Estructura y funcin del ADN

Historia del descubrimiento de la molcula

Experimentos clsicos en torno a mitosis

Acetabularias de
Hmmerling y
Brachet (1930 -
1940)
1869 Friedrich Miescher descubre lo
que hoy conocemos como ADN
Fleming Beneden y Strasburger describen en 1890
la destribucin cromosmica durante la divisin
celular.

Walther Flemming
1910 Thomas Hunt Morgan
demuestra que los genes residen
en los cromosomas
1933 Jean Brachet demuestra que el ADN se encuentra en
los cromosomas y que el ARN est presente en el
citoplasma de todas las clulas

1941 Edward Lawrie Tatum y

George Wells Beadle
muestran que los genes
codifican las protenas
 El material gentico es ADN o
una protena?
Experimento de Griffith (1920)
Trat de obtener una vacuna para proteger a la gente
contra la bacteria Streptococcus pneumoniae, que
produce la neumona. No tuvo xito, pero
descubri el fenmeno de la transformacin.
Griffith descubri dos variedades de Streptococcus, una
con cpsula y otra desnuda. Propuso la hiptesis
que la cpsula afecta la capacidad de las bacterias
para causar la enfermedad y experiment con
ratones de la siguiente manera:
1. Inyect bacterias encapsuladas vivas.
Resultado: Los ratones contrajeron
neumona y murieron. La sangre
contena bacterias encapsuladas.

2. Inyect bacterias desnudas vivas.

Resultado: Permanecieron saludables.
No se encontraron Streptococcus en la
sangre.

3. Inyect bacterias encapsuladas

muertas.
Resultado: Los ratones no tuvieron
neumona y carecan de bacterias
vivas.
4. Inyect una mezcla de bacterias
encapsuladas muertas y bacterias desnudas
vivas.
Resultado: Tuvieron neumona y estaban
infestados de bacterias encapsuladas vivas
que crecieron
Qu significaban los
experimentos?
Una hiptesis era que las bacterias vivas
haban adquirido molculas de informacin
gentica provenientes de las bacterias
muertas.
Las molculas codificaban las instrucciones
para formar cpsulas; por lo tanto,
transformaban a las bacterias desnudas en
bacterias encapsuladas.
 La molcula de la
transformacin era el ADN?
 Avery, MacLeod y McCarty de la Universidad
Rockefeller en 1944 aislaron ADN de bacterias
encapsuladas, las mezclaron con bacterias
desnudas vivas y produjeron bacterias
encapsuladas vivas.
Para demostrar que la transformacin la
ocasionaba el ADN, y no pequeas cantidades de
protenas que contaminan al ADN, trataron
diferentes muestras con enzimas que destruyen
protenas.
Dichas enzimas no afectaron la capacidad de
transformacin de las muestras de ADN; por otro
lado, al tratar muestras con enzimas que destruyen
el ADN, se impidi la transformacin.
1944 Oswald Theodore Avery, Colin McLeod y Maclyn McCarty aslan ADN como
material gentico

Colin MacLeod, Maclyn McCarty, Detlev Wulf Bronk,

Theodosius Dobzhansky, and Wendell M. Stanley at the
Avery Memorial Gateway dedication ceremony
1944 Oswald Theodore Avery, Colin McLeod y Maclyn
McCarty aslan ADN como material gentico

Oswald T. Avery (1940s)

 Historia de la gentica

1950 Erwin Chargaff muestra que los cuatro nucletidos no estn presentes en los cidos nucleicos
en proporciones estables, pero que parecen existir algunas leyes generales. La cantidad de
adenina, A, por ejemplo, tiende a ser igual a la de timina,

ATGCTTATTC A=T
TACGAATAAG C=G

1905 - 2002)
El ADN es la molcula que contiene la informacin gentica

Hershey & Chase

Lab rats ... James Watson, above left, and Francis Crick weren't
going to let Rosalind Franklin get in the way of scientific glory.
Photo-illustration: Harry Afentoglou
 Rosalind Franklin

