MTODOS DE

ESTUDIO
PARASITOLOGA

Lic. TM Manuel Quintanilla C.

manuelqc8@gmail.com
 IMPORTANCIA
Diagnosticar patologas propiciando su
prevencin y/o deteccin precoz (enteroparasitosis).

Promover el diagnstico diferencial entre posibles

patologas, dando oportunidad de tratamiento
especfico (infecciones: parasitarias, micticas,
bacterianas).

Evaluacin de una enfermedad ya instalada

contribuyendo a escoger la mejor conducta teraputica
(hidatodisis).

FASES DEL PROCESO DE

LABORATORIO

Es la que insume mayor tiempo,

PRE- solicitud, obtencin, almacenamiento,
ANALITICA transporte, recepcin y la que est sujeta
a mayor porcentaje de errores.

Corresponde a la realizacin del

procedimiento diagnstico. Incluye
ANALITICA validacin de las tcnicas, calibracin de
equipos, ejecucin de controles de calidad, etc.

Clculos, interpretacin de resultados,

POST- validacin, emisin del informe.

ANALITICA
METODOS
DIRECTOS

Son aquellos que ponen en

evidencia el agente o sus
formas evolutivas, fragmentos,
antgenos, ADN, etc.
MTODOS DIRECTOS
PARASITOLGICOS

Son los que permiten visualizar

directamente parsitos en un material
patolgico, o aislarlos del mismo.

Los parsitos pueden ser vistos estudiando

el material en fresco o mediante
coloraciones u otros artificios.
MTODOS DIRECTOS

Los materiales pueden ser tratados previamente, para

concentrar y/o mejorar la visualizacin de parsitos y
hongos en ellos.

EJEMPLOS
Coproparasitario: incluye limpieza de la suspensin de
materias fecales y enriquecimiento por centrifugacin.

Tratamiento de expectoraciones con soluciones

custicas (reblandece el mucus y aclara las
preparaciones).
EXAMEN EN FRESCO
El material se coloca sobre una lmina portaobjetos,
montado en algn medio lquido o no, cubierto con una
laminilla, para su observacin al microscopio. (40x)

Los lquidos de montaje (solucin salina fisiolgica,

hidrxido de sodio o potasio 10-20%,
lactofenol-azul algodn, lugol, glicerina tamponada)
facilitan la observacin microscpica evitando la
distorsiones de la luz, reblandeciendo el material y/o
aumentando el contraste de los objetos buscados.
 EXAMEN EN FRESCO

Quistes de E.histolytica/dispar Huevo de A.aegypti

Larva
C. neoformans S.stercoralis
COLORACIONES
COLORACIONES PANPTICAS:
Giemsa, May Grunwald- Giemsa,
hematoxilina eosina, otras
coloraciones hematolgicas (frotis
o cortes histolgicos).
Quiste tisular
de T.gondii
HE GIEMSA

Frotis. H. Corte histolgico.

capsulatum Candida spp. Frotis. Pseudoquiste T. gondii.
COLORACIONES
ESPECFICAS
Ziehl-Neelsen, Kinyoun
(cido-alcohol resistencia)
Gomori, methenamino plata
(pared de los hongos)

Tricrmica (protozoarios Hematoxilina frrica (membrana,

entricos, microsporidios) ncleos y otros ccommpponneenntes de
los protozoarios)
CULTIVOS

MEDIOS GENERALES

Sirven para el aislamiento primario de una

variedad de agentes
Pueden ser modificados con el agregado o cambio de
algn componente para darle mayor especificidad

EJEMPLOS
Sabouraud, para hongos
NNN, para protozoarios hemoflagelados
 TCNICAS DE
AISLAMIENTO POR
INOCULACIN
En animales de experimentacin.
Excepcional (aunque es necesario frente a
determinados agentes de difcil identificacin o
aislamiento por otros medios, ej: Toxoplasma
gondii en lquido amnitico)
Exige seguir rigurosas normas de biotica,
bioseguridad y calidad operacional.
 DETECCIN DE OTROS
COMPONENTES PARASITARIOS

