENSE

COMPARACION DE TRES METODOS DE EXTRACION

DE ADN A PARTIR DE RESTOS OSEOS

Qu ES LA BIOTECNOLOGIA?
Todaaplicacin tecnolgicaque utilice

sistemas biolgicos y organismos vivos o sus

derivados para la creacin o modificacin de
productos o procesos en usos especficos.

BREVE CONCEPTO
Es la aplicacin de prcticas cientficas dentro del

proceso legal.Es realizado porinvestigadores

altamente especializados o criminalistas, que
localizan evidencias que slo proporcionan prueba
concluyente al ser sometidas a pruebas en
laboratorios. Parte de la evidencia que hallan a
menudo no puede ser vista a simple vista, a veces
es hasta ms pequea. La ciencia forense ahora
usa de manera rutinaria ADN en delitos
seriamente complejos, solucionando muertes a
partir de estos bloques estructurales de la vida.

METODOS
DACTILOSCOPIA
ODONTOGRAMA
MUESTRAS DE SANGRE Y FLUIDOS

CORPORALES
OSTEOLOGIA

ABSTRACT
El presente estudio se dise para comparar la

eficiencia de tres mtodos orgnicos de

extraccin de ADN amplificable por la tcnica de
Reaccin en cadena de la Polimerasa (PCR) a
partir de muestras de hueso.
Una modificacin del mtodo de extraccin
utilizado por el FBI (Federal Bureau of
Investigation) de los Estados Unidos, denominado
mtodo A, aunque no produjo la mayor cantidad
de ADN, mostr el mejor rendimiento en cuanto a
la calidad requerida para la amplificacin por PCR.

INTRODUCCION
El descubrimiento de las regiones

hipervariables del ADN en el genoma humano

por Wyman y White en 1980, hizo posible el
reconocimiento del potencial del ADN en la
produccin de perfiles genticos tiles para
identificar individuos o indicios biolgicos de
cualquier ndole.
La posibilidad de utilizar restos seos como
fuente para la obtencin de ADN ha
significado un importante impulso en la
aplicacin de las tcnicas de biologa
molecular para mltiples fines forenses
cuando no se cuenta con otro tipo de

El hueso, a diferencia de los tejidos

conjuntivos, posee componentes

extracelulares calcificados que lo hacen un
material duro, capaz de resistir en el tiempo
ms que el resto de los tejidos

MATERIALES Y METODOS
SELECCIN DE MUESTRAS
PULVERIZACION DE MUESTRAS
CUANTIFICACION Y PUREZA DE LOS ACIDOS

NUCLEICOS
AMPLIFICACION POR PCR
ELECTROFORESIS EN POLISACARIDOS CON
TINCION DE PLATA
BUSQUEDA DE INHIBIDORES DE LA PCR

RESULTADOS OBTENIDOS
Los resultados promedio de las extracciones de los huesos

incluidos en este estudio para los diferentes parmetros

(cuantificacin de cidos nucleicos, cidos ribonucleicos,
protenas y pureza de los extractos), con los 3 mtodos
utilizados, se resumen en el cuadro 2. Rendimiento de la
extraccin de cidos nucleicos, segn el mtodo de
cuantificacin: Solo el mtodo de DNA Strips mostr una
diferencia significativa (p= 0.003) en la comparacin
estadstica de la cuantificacin de los cidos nucleicos. En
general, para los 3 mtodos de cuantificacin se obtuvo un
mejor rendimiento con el mtodo B pero la diferencia no
result estadsticamente significativa (p= 0.063 para
DynaQuant y p= 0.599 para Quantiblot).

Como puede observarse en la cuadro 2, el anlisis de ARN

presente en los extractos mostr diferencias estadsticamente

significativas (p= 0.003 de K-W) entre los mtodos de
extraccin, siendo el mtodo B el que extrajo la mayor cantidad
de ARN. Por su parte, el anlisis de protenas tambin mostr
una diferencia significativa entre los mtodos (p= 0.011 K-W),
detectndose una mayor cantidad en el mtodo A(ver Cuadro
2). El anlisis de los valores de porcentaje de pureza emitidos
por el Gene Quant para cada uno de los extractos no present
diferencias significativas entre los mtodos de extraccin (p=
0.164 de ANOVA); sin embargo, el anlisis de la proporcin
(A260 nm/A280 nm) revel posibles problemas de
contaminacin en los extractos de los mtodos B y C por
presencia de protenas ya que las proporciones eran menores a
1.7 (Miesfeld 1999).

 Para la proporcin (A260 nm/A230 nm), el

resultado del mtodo A fue de 2.7 y para los

mtodos B y C se obtuvo valores inferiores a 2.0
Amplificacin del ADN por PCR, segn el mtodo
de extraccin: La comparacin general entre los
diferentes mtodos de extraccin segn la tasa de
xito en las amplificaciones de STRs (porcentaje
de amplificaciones positivas versus
amplificaciones negativas) mostr que las mismas
fueron de 50%, 40% y 33% para los mtodos A,
ByC

CONLUSIONES
-Es importante que la muestra para sacar el ADN en este

caso los huesos estn en una

condicin aceptable ya que esto determinara cuanta

muestra podemos sacar y de que calidad

es y cuantas pruebas le podemos realizar.
-Los huesos son la mejor forma o el mejor material del cual

se puede extraer ADN ya que

poseen componentes calcificados, que lo hacen resistente al

paso del tiempo.

-Se obtuvo mayor cantidad de ADN de los

huesos de contexto otro quedando segundo los

tipo Exhumado y por ultimo Acuatico
evidenciando que el ambiente influencia mucho
en las muestras.
- No se detectaron inhibidores en las muestras

del contexto otro pero si en las del tipo

exhumado y acutico siendo estas del 44 y 33%

respectivamente.

VENTAJAS
Poder obtener el mejor mtodo para la

extraccin de ADN
Maneras mas efectivas de y rpidas para el
reconocimiento de un cuerpo
Permite identificar el uso primordial de un
mtodo en especifico

DESVENTAJAS
En la medicina forense las circunstancias

sern ms favorables a algunos mtodos

La remocin de contaminantes en las
muestras es tarea dificilque
generalmente lleva a errores de
amplificacion
Tratndose de mtodos fenolicos de
desproteinizacion la presencia de
protenas en los extractos para la
obtencin del ADN es un indicador de
deficiencia del procedimiento

SUGERENCIAS
Mejora en algunos procedimientos para poder

aumentar la eficacia de los mtodos

empleados.
Evitar la presencia de protenas en las
muestras para agilizar el proceso
Para futuros estudios podra experimentarse
con muestras de casos forense ocurridos
recientemente
Clasificar los mtodos dependiendo de cual
convendra utilizar en cierto tipo de caso
forense

BIBLIOGRAFIA
bmedicinaforense. (2010). biotecnologia en la

medicina forense. 15 de abril del 2016, de

bmedicnaforense Sitio web:
http://bmedicinaforense.blogspot.pe/
esteban lara. (2010). biotecnologia forense.
15 de abril del 2016, de scribd Sitioweb:
http://www.scribd.apuntatumuerte.com

GRACIA