Durante 50 aos, la historia de la ciencia ha

sostenido que los descubridores de la doble hlice
del ADN fueron Crick y Watson. En los ltimos aos,
las investigaciones han sacado a la luz la labor de
Rosalind Franklin, sin cuyas radiografas sus
colegas no hubieran llegado tan rpido a la meta.
Hoy se puede decir que si stos son los padres
del hallazgo de la estructura helicoidal de la
molcula, Franklin merece ser considerada la
madre.
 El ADN de los
cromosomas se compone
de dos cadenas enrolladas
una a la otra en una doble
hlice.
Los azcares y fosfatos
que unen un nucletido al
siguiente forman el
esqueleto en cada lado de
la doble hlice.
En tanto que las bases de
cada cadena se aparean en
el centro de la hlice.
Solo pares
especficos de
bases, llamados
pares de bases
complementarias,
se pueden unir en
la hlice mediante
enlaces de
hidrgeno: adenina
con timina y
guanina con
citosina.
 COMPOSICIN DEL ADN
La molcula de ADN est
compuesta de subunidades,
llamadas nucletidos,
unidos en cadenas largas.
Cada nucletido consta de
un grupo fosfato, un azcar
de cinco carbonos, la
desoxirribosa y, una base
nitrogenada.
Bases Nitrogenadas
En el ADN se
presentan cuatro bases
diferentes:
Adenina
Guanina
Timina
Citosina
MOLCULA DE ADN
DIMENSIONES
DEL ADN
REPLICACIN DEL ADN

La clave de la constancia

PROCES
 La replicacin del ADN
Es el proceso mediante el
cual la molcula de ADN
hace copias de s misma
(y, por tanto del
cromosoma).
En el ncleo hay muchos
nucletidos libres que son
los bloques de
construccin del nuevo
ADN .
 Pasos de la replicacin del ADN
La doble hlice se desdobla de modo que las dos cadenas de nucletidos quedan
paralelas y se rompen los enlaces entre las bases. Las dos cadenas de nucletidos
se separan, empezando en un extremo y abrindose hasta el otro.
Cada mitad de la molcula sirve como un molde para la formacin de una nueva
mitad del ADN. Las bases de los nucletidos libres se unen con las bases
correspondientes en las dos cadenas de nucletidos expuestas. La unin especfica
de A con T y de C con G, asegura que las copias nuevas de ADN sean copias
exactas del original.
 Pasos de la replicacin del ADN
Se forman enlaces entre los fosfatos y los azcares de los
nucletidos que se han apareado con las cadenas de ADN. El
resultado es que se forman dos copias idnticas de la molcula
original de ADN.
Las dos nuevas molculas de ADN se enroscan y de nuevo
toman la forma de una doble hlice.
1958 El experimento Meselson-Stahl demuestra que el ADN se replica de modo semiconservador.
 Historia de la gentica

1956 Joe Hin Tjio y Albert Levan establecen en 46 el nmero de cromosomas en humanos

Joe Hin Tjio. Albert Levan

Estructura de un cromosoma
Qu es un gen?
Es una secuencia de nucletidos en la
molcula de ADN, equivalente a una unidad
de transcripcin.
Contiene la informacin, a partir de la cual se
sintetiza un polipptido, una enzima, un cido
ribonucleico: mensajero, de transferencia o
ribosomal.
En el genoma humano la mayora de los
genes son nicos y se expresan en forma
independiente. Los genes segregan cuando
ocurre la meiosis.
DOGMA
DOGMACENTRAL
CENTRALDE
DELA
LABIOLOGA
BIOLOGAMOLECULAR
MOLECULAR

Hebra
Hebramolde
molde
Transcripcin
Transcripcin

Traduccin
Traduccin
 Naturaleza
Naturaleza del
del material
material hereditario.
hereditario.
Los
Los cidos
cidos nucleicos
nucleicos yy sus
sus componentes
componentes
ADENINA
ADENINA(A)
(A) GUANINA
GUANINA(G)
(G)

Los
Loscidos
cidosnucleicos
nucleicosson
sonmacromolculas
macromolculascon con
estructura
estructurade
de polmero
polmerolineal,
lineal,donde
dondelos losmonmeros
monmerossonson
nucletidos.
nucletidos.Cada
Cadanucletido
nucletidoest
estformado
formadopor
porun
unazcar
azcar
pentosa,
pentosa,un
unfosfato
fosfatoyyuna
unabase
basenitrogenada.
nitrogenada.Las
Lasbases
bases
pueden
puedenser
serpurinas
purinas(de
(dedoble
dobleanillo),
anillo),como
comolalaAdenina
Adeninayy
la
laGuanina...
Guanina...
 3 4
5
6
2
1