Mediante diversas tcnicas tambin se puede

evidenciar:

Antgenos.
cidos nucleicos.
Otras molculas.
TCNICAS
INMUNOLGI
CAS
DIRECTAS
DETECCIN DE
ANTGENOS
CIDOS NUCLEICOS
MTODOS
INDIRECTOS
INMUNOLGICOS

Son los que permiten suponer la presencia

de parsitos en el organismo, mediante el
estudio de la respuesta del hospedero
(produccin de Anticuerpos especficos,
reacciones de hipersensibilidad tarda,
produccin de linfoquinas, etc.).
TCNICAS DE
PRECIPITACIN
EN GEL DE
AGAR
TCNICAS DE
AGLUTINACIN
Aglutinacin directa:
Suspensiones de parsitos enteros son
enfrentadas a sueros de pacientes. Los Ac (Y)
presentes aglutinan los parsitos, formando
acmulos consistentes.

Aglutinacin de partculas:
(Ltex, betonita, carbn,etc.):
Suspensiones de partculas inertes, con su
superficie cubiertas de Ag parasitarios, son
enfrentadas a sueros de pacientes. Los Ac
presentes aglutinan estas partculas, formando
acmulos consistentes.
TCNICAS DE
AGLUTINACIN
TCNICAS DE
MARCADODE LA
REACCIN Ag-Ac
TCNICAS DE
MARCADODE LA
REACCIN Ag-Ac
SEGN LA
FINALIDAD
DEL ESTUDIO
Utilizadas para
Tcnicas de estudio de grandes
screening poblaciones.

Utilizadas para
Tcnicas confirmar un
confirmatorias diagnstico en
forma especfica.
 CLASIFICACIN
Tcnicas Inmunolgicas

CUALITATIVOS CUANTITATIVOS

miden la
Positivos
concentrac
o
in del Ac
negativos
a estudiar.
 CUANTITATIVO
S

TTULOS: mxima dilucin del suero problema qu

arroja un resultado positivo (Ej: 1/16; 1/128; 1/2048)

UNIDADES PREDETERMINADAS: cuando el valor

obtenido como resultado es comparado a un patrn
predeterminado de densidad ptica, fluorescencia ,
luminiscencia o concentracin conocida de Ac
especficos, que expresa el punto de corte de la tcnica
(cutoff o valor lmite que diferencia positivos y
negativos) (Ej: UI/ml; Index Value; MIU/ml; OD; etc.)
COMPORTAMIENTO DE
LAS TCNICAS
SEROLGICAS I

DESDE EL PUNTO DE VISTA ANALTICO

SENSIBILIDAD: expresa la capacidad de la

tcnica para detectar las menores concentraciones
posibles de los anticuerpos (o antgenos) buscados.

ESPECIFICIDAD: expresa la capacidad de esa

tcnica para diferenciar los anticuerpos especficos (o
antgenos) buscados de otros presentes en el material
en estudio.
COMPORTAMIENTO DE LAS
TCNICAS SEROLGICAS II

DESDE EL PUNTO DE VISTA CLNICO

SENSIBILIDAD: expresa la capacidad de la

misma para diagnosticar casos positivos en el
conjunto de personas estudiadas.

ESPECIFICIDAD: expresa, la capacidad de

determinar resultados verdaderos.
 AUTOMATIZACI
N
Existen equipos electrnicos, que permiten la
automatizacin de los procedimientos y el anlisis
computacional de los resultados.

La lectura y medida de la [ Acs-Ag ] se hace

mediante colormetros, fluormetros,
fotmetros, etc.,

Facilitando la reproducibilidad de las tcnicas, mayor

precisin y registro de resultados, mejor cuantificacin
y valoracin de los mismos.

Disminuye los errores y permite un mejor control de

 EJEMPLO

Cono fase slida y

pipeteo
Tir
Buffer Substrat
a
lavado o

Muestra Conjugad photodiod

Diluyente o o
REACCION REACCION
INMUNOLOGICA ENZIMATICA