TIMINA
TIMINA(T)
(T) URACILO
URACILO(U
(U) ) CITOSINA
CITOSINA(C)
(C)

Tambin
Tambinpueden
puedenser serpirimidinas,
pirimidinas,dedeanillo
anillo
sencillo,
sencillo,como
comola la timina
timinayylalacitosina,
citosina,en
enelel
ADN;
ADN; yyla
lacitosina
citosinayyel el uracilo
uraciloenenel
elARN
ARN
 5

ATENCIN:
ATENCIN:Un Un
hidrgeno
hidrgenoenenla
la
posicin
posicin2
2

Pentosa
Pentosa del
del ADN:
ADN: Desoxirribosa
Desoxirribosa
Desoxirribunucletido
Desoxirribunucletido
La
Lamolcula
molculadedeADN
ADNes
es una
unadoble
doblehlice
hlice
antiparalela
antiparalela(Watson
(WatsonyyCrick
Crick1953)
1953)
Fosfatos
Fosfatos van
van Hebras
Hebras
unidos
unidosalalazcar
azcar antiparalelas
antiparalelas
en
en el C-5 yelelC-3
el C-5 y C-3

Punta
Punta33libre
libre
Punta
Punta55libre
libre

ACIDOS
ACIDOSNUCLEICOS
NUCLEICOS
La
La funcin
funcin codificante
codificante del
del ADN
ADN est
est
determinada
determinada porpor la
la secuencia
secuencia de
de sus
sus
nucletidos
nucletidos (bases)
(bases)
 EL
ELADN
ADNes
esla
lamolcula
molculaque
quepermite
permiteperpetuar
perpetuarla
lavida:
vida:
REPLICACIN
REPLICACINDEL
DELADN
ADN
Hebra
Hebramolde
molde

Hebra
Hebralder
lder

Hebra
Hebraretardada
retardada
Replicacin
Las ADN polimerasas requieren como
sustrato la punta 3 hidroxilo libre de
una base apareada para catalizar la
unin de otro nucletido.
El OH libre se une al 5-fosfrico del
deoxinuclesido 5 trifosfato,
liberndose un pirofosfato inorgnico
 ADN polimerasas, ligasas.
ADN polimerasas de alta fidelidad dirigidas
por ADN: dos de ellas replican los
cromosomas, () especfica para la hebra
retardada porque tiene una subunidad primasa,
() lder y elongacin de la hebra retardada,
otras dos reparan el ADN ( y ), y una de ellas
replica y repara el ADN mitocondrial ().
tienen actividad 3 - 5 exonucleasa
y tienen actividad de reparacin del ADN
de tipo excisin de nucletidos y de bases.
 ADN-polimerasas..
ADN polimerasas propensas a errores dirigidas
por ADN: un grupo grande que replica con muy baja
fidelidad. La tasa de error de la polimerasa (iota) es
20.000 veces mayor que la de . Se expresan en
cantidades altas en el sistema inmune, implicadas en
la hipermutabilidad en linfocitos B y T.
ADN polimerasas dirigidas por ARN: usan como
molde una hebra de ARN: transcriptasas reversas.
Ej: Actividad polimerasa en la enzima telomerasa
(Tert) que replica la parte final de los extremos lineales
de los cromosomas.
Transcriptasa reversa endgena, que ocasionalmente
puede convertir ARN en ADNc e integrarlo al genoma.
 Proteinas principales replicacin
Topoisomerasas: rompen una hebra y la tensin del
enrrollamiento de la hlice se relaja
Helicasas: completan el desenrrollamiento
ADN polimerasas: complejos agregados de
diferentes protenas.
Primasas: sintetizan los iniciadores de ARN que se
necesitan para iniciar la replicacin
Ligasas: sellan las lagunas dejadas por las
ribonucleasas cuando remueven los primers, catalizan
la unin fosfodiester entre nucletidos adyacentes.
Proteinas de unin a la hebra sencilla del ADN:
estabilizan la horquilla de replicacin.
Estructura tridimensional de una helicasa: un hexmero con
seis sitios de enlace al ATP. La hidrlisis secuencial de
estos ATPs permite el desenrrollamiento de la doble hlice.
La ADN polimerasa
Sntesis del primer de ARN por una primasa
En eucariontes los
fragmentos
de Okasaki tienen 200
nucletidos,
los primers unos 10.
Los iniciadores de ARN se
eliminan mediante una
ARNasa
especfica que reconoce
dobles
hlices hbridas ARN-ADN
La laguna es llenada por una
polimerasa y la unin
finalmente
es realizada por una ligasa
La ligasa acopla la hidrlisis de un ATP para hacer
ms favorable la reaccin de unin entre el fosfato y el
hidroxilo libre, liberando al final un AMP.
Efecto de las protenas de enlace con la hebra sencilla del ADN
Estructura de las proteinas de enlace a la hebra sencilla
Modelo de la protena humana
Horquilla de replicacin en los mamferos: Dos polimerasas
diferentes en la hebra retardada, primero empieza la pol
sintetizando el primer de ARN algo del ADN porque tiene una
subunidad primasa, luego sigue trabajando la pol en la
elongacin del fragmento
Reparacin del ADN
 Tipos de dao al ADN
Mecanismos endgenos:
1. Prdida de bases tipo purinas por ruptura
espontnea del enlace con el azcar
5000/da/clula humana
2. Deaminacin espontnea de citosinas y
adeninas produce uracilo e hipoxantina
3. Molculas con oxgenos reactivos atacan los
anillos de las bases nitrogenadas
4. La ADN polimerasa puede incorporar bases
equivocadas en la replicacin
5. Errores en la replicacin o recombinacin
provocan fracturas en el ADN
 Agentes extracelulares

1. Radiaciones ionizantes: rayos gamma y

rayos X causan rupturas en la doble hlice
2. Luz UV causa la formacin de los dmeros
de timina
3. Qumicos ambientales como agentes
alquilantes y otras sust qumicas forman
aductos con las bases del ADN:
hidrocarburos, productos naturales como las
aflatoxinas.
11_21.jpg
11_21_2.jpg
Mecanismos de deteccin y reparacin
de daos al ADN
Sistemas enzimticos para reconocer,
eliminar y reparar daos inducidos al
ADN se han descrito y estudiado bien
en bacterias
El estudio de los sndromes
hereditarios de predisposicin al cncer
ha permitido ampliar el conocimiento
en el ser humano
Capitulo 14: del ADN a las protenas
 Transmisin de la informacin
La transmisin se lleva a cabo
principalmente gracias a la existencia de los
cidos ribonucleicos o ARNs
ARN mensajero (lineal de hebra simple)
ARN de transferencia
ARN ribosomal
Y a las ARNs polimerasas
 ATENCION:
ATENCION:
Grupo
Grupohidroxilo
hidroxilo
en
enla
laposicin
posicin22
Ribonucletido
Ribonucletido
 URACILO
URACILO sustituye
sustituyeaalalaTIMINA
TIMINA

La
Lasecuencia
secuenciacorrespondiente
correspondienteaauna unaunidad
unidaddede
transcripcin
transcripcin en
enelelADN
ADNse se transcribe
transcribeen
enuna
unahebra
hebra
complementaria
complementariade deARN,
ARN,llamada
llamadatranscrito
transcrito
primario,
primario, aapartir
partir del
del cual,
cual, por
por modificaciones
modificacionespost-
post-
transcripcionales
transcripcionales,, se
seorigina
originael elARN
ARN mensajero
mensajero
TRANSCRIPCIN
TRANSCRIPCIN

La ARN polimerasa
se activa cuando
forma un complejo
con los factores de
transcripcin o
elementos
trans. La interaccin
de estos entre s, y con
las secuencias
reguladoras del ADN
(los factores cis) es la
que determina donde,
cuando y con qu
rapidez ocurre la
transcripcin
Modelo simplificado de un gen humano

PROMOTOR
Secuencia que no se traduce Secuencia que no se traduce

Intrn 1 Intrn 2 Intrn 3

5` 3`

Regin reguladora EXON 1 EXON 2 EXON 3 EXON 4 EXON n Regin reguladora

Unidad de transcripcin

Despus
Despusdel
delprocesamiento
procesamientopostranscripcional
postranscripcionaldel
delARN
ARN
transcrito
transcritoprimario,
primario,la
lasecuencia
secuenciade
deARNm
ARNmcorresponde
correspondeaalas
las
secuencias
secuenciasde
delos
losexones
exonesyylas
lasno
nocodificantes
codificantes(UTRs).
(UTRs).
Dra. Patricia Cuenca Berger
INISA
Procesamiento postranscripcional del ARN
Corte en 5 y unin de un cap(5-metilguanosina),
para proteger del ataque de las exonucleasas,
facilitar el transporte ncleo-citoplasma, y el
anclaje del ARNm al ribosoma
Corte en 3 y unin de una cola de poli-A (200
AMP), confiere estabilidad y ayuda en la
traduccin
Eliminacin de los intrones, por formacin de un
complejo snARNs-proteinas: spliceosoma, el
cual es especfico. La especificidad de la reaccin
est dada por la complementaridad de las bases
entre los pequeos ARNs nucleares y el ARN
transcrito primario
ARN
ARNdedetransferencia
transferenciaactivado:
activado:
cargado
cargadocon
conelelaminocido
aminocido
correspondiente
correspondiente
 CODIGO
CODIGO
GENETICO
GENETICO
ARNm
ARNm
DOGMA
DOGMACENTRAL
CENTRALDE
DELA
LABIOLOGA
BIOLOGAMOLECULAR
MOLECULAR

Hebra
Hebramolde
molde
Transcripcin
Transcripcin

Traduccin
Traduccin
TRADUCCIN
TRADUCCIN
ARN
ARN---
---Protena
Protena
Cuatro monmeros de aminocidos

Reaccin de
condensacin

Polipptido

Enlace peptdico catalizado por el complejo enzimtico localizado en el ribosoma

01_03.jpg
Estructura general de un aminocido

POLARES Cargados

Sus molculas estn parcialmente cargadas

 01_03_2.jpg
Polares neutros

En sus residuos tienen grupos aminos, hidroxilos o sulfidrilos

01_03_3.jpg
No polares o hidrofbicos
Estructura primaria Residuos de los distintos aminocidos
(Secuencia lineal)

Estructura secundaria Estructura terciaria

(forma adoptada espontneamente) (Forma tridimensional: globular,
tubular, como una rueda, etc.)

Las protenas sufren transformaciones post-traduccionales

Estructura cuaternaria: combinacin de monmeros
Anemia falciforme:

Hemoglobina

HbA se transforma
en HbS

La mutacin es un
cambio del segundo
nucletido en el
codn 6 en la
subunidad beta

Adenina por timina

cido glutmico
por valina

HbS
Seleccin Natural
Ventaja heterocigoto
Malaria
Variaciones
Variacionesenenla
lasecuencia
secuencia de
debases
basesdel
delADN
ADNque
queno
nocausan
causan
alteraciones
alteracionesfuncionales
funcionalespatolgicas,
patolgicas, son
sonalelos
alelos oo
polimorfismos
polimorfismosdeldelgen
genexistentes
existentes en
enla
lapoblacin
poblacin(>1%)
(>1%)

Alteraciones
Alteraciones en en la
la secuencia
secuencia dede bases
bases del
del ADN
ADN que
que
alteran
alteran la
la funcin
funcin normal
normal (produciendo
(produciendo patologa)
patologa)
del
del producto
producto gnico
gnico son
son mutaciones
mutaciones
 Mutaciones
Germinales o constitucionales:

El individuo las adquiere por herencia de sus padres, puede

ocurrir de novo en una clula germinal de alguno de los
padres.
Todas las clulas del cuerpo llevan la misma mutacin
Ejemplo: enfermedades hereditarias

Somticas:

Se adquiere en el transcurso de la vida

Es portada nicamente por la clula afectada y sus clulas
hijas. El individuo es un mosaico.
Ejemplo: cncer
 Clases de mutaciones:

Sustitucin de bases:

1- Sustituciones sinnimas (otro codn : mismo aa)

2- Mutaciones sin sentido (cambio a codn STOP)
3- Mutaciones de sentido equivocado:
sustitucin del aa en la proteina
4- Mutaciones en el sitio de corte y empalme del
ARN.
Otros tipos de mutaciones:

a- Mutaciones de cambio en el marco de lectura

- deleciones
- duplicaciones o insersiones
b- Mutaciones dinmicas

La patologa molecular intenta explicar porque un

cambio gentico dado podra resultar en un fenotipo
clnico particular.
Prdida de funcin del gen PAX3: Sndrome de Waardenburg tipo I,
sordera y anormalidades pigmentarias

16_01.jpg

Diferentes tipos de mutaciones afectan al gen, todas causan prdida de funcin

y el mismo resultado clnico
Cambio fenotpico por dos mecanismos:

1- prdida o reduccin de la funcin normal.

2- el producto podra adquirir una nueva funcin.

Por qu las mutaciones tienen diferentes tipos de

herencia, dominantes, recesivas, etc?

Las leyes de Mendel se cumplen en la herencia de algunos

rasgos y enfermedades humanas, las que son codificadas
por un solo gen.

Leyes de Mendel: redescubiertas 1900

Modelo de la doble hlice del ADN: 1953
Mutaciones hereditarias:
Dominante o recesiva?

Mutaciones recesivas llevan a un producto gnico con

funcin reducida o con prdida de funcin.
- Para la mayora de los genes, es suficiente el producto de uno
de los alelos (la mitad) para que se lleve a cabo la funcin
normal. Por eso es que la mayora de los errores innatos del
metabolismo son recesivos.
Mutaciones dominantes llevan a un producto gnico con
ganancia de funcin.
- La ganancia de funcin causa fenotipos dominantes
porque la presencia del producto normal no previene
que el producto mutado se comporte anormalmente.

La adquisicin de una nueva funcin es un evento raro en

enfermedades hereditarias, pero muy comn en cncer
 Clases de mutaciones:

Sustitucin de bases:

1- Sustituciones sinnimas (otro codn : mismo aa)

2- Mutaciones sin sentido (cambio a codn STOP)
3- Mutaciones de sentido equivocado:
sustitucin del aa en la proteina
4- Mutaciones en el sitio de corte y empalme del
ARN.
Otros tipos de mutaciones:

a- Mutaciones de cambio en el marco de lectura

- deleciones
- duplicaciones o insersiones
b- Mutaciones dinmicas

La patologa molecular intenta explicar porque un

cambio gentico dado podra resultar en un fenotipo
clnico particular.
Prdida de funcin del gen PAX3: Sndrome de Waardenburg tipo I,
sordera y anormalidades pigmentarias

16_01.jpg

Diferentes tipos de mutaciones afectan al gen, todas causan prdida de funcin

y el mismo resultado clnico
Cambio fenotpico por dos mecanismos:

1- prdida o reduccin de la funcin normal.

2- el producto podra adquirir una nueva funcin.

Por qu las mutaciones tienen diferentes tipos de

herencia, dominantes, recesivas, etc?

Las leyes de Mendel se cumplen en la herencia de algunos

rasgos y enfermedades humanas, las que son codificadas
por un solo gen.

Leyes de Mendel: redescubiertas 1900

Modelo de la doble hlice del ADN: 1953
Mutaciones hereditarias:
Dominante o recesiva?

Mutaciones recesivas llevan a un producto gnico

con funcin reducida o con prdida de funcin.
- Para la mayora de los genes, es suficiente el producto
de uno de los alelos (la mitad) para que se lleve a cabo la
funcin normal. Por eso es que la mayora de los errores
innatos del metabolismo son recesivos.
Mutaciones dominantes llevan a un producto gnico
con ganancia de funcin.
- La ganancia de funcin causa fenotipos dominantes
porque la presencia del producto normal no previene
que el producto mutado se comporte anormalmente.

La adquisicin de una nueva funcin es un evento raro en

enfermedades hereditarias, pero muy comn en cncer
 Variabilidad de los genes
Gen Tamao N exones
ARNt 100 pb 2
-globina 1.600 pb 3
colgenoVII 31.000 pb 118
Distrofina 2.400.000 pb 79
Genes dentro de genes:
Ej: el intrn 27 del gen NF1 contiene 3 genes
Genes que se sobreponen:
Ej: algunos genes mitocondriales
 Proteoma
Es el set de genes que codifican para protenas
Distribucin por su funcin en el GH:
Procesos ADN (replic, trans, trad.) 22%
Metabolismo 17%
Divisin celular 12%
Defensa 12%
Regulacin y seales 12%
Estructura 8%
Funcin desconocida 